河北省自然科学基金(C2011208028)
- 作品数：11 被引量：63H指数：5
- 相关作者：李艳董振玲牟德华周立华李佳更多>>
- 相关机构：河北科技大学河北一然生物科技有限公司威斯康星大学更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金石家庄市科技局“科技支撑计划项目”河北省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 羊羔美酒大曲中乳酸菌多样性及分子鉴定被引量：6
- 2015年
- 目的:分离和鉴定羊羔美酒大曲中的乳酸菌,探寻其菌群多样性,为酿酒工艺条件改进提供参考。方法:将酒曲进行梯度稀释、富集培养、平板画线等分离纯化,获取乳酸菌单菌落。采用菌落特征和个体形态特征结合的方法进行乳酸菌形态鉴定。乳酸菌的分子鉴定采用重复序列聚合酶链式反应(repetitive sequence-based polymerase chain reaction,Rep-PCR)技术和16S r DNA序列分析法。结果:从羊羔美酒大曲中共得到65株乳酸菌,形态学分为9类。用Rep-PCR技术在75%的相似性上将其区分为5类,经基因序列分析,鉴定为分属于4个属的乳酸菌,分别为:片球菌属(Pediococcus)、明串珠菌属(Leuconostoc)、乳杆菌属(Lactobacillus)、肠球菌属(Enterococcus)。结论:传统微生物分离技术与现代分子鉴定技术相结合,可快速准确鉴定出羊羔美酒大曲中乳酸菌的菌群组成和多样性。
- 李艳董振玲李佳牟德华
- 关键词：乳酸菌分子鉴定RDNA序列分析
- 自选高产β-D-葡萄糖苷酶酿酒酵母KDLYS9-16的酿酒性能被引量：14
- 2017年
- 自选酿酒酵母KDLYS9-16高产β-D-葡萄糖苷酶,在葡萄酒酿造过程中,能够释放单萜烯类物质,增强葡萄酒的香气。以2015年份河北省昌黎和沙城葡萄酒产区赤霞珠和美乐葡萄为实验材料,以商品酿酒酵母F15和SC为对照菌,对KDLYS9-16酵母菌的降糖和酒精生成能力、以及葡萄酒香气进行测定与比较。结果表明自选菌比对照菌具有启动发酵快、降糖迅速、发酵周期短、酒精转化率高等优点。用该菌发酵的昌黎产区赤霞珠干红葡萄原酒中检测到32种香气物质,占总挥发性物质的98.94%,比对照菌香气物质的质量分数和种类都明显增加,显示了很好的酿酒性能和产香潜质,具有良好的应用前景。
- 周立华李艳
- 关键词：酿酒性能香气
- 单萜烯物质检测方法建立及自选酵母KDLYS9-16对单萜烯产生的影响被引量：1
- 2017年
- 采用液液萃取法结合气相色谱氢火焰离子检测器建立一种可同时检测葡萄酒中13种游离态单萜烯类物质的方法,并采用所建方法检测了商品菌SC和自选菌KDLYS9-16两种酿酒酵母发酵的河北省沙城和昌黎2个产区的赤霞珠和美乐葡萄酒中的单萜烯类物质。结果显示,方法的R2为0.996 7~0.999 3,检出限为0.580~1.073 mg/L,相对标准偏差为0.58%~3.18%,回收率为89.98%~107.34%。4种葡萄酒中的单萜烯类物质质量浓度都比发酵前的葡萄汁中高,尤以采用自选高产β-D-葡萄糖苷酶酿酒酵母KDLYS9-16发酵的昌黎产区赤霞珠干红葡萄酒中最高,达到2.855 mg/L,比葡萄汁中增加约3.1倍。赤霞珠葡萄及葡萄酒中单萜烯物质质量浓度比美乐葡萄高,沙城产区的2种葡萄汁中单萜烯类物质质量浓度比昌黎的高,选用不同菌种发酵的葡萄酒中单萜烯物质质量浓度和种类不同。综上,本研究建立方法简单、灵敏性高、重复性好,可用于葡萄及葡萄酒中单萜烯类物质的检测。
- 李艳周立华
- 关键词：液液萃取
- PCR-DGGE技术检测羊羔美酒大曲中细菌多样性被引量：5
- 2015年
- 目的:使用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(polymerase chain reaction-denatured gradient gelelectrophoresis,PCR-DGGE)技术检测羊羔美酒大曲中的细菌,探寻酒曲中细菌菌群的多样性组成,研究羊羔美酒的风味特征。方法:对羊羔美酒大曲进行样品处理、提取总DNA、PCR扩增、DGGE条带的切胶与测序分析。结果:利用PCR-DGGE技术检测到羊羔美酒大曲中包含魏斯氏菌属(Weissella)、乳杆菌属(Lactobacillus)、片球菌(Pediococcus)、芽孢乳杆菌(Sporolactobacillus)、葡萄球菌(Staphylococcus)、高温放线菌属(Thermoactinomyces)和4个不可培养的细菌种类。结论:羊羔美酒大曲中细菌菌群多样性丰富,其中乳酸菌菌群是最大的细菌群系。
- 李艳董振玲李佳李佳
- 关键词：细菌
- 自选酿酒酵母(KDLYS9-3)产β-D-葡萄糖苷酶动力学研究被引量：1
- 2017年
- 自选高产β-D-葡萄糖苷酶的酿酒酵母(KDLYS9-3)在葡萄酒酿造过程中具有增强香气的效果。依据菌体生长和产酶试验,利用Logistic方程、Dose Resp方程和Nelder方程建立了菌体生长和产酶,以及菌体生长速率与酶生成速率之间关系的动力学模型,通过Origin8.0软件进行非线性拟合,并利用Lineweaver-Burk法作图测定了该菌所产β-D-葡萄糖苷酶的动力学参数K_m值和V_(max)值。结果显示:自选酿酒酵母KDLYS9-3的菌体生长与产酶的相关性为部分偶联型,动力学模型与试验值吻合度好,方程能够反映菌体生长与产酶的变化规律。菌体生长8 h后开始产酶,菌体进入对数生长期时酶大量生成,到39 h菌体生长进入稳定期,随着菌体生长进入衰亡期后酶也随之停止产生;利用Lineweaver-Burk法求得酶动力学参数K_m=8.492 579 mmol/L,V_(max)=1.030 715(μmol/L)/min。研究结果为该菌株的理论研究和实际应用奠定了基础。
- 李艳
- 关键词：动力学方程
- 羊羔美酒大曲中酵母菌多样性及分子鉴定被引量：10
- 2014年
- 目的:分离和鉴定羊羔美酒大曲中的酵母菌,探寻酵母菌群多样性组成,为深入研究羊羔美酒的风味特征奠定基础。方法:对羊羔美酒大曲实施多点采样、混合研磨、无菌水梯度稀释、平板画线分离、挑取酵母菌单菌落。酵母菌的形态鉴定采取菌落特征和显微细胞特征结合的方法,分子鉴定采用5.8S rDNA-ITS区域限制性内切酶片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)分析及序列分析法。结果:从羊羔美酒大曲中共分离出474株酵母菌,传统形态学鉴定为14种形态类型,经5.8S rDNA-ITS区域RFLP分析法区分为6种分子类型。经基因序列分析,将其鉴定为分属于6个属的6种酵母菌,分别为:异常毕赤酵母(Pichia anomala)、酿酒酵母(Saccharomyce cerevisia)、阿氏丝孢酵母(Trichosporon asahii)、黏质红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)、浅白隐球酵母(Cryptococcus albidus)、东方伊萨酵母(Issatchenkia orientalis)。结论:羊羔美酒大曲中酵母菌多样性丰富,除酿酒酵母外,还含有多种酵母菌辅助代谢产生各种风味物质,其中酿酒酵母为主要优势菌群。
- 李艳董振玲牟德华
- 关键词：酵母菌
- 乳制品中乳酸菌分子鉴定技术进展被引量：7
- 2012年
- 该文全面论述了乳制品中乳酸菌分类和鉴定的分子鉴定技术,着重阐述了乳制品中乳酸菌鉴定及多态性研究中的DNA指纹图谱技术、基于rDNA序列的分子标记技术和种间特异性PCR等技术的原理、方法及应用。分子鉴定技术的发展为乳酸菌快速分类和鉴定提供了现代可靠的技术手段。根据不同分子鉴定方法分辨率和检测限的不同,可依据研究目的选择合适的分子方法或分子鉴定与表型鉴定结合的方法更有效快速的进行乳制品中乳酸菌的鉴定。
- 董振玲李艳
- 关键词：乳制品乳酸菌
- 橡木片对霞多丽葡萄酒发酵的影响被引量：5
- 2012年
- 该文研究在发酵过程中添加法国中度烘烤橡木制品对霞多丽干白葡萄酒的影响,增加霞多丽干白葡萄酒酿造工艺的选择性。接种酵母菌进行酒精发酵的同时在葡萄汁中添加法国中度烘烤橡木制品,未添加橡木制品发酵的样品为对照样,分别在发酵降糖50%和酒精发酵结束时测定理化指标、有机酸与挥发性化合物的含量。结果表明:添加橡木制品发酵对霞多丽葡萄酒化学物质有一定影响,其总高级醇、总橡木挥发性化合物含量较高。而对照样的葡萄酒中总酸和总酯含量较高,总高级醇含量是添加橡木制品发酵的葡萄酒中总高级醇含量的70%～85%,而酸类物质含量是添加橡木制品发酵葡萄酒的2倍。
- 成晓玲李艳
- 关键词：发酵有机酸挥发性化合物
- 致病菌烟曲霉新基因Afu4g13170生孢致毒相关性初步研究被引量：5
- 2012年
- 【目的】对烟曲霉Afu4g13170基因功能进行初步研究。【方法】利用Double-jointPCR方法和一步基因敲除技术,构建Afu4g13170基因缺失突变株。【结果】序列比对表明烟曲霉Afu4g13170蛋白与构巢曲霉Ani04163蛋白和新型隐球菌Gib2蛋白的氨基酸序列相似性为88.6%;表型分析表明基因破坏使突变株生长迟缓、梗基伸长、孢子分化能力下降,产孢推迟、产孢量减少,色素产生量降低;色谱分析显示基因缺失突变株的产毒能力下降。【结论】烟曲霉Afu4g13170基因可以作为控制曲霉致毒的一个靶位点。
- 刘增然张光一YU Jae-Hyuk
- 关键词：基因破坏烟曲霉表型分析
- 沙城产区酿酒酵母多样性研究被引量：8
- 2012年
- 对沙城产区龙眼葡萄相关环境中分离筛选的酿酒酵母进行多样性研究。在连续3年(2008、2009、2010年)的实验中,共从葡萄园土壤、葡萄酒厂设备表面、接触过葡萄酒厂设备的葡萄汁和自然发酵过程中采集菌源样品227份,共分离得到1358株酵母菌。用5.8S-ITS区域RFLP方法进行分子水平的分类鉴定及赖氨酸培养基复筛,得到了270株酿酒酵母。再利用Interdelta PCR指纹图谱法将酿酒酵母区分为16类,其中土壤5类,自然发酵过程中第2、3、4期分别得到4类、10类和11类;酒厂设备表面3类;接触酒厂设备的葡萄汁3类。酿酒酵母的种类因样品采集时间、采集地点等不同有明显区别。自然发酵过程中得到的酿酒酵母被认为是本土酵母的可能性最大。
- 赵静静李艳
- 关键词：酿酒酵母生物多样性
