王丹
- 作品数：4 被引量：15H指数：4
- 供职机构：吉林大学白求恩医学院病原生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 阴沟肠杆菌噬菌体ФEc53的分离及鉴定被引量：4
- 2012年
- 目的:以14株阴沟肠杆菌为宿主菌,从环境污水中分离噬菌体,分析其生物学特性,鉴定其分型。方法:采用双层琼脂噬斑法分离并鉴定噬菌体。纯化后的噬菌体经负染法染色,通过电镜观察其大小和形态;提取噬菌体基因组,进行酶切电泳分析;通过裂解谱的分析,确认噬菌体的特异性和裂解宿主菌范围。结果:成功分离1株裂解性噬菌体,电镜显示噬菌体的头部呈球形,直径约60nm,尾部长约130nm。琼脂糖凝胶电泳显示其基因组约40 000bp,且含多种酶切位点。特异性实验显示其呈现较窄的宿主范围。结论:分离的阴沟肠杆菌噬菌体(命名为ФEc53)属于有尾病毒目,管尾病毒科,是一种特异性高、裂解性强的毒性噬菌体。
- 王丹史红艳余静丹周佳琦李菁华孙延波
- 关键词：噬菌体阴沟肠杆菌细菌耐药
- 超滤过结合密度梯度离心纯化鲍曼不动杆菌噬菌体方法的建立被引量：5
- 2013年
- 目的探讨获得低浓度内毒素和高滴度鲍曼不动杆菌噬菌体的方法,为制备安全的噬菌体生物制剂提供参考。方法用可截留100 kD以上分子量的超滤离心管浓缩噬菌体裂解液并滤出分子量约为10 kD的内毒素,然后用蔗糖密度梯度离心纯化噬菌体浓缩液;分别测定超滤前、超滤后和纯化后的噬菌体滴度,采用鲎试验测定超滤前后内毒素的浓度,通过SDS-PAGE分析超滤前后和纯化后噬菌体蛋白的纯度。结果经超滤离心法噬菌体滴度从3.9×1010PFU/mL提高至1.68×1012PFU/mL,并可去除99.2%的内毒素;超滤过结合密度梯度离心后的SDS-PAGE可清晰呈现7种蛋白,分子量为29～100 kD。结论超滤过结合密度梯度离心是一种简便、快速浓缩和纯化噬菌体的方法,并可有效地去除裂解液中的内毒素。
- 史红艳余静丹王丹逯茵茵孙延波
- 关键词：噬菌体内毒素
- 鲍曼不动杆菌噬菌体生物学特性的研究被引量：6
- 2013年
- 从污水中分离鉴定鲍曼不动杆菌噬菌体,并对其生物学特性进行分析,为开发针对细菌感染的噬菌体生物制剂提供前期工作。采用双层琼脂法分离可裂解鲍曼不动杆菌的噬菌体,通过负染法电镜观察噬菌体的大小和形态,将噬菌体和宿主菌以不同比例混合,测定噬菌体的最佳感染复数并观察一步生长曲线,提取噬菌体核酸进行酶切电泳分析,通过SDS-PAGE分析噬菌体的结构蛋白和非结构蛋白。成功分离3株可裂解鲍曼不动杆菌的噬菌体(分别命名为ФAb-1、ФAb-2和ФAb-3),电镜显示噬菌体的头部呈二十面体,直径约50nm,有一短尾。噬菌体ФAb-1的最佳感染复数为10-2,一步生长曲线表明噬菌体在裂解宿主菌时,潜伏期为20 min,爆发期为30 min,裂解量为190 PFU/cell。限制性酶切电泳显示噬菌体ФAb-1的基因组大小约40 kb左右,为双股环状DNA。SDS-PAGE的噬菌体蛋白电泳包括7种蛋白,分子量在29～116 ku。噬菌体ФAb-1、ФAb-2和ФAb-3对鲍曼不动杆菌具有很强的裂解毒性。根据其形态、结构和噬菌体分类法,鲍曼不动杆菌噬菌体属于有尾病毒目,足尾病毒科。
- 余静丹史红艳王丹徐花孙延波
- 关键词：鲍曼不动杆菌噬菌体
- 噬菌体对阴沟肠杆菌所致皮下脓肿的抗感染研究被引量：5
- 2014年
- 目的观察噬菌体对阴沟肠杆菌所致皮下脓肿的抗感染作用,为噬菌体疗法应用于细菌性感染提供依据。方法家兔的侧背部皮下注射阴沟肠杆菌(4×107CFU/mL)造成皮下脓肿,且脓肿的持续时间应在4 d以上。在脓肿的部位注射噬菌体(1×109PFU/mL)后,测量脓肿面积的大小、计数脓肿内细菌和噬菌体的数量。结果噬菌体治疗组动物的脓肿面积和脓肿部位的细菌数量明显低于对照组(P<0.05),而噬菌体的数量虽高于皮下单独注射噬菌体的数量,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论噬菌体对阴沟肠杆菌所致皮下脓肿的治疗是有效的,提示噬菌体疗法对阴沟肠杆菌的感染具有潜在的应用价值。
- 王丹史红艳李菁华余静丹黄金凤孙延波
- 关键词：阴沟肠杆菌噬菌体脓肿
