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国家重点基础研究发展计划(2006CB708210)

作品数:7 被引量:86H指数:5
相关作者:朱蓓薇丛丽娜吴海涛李英辉刘恒更多>>
相关机构:大连工业大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划辽宁省博士科研启动基金更多>>
相关领域:生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>

文献类型

  • 7篇中文期刊文章

领域

  • 5篇生物学
  • 2篇轻工技术与工...
  • 1篇医药卫生

主题

  • 5篇海参
  • 2篇溶菌酶
  • 2篇酶学性质
  • 2篇海参肠
  • 1篇胆碱
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白水解
  • 1篇乙酰
  • 1篇乙酰胆碱
  • 1篇乙酰胆碱酯酶
  • 1篇溶菌酶基因
  • 1篇失稳
  • 1篇酸酶
  • 1篇体壁
  • 1篇文库构建
  • 1篇磷酸酶
  • 1篇酶促
  • 1篇酶基因
  • 1篇酶学
  • 1篇结构特点

机构

  • 6篇大连工业大学

作者

  • 6篇朱蓓薇
  • 3篇丛丽娜
  • 2篇吴海涛
  • 1篇杜英
  • 1篇程菁恒
  • 1篇路美玲
  • 1篇董秀萍
  • 1篇杨西建
  • 1篇刘恒
  • 1篇孙进健
  • 1篇姜丹
  • 1篇徐赛涛
  • 1篇高杨
  • 1篇李英辉
  • 1篇李翠翠
  • 1篇柴晓倩

传媒

  • 3篇大连工业大学...
  • 1篇中国水产科学
  • 1篇食品与机械
  • 1篇中国生物化学...
  • 1篇Wuhan ...

年份

  • 1篇2012
  • 1篇2011
  • 3篇2008
  • 2篇2007
7 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
海参体壁酶促溶性胶原的提取工艺被引量:9
2008年
以海参体壁为原料,采用胃蛋白酶水解法提取酶促溶性胶原。以酶促溶性胶原得率为指标,通过正交试验确定了胃蛋白酶水解法获取酶促溶性胶原的最佳条件:温度为4℃,酶加量为14%,料液比为1∶500,提取时间为72 h;在此条件下酶促溶性胶原的得率可达到胶原纤维原料的73.44%。实验还确定盐浓度为0.8 mol/L时酶促溶性胶原的盐析效果最好。
李翠翠董秀萍高杨姜丹朱蓓薇
关键词:海参胶原
海参肠碱性磷酸酶的提取及粗酶的特性研究被引量:5
2012年
碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)是最重要的磷酸酶之一,在生物体内直接参与磷酸基团的转移和代谢过程。本文研究了海参肠碱性磷酸酶粗酶的提取,并分析了其酶学特性。经含有0.2%Triton X-100的Tris-HCl缓冲液(pH 8.9)浸提、正丁醇处理、70%硫酸铵沉淀和超滤等步骤获得海参肠ALP粗酶,纯化倍数达到2.74倍,得率为63.32%。ALP粗酶的最适反应pH为11.0,在pH 10.0~12.0稳定性较好;最适反应温度为45℃,在20~45℃具有很高的稳定性。金属离子Mg2+(1~30mmol/L)、Zn2+(<10mmol/L)对海参肠ALP粗酶具有显著的激活作用;Fe3+、Fe2+、Cu2+和Mn2+(10mmol/L)可明显抑制该酶活力。EDTA-Na2、DTT、Na2WO4及Na2HPO4对海参肠ALP粗酶有明显的抑制作用,抑制程度依次为:EDTA-Na2>DTT>Na2WO4>Na2HPO4。
程菁恒朱蓓薇吴海涛孙进健
关键词:海参肠
海参乙酰胆碱酯酶的酶学特性研究被引量:3
2011年
对海参乙酰胆碱酯酶(AChE)粗酶的酶学性质进行研究。采用含0.1%Triton X-100的PBS缓冲液(0.1 M,pH7.4)分别从海参肠和海参体壁中提取AChE,配合Ellman法测定AChE酶活力。结果表明,海参肠与体壁AChE具有相似的酶学性质,其最适反应pH值为8.0,pH在6~8时稳定;最适反应温度为35℃左右,在25~45℃内热稳定性较好。海参乙酰胆碱酯酶粗酶液能有效水解碘化硫代乙酰胆碱(AcSChI),但对碘化硫代丁酰胆碱(BuSChI)的作用较弱。当底物AcSChI浓度大于50 mM时产生明显的底物过量抑制效应。金属离子Sn2+、Zn2+、Hg2+、Ag+、Cr6+、Cu2+及毒扁豆碱和BW284c51均对海参肠和海参体壁乙酰胆碱酯酶有不同程度的抑制作用。
杜英朱蓓薇吴海涛柴晓倩
关键词:海参乙酰胆碱酯酶酶学性质
海参肠中溶菌酶的分离纯化及其酶学性质被引量:27
2008年
从海参肠中分离纯化溶菌酶,并测定其酶学性质及抑菌作用。在4℃下将海参肠打浆,用Tris-HCl缓冲液抽提。上清液经浊点萃取法(CPE)浓缩、阳离子交换柱(CM52纤维素)层析和SephadexG-75凝胶过滤层析分步纯化,得到电泳纯的溶菌酶。该酶的比活力达到3026.1U/mg,纯化倍数为18.7,活力回收为46.0%。对纯化的溶菌酶性质研究表明,该酶相对分子质量约为16000,对溶壁微球菌的最适作用温度为35℃,最适作用pH6.5,在45℃以下和pH4.O~8.0都有较好的稳定性,并与常见金属离子和化学试剂有良好的配伍性。与通常从蛋清中提取的溶菌酶相比较,从海参中分离纯化的溶菌酶具有广谱杀菌功能,即对常见的革兰氏阴性菌和阳性菌细胞壁均有溶解作用。
李英辉丛丽娜朱蓓薇
关键词:海参溶菌酶分离纯化
仿刺参cDNA文库构建以及序列分析被引量:5
2007年
应用Gubler-Hoffman cDNA Library Construction技术,构建仿刺参(Apostichopus japonicus)cDNA文库.测试结果表明,库容量为2.0×106 pfu/mL,利用PCR方法检测cDNA文库插入DNA片段的大小,其长度范围在0.5~4.1 kb,插入片段平均长度为1.3kb,表明该文库达到建库要求,可用来筛选低丰度mRNA的基因克隆.随机挑选100个1kb以上的cDNA克隆进行测序分析,发现有25条EST序列和网上公布的其他物种的序列相似性较高,这些基因与刺参能量代谢和蛋白水解相关.其中发现的几个重要基因,如编码遍在蛋白以及缬酪肽蛋白等的基因,可能与仿刺参自溶过程的蛋白酶水解和细胞凋亡事件相关,进一步的研究还在进行.另有49条EST序列相似性较低,推测可能是功能未知的新基因.仿刺参cDNA文库的成功构建,为下一步大量EST序列分析和功能性新基因的发现,以及从基因水平认识仿刺参这一特殊棘皮动物的生长、发育和代谢规律奠定了基础.
徐赛涛丛丽娜朱蓓薇
关键词:仿刺参CDNA文库蛋白水解
Autophagy Plays a Potential Role in the Process of Sea Cucumber Body Wall “Melting” Induced by UV Irradiation被引量:24
2008年
The changes of tissue appearances and structures in the process of UV-induced "melting" for sea cucumber (Stichopus japonicus) body wall were studied. And the localization and determination of acid phosphatase (ACP), Cathepsin B and Cathepsin L activities were also investigated. The results show that the connective tissue was damaged with many hollows emerging and the regular collagen bundles were broken apart into irregular fragments. Margination of condensed chromatin at the nuclear membrane was observed. Both Golgi's body and endoplasmic reticulure swelled, curled, and eventually double- or multi-lamellar vesicles were formed. A number of autophagic vesicles distributed in all through the whole cytoplasm. ACP becomes more active after UV irradiation. The activities of cathepsin B and cathepsin L increased in UV-treated sea cucumbers and both achieved their maximum under certain conditions, It indicates that autophagy plays a potential role in the "melting" process for sea cucumber body wall induced by UV irradiation.
ZHU BeiweiZHENG JieZHANG ZongshenDONG XiupingZHAO LuluTada Mikiro
关键词:AUTOPHAGY
海参i型溶菌酶基因及其编码产物的结构特点被引量:19
2007年
通过RT-PCR和RACEPCR技术,从海参(Stichopus japonicus)体壁中克隆得到一种溶菌酶基因(GenBank:EF036468).生物信息软件分析表明,其中全长cDNA为713bp,5′非编码区(UTR)246bp,3′UTR29bp,开放阅读框438bp,编码145个氨基酸,包括溶菌酶成熟肽124个氨基酸和信号肽21个氨基酸.对海参溶菌酶与多种无脊椎动物的c、g和i型溶菌酶进行分析比较,发现它与i型溶菌酶有较高的同源性,并具有i型溶菌酶高度保守的2个活性位点,即Glu34和Ser50.活性位点附近具有i型溶菌酶的一段特有的氨基酸保守序列MDVGSLSCG(P/Y)(Y/F)QIK,所以推断克隆的海参溶菌酶为i型.另外,通过搜索蛋白保守结构域数据库,发现海参溶菌酶与医用水蛭失稳酶相似性最高,并且这2个酶的三级结构模型也极其相似.因此推测,海参i型溶菌酶具有双功能特性,既能作用于细菌细胞壁的糖苷键使细胞裂解,又具有失稳酶的一些生化功能,能够水解纤维蛋白,这些特点在海参自溶过程中发挥重要的作用.
杨西建丛丽娜路美玲刘恒朱蓓薇
关键词:海参溶菌酶
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