刘伟
- 作品数:3 被引量:5H指数:1
- 供职机构:西北农林科技大学动物医学院更多>>
- 发文基金:陕西省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生石油与天然气工程更多>>
- 利用RNA干扰技术筛选调控果蝇中肠干细胞的基因
- 果蝇的中肠干细胞系统(ISC)是一种重要的成体干细胞研究模型。为了寻找参与调控果蝇中肠干细胞的基因,我们开展了一项大规模的体内遗传筛选实验。使用RNA干扰(RNAi)技术,选择性地在果蝇中肠干细胞中抑制靶基因的表达,通过...
- 马延森陈志靳亚平刘伟
- 关键词:RNAI
- 猪细小病毒、伪狂犬病病毒和猪圆环病毒2型多重PCR检测方法的建立及应用被引量:5
- 2011年
- 根据猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV-2)的基因序列,分别选取各自的保守区段设计引物,通过反应条件的优化,建立了检测PPV、PRV和PCV-2的多重PCR方法。用建立的方法对采自陕西省部分猪场的286份病料及血样进行检测,从对临床健康猪全血样品中PPV、PRV和PCV-2的检测结果看,PCV-2在正常猪群中有一定比例的存在,同时在个别猪场也存在PRV和PCV-2双重感染的现象;从临床患病猪病料中检测发现,PRV和PCV-2混合感染较严重,并有PPV+PRV+PCV-2三重感染发生;多重PCR检测结果与单项PCR检测结果的符合率达99%以上,说明建立的多重PCR检测方法可用于临床样品的检测,为疾病诊断提供参考。
- 孙黎郭抗抗王静刘伟曹伟伟吕其壮张彦明
- 关键词:猪细小病毒伪狂犬病病毒猪圆环病毒2型多重PCR
- 猪细胞周期蛋白A基因的克隆及其功能研究
- 2010年
- 本研究旨在克隆猪细胞周期蛋白A基因(CyclinA),并在猪脐静脉血管内皮细胞(SUVEC)中表达,以验证其功能。以人的CyclinA基因为信息探针,经电子克隆得到猪CyclinA基因,通过RT-PCR和DNA测序验证电子克隆结果并对其作生物信息学分析,用RT-PCR、Westernblot研究它在SUVEC中的表达情况。应用激光共聚焦显微镜分析它在细胞中的亚细胞定位,并通过流式细胞仪分析细胞周期以及用MTS法测定细胞的增殖能力。结果如下:核酸测序证明RT-PCR产物同电子克隆结果相符。该cDNA包含1299bp的完整开放阅读框(ORF),共编码432个氨基酸,经NCBIBLAST分析,该基因定位于猪的8号染色体上。Westernblot结果显示CyclinA基因编码蛋白的相对分子质量大小约为40ku,亚细胞定位研究表明该蛋白定位于细胞核中。经流式细胞仪分析表明稳定表达该基因的细胞,其G1期的细胞数量比对照组细胞增加了15%~20%,而S期的细胞数量比对照组细胞减少了约18%;MTS法检测显示细胞株SUVEC-CycAGFP的增殖活性明显高于对照组细胞。作者成功克隆到新基因猪源细胞周期蛋白A,并验证了其生物学功能,为今后开展病毒感染对猪细胞周期蛋白A影响的研究奠定了基础。
- 范丽唐青海张彦明刘伟仝刚
- 关键词:克隆真核表达细胞周期MTS