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国家自然科学基金(39670548)
作品数:
2
被引量:17
H指数:1
相关作者:
南庆贤
杜敏
张曼夫
朱美君
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相关机构:
中国农业大学
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发文基金:
国家自然科学基金
International Foundation for Science
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相关领域:
生物学
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1篇
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机构
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中国农业大学
作者
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朱美君
2篇
张曼夫
2篇
杜敏
2篇
南庆贤
传媒
1篇
中国生物化学...
1篇
畜牧兽医学报
年份
2篇
2000
共
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正义和反义Calpastatin cDNA真核表达载体的构建
被引量:1
2000年
本研究利用真核表达载体 pRC/RSV ,将位于 pBS SK质粒中的CalpastatincDNA以正反两个方向构入载体 ;经酶切分析 ,构建的质粒结构正确。所构建质粒 pRC/RSV正义、反义CalpastatincDNA两个表达载体 ,为进一步转化肌细胞 ,人为控制Calpastatin基因的表达 ,从而控制Calpain活性 ,深入研究钙蛋白酶在肌肉发育及肉嫩化中的作用打下基础。
杜敏
南庆贤
朱美君
张曼夫
关键词:
钙蛋白酶
真核表达载体
肌肉发育
钙蛋白酶抑制蛋白功能结构域Ⅳ在大肠杆菌中的表达、纯化及其抗血清的制备
被引量:16
2000年
为了研究钙蛋白酶系统在细胞发育及其它生理过程的功能 .应用 PCR从鼠钙蛋白酶抑制蛋白 ( calpastatin) c DNA中扩增了保守的具有功能的结构域 ( 40 4 bp) ,克隆于 p GEX- KG载体 .重组质粒 p GEX- Calp4在大肠杆菌中经 IPTG诱导可表达分子量约 4 5 k D融合蛋白 GST- Galp4 .诱导表达后的菌体超声裂解液经谷胱甘肽 - Sepharose4 B亲和层析柱得到纯化的 GST- Calp4融合蛋白 ,纯度达电泳纯 .纯化的 GST- Calp4免疫兔 8周后 ,抗血清的效价达 1∶ 64 .Western- blot分析表明制备的抗血清确实可以与肌细胞中分子量为 1 4 0 k D左右蛋白 (亦即完整 calpastatin)发生特异的免疫交叉反应 。
杜敏
朱美君
张曼夫
南庆贤
关键词:
钙蛋白酶抑制蛋白
原核表达
抗血清
纯化
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