福建省自然科学基金(2006J0418)
- 作品数：5 被引量：14H指数：2
- 相关作者：曹敏杰苏文金孙乐常张凌晶蔡秋凤更多>>
- 相关机构：集美大学上海水产大学浙江省农业科学院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金国家自然科学基金厦门市科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 黄鳍鲷骨骼肌伴肌动蛋白的纯化及其抗体制备被引量：2
- 2008年
- 采用Sephacryl S-400凝胶过滤柱层析和电洗脱等纯化方法,首次从黄鳍鲷骨骼肌中分离纯化到伴肌动蛋白,并制备了特异性多克隆抗体。多克隆抗体经Protein A-Sepharose亲和层析柱纯化得到高纯度免疫球蛋白G(IgG)。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫斑点印迹(Dot-Blot)和免疫印迹(Western-Blot)等方法对纯化的伴肌动蛋白及其多克隆抗体进行分析鉴定,并研究了不同贮藏条件下伴肌动蛋白的变化情况。SDS-PAGE结果显示本研究从黄鳍鲷骨骼肌中分离纯化了高纯度伴肌动蛋白;Dot-Blot检测结果显示兔抗黄鳍鲷伴肌动蛋白多克隆抗体效价为5×104;Western-blot检测表明兔抗黄鳍鲷伴肌动蛋白多克隆抗体能与肌原纤维蛋白中的伴肌动蛋白发生特异性反应,而与其它蛋白不发生免疫交叉反应。
- 杜雪莉周利亘王锡昌熊何健苏文金曹敏杰
- 关键词：黄鳍鲷纯化抗体
- 鸡白细胞介素-2在毕赤酵母中的表达被引量：1
- 2009年
- 将鸡白细胞介素-2(ChIL-2)基因插入酵母分泌型表达载体pPIC9K构建重组表达载体pPIC9K/ChIL-2,通过电转化构建毕赤酵母(Pichia methanolica)GS115甲醇利用型重组表达菌株.经SDS-PAGE与Western blot分析,证实ChIL-2基因在重组GS115中成功表达出约16 ku与14 ku两条特异性条带,这与天然ChIL-2相对分子质量大小一致,提示ChIL-2可能为糖基化蛋白质.
- 杜明华吴国平张凌晶孙乐常苏文金曹敏杰
- 关键词：白细胞介素-2毕赤酵母
- 草鱼肌肉亮氨酸氨肽酶的分离纯化与性质研究被引量：6
- 2008年
- 通过DEAE-Sephacel离子交换层析、Sephacryl S-200 HR凝胶过滤层析、羟基磷灰石层析和Phenyl Sepharose 6-Fast Flow疏水层析,从草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肌肉中分离纯化得到了一种亮氨酸氨肽酶,并对其生物化学性质进行了研究.结果表明,草鱼肌肉亮氨酸氨肽酶分子量约为105 ku,是单体结构.最适温度为40℃,最适pH为7.5,属于金属蛋白酶.除了Leu-MCA,该酶对其它多种荧光合成底物也有一定程度的分解作用,但对内肽酶对应的荧光底物则没有分解作用.
- 刘冰心曹敏杰蔡秋凤苏文金
- 关键词：草鱼离子交换层析纯化
- 猪肌肉葡萄糖6-磷酸异构酶的分离纯化及性质研究被引量：1
- 2009年
- 葡萄糖6-磷酸异构酶(Glucose-6-phosphate isom erase,GPI;EC5.3.1.9)能催化果糖6-磷酸(fructose-6-phosphate,F-6-P)异构为葡萄糖6-磷酸(glucose-6-phosphate,G-6-P),是糖原酵解过程中的重要酶之一。本研究通过硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose、SP-Sepharose以及Hydroxyapatite层析等方法从猪肌肉中分离纯化得到GPI,纯化倍数为105.6,比活力为159.4U/mg。SDS-PAGE和凝胶过滤层析表明猪GPI为单体蛋白,分子量约为55kDa。免疫印迹检测结果显示,猪GPI能够和抗白姑鱼GPI多克隆抗体发生免疫交叉反应。酶学性质显示猪GPI的最适温度为50℃,最适pH为8.5。在pH8.5、25℃条件下测得其Km值为0.39mmol/L,最大反应速率Vmax为0.61mmol/L·min。
- 周剑孙乐常许慧中汪宁张凌晶曹敏杰
- 关键词：葡萄糖6-磷酸异构酶分离纯化
- 罗非鱼肠道蛋白酶的分离纯化及部分性质研究被引量：4
- 2010年
- 目的:以罗非鱼加工下脚料肠道为原料,分离提取其中的蛋白酶,并对其部分性质进行研究,旨在提供一种简便的食品级蛋白酶制备方法。方法:用茶多酚络合沉淀,Sephadex G-50分离纯化蛋白酶,SDS-PAGE检测分离效果及相对分子质量;以酪蛋白溶液为底物,采用Folin-酚法测定蛋白酶活力。结果:经茶多酚络合沉淀,得到一种复合蛋白酶,命名为TP-肠道蛋白酶;经Sephadex G-50凝胶层析除去茶多酚,得到游离肠道蛋白酶。TP-肠道蛋白酶的最适温度50℃,pH7.2～9.6,米氏常数Km=1.125×103mg/L;游离肠道蛋白酶的最适温度50℃,pH7.2～10.0,米氏常数Km=8.5×102mg/L。结论:TP-肠道蛋白酶和游离肠道蛋白酶均为复合蛋白酶,有望开发成食品级蛋白酶制剂。
- 郭彩华陈昭华卢珍华余祥
- 关键词：罗非鱼蛋白酶茶多酚
