李强
- 作品数：11 被引量：3H指数：1
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 黑皮质素4型受体在绵羊下丘脑区域的定位
- 2019年
- 黑皮质素4型受体(melanocortin 4 receptor,MC4R)作为下丘脑参与能量调控过程中的关键性受体,在动物能量代谢调节中被广泛关注。目前,关于该受体在绵羊下丘脑中分布区域的相关报道较少。针对试验过程中MC4R免疫荧光结果不稳定,分布区域不明显的特点,本研究在改进现有MC4R免疫荧光试验方法基础上,对MC4R在绵羊下丘脑的分布区域进行了观察。结果显示,分别经过4%多聚甲醛长时间固定(6 d),Triton X-100(pH≈8.68)长时间通透(2 d),以及3%过氧化氢和0.2 mol/L甘氨酸+0.3%SDS+20%甲醇的预处理后,可以获得稳定且饱满的MC4R免疫荧光结果。MC4R主要分布在绵羊下丘脑的室旁核(arcuate nucleus,ARC)区域,但在弓状核区域并无类似分布。
- 郭凤英潘登范奎奎李强杨文雅钱英红杜晨光
- 关键词：免疫荧光绵羊下丘脑
- SHU 9119对小鼠发情周期中Ghrelin表达的影响
- 2017年
- 为了研究SHU9119与ghrelin之间的潜在的生理学关系,本试验选择4周龄的C57BL/6小鼠下丘脑和卵巢组织为研究材料,对小鼠发情周期中SHU9119介导的ghrelin mRNA在下丘脑和卵巢部位表达水平进行研究。结果表明,正常生理条件下小鼠间情期下丘脑保持较高水平的ghrelin mRNA表达,而在卵巢内其表达水平相对较低;腹腔注射SHU9119(50μg/kg体重)可极显著抑制下丘脑中ghrelin mRNA的表达(P<0.01),同时显著促进小鼠间情期卵巢Ghrelin mRNA的表达(P<0.05)。然而,SHU9119并未引起小鼠发情前期、发情期和发情后期ghrelin mRNA表达量的显著差异。上述结果表明,SHU9119可能通过MC4R系统调节间情期小鼠ghrelin的变化,而不参与其他性周期ghrelin mRNA表达量的相关调控。
- 王彩云潘登范奎奎张召议李婷李强杜晨光
- 关键词：小鼠下丘脑卵巢GHRELIN
- Ghrelin通过弓状核区域α型雌二醇受体神经元介导雌性小鼠采食调控被引量：2
- 2017年
- Ghrelin作为一种具有特殊功能的能量调控因子,在能量代谢平衡以及生殖调控研究中被广泛关注,然而其在小鼠性周期变化过程中发挥调控的机制尚不明确。本研究通过腹腔注射ghrelin研究其对小鼠性周期不同阶段采食量及血清中雌二醇浓度的影响,并运用免疫荧光技术鉴定了ghrelin与弓状核(arcuate nucleus,ARC)区域分布的α型雌二醇受体(estrogen receptorα,ERα)神经元之间的共表达情况。结果表明,ghrelin(50μg·kg-1)注射后的2h内可显著促进小鼠发情前期采食量(P<0.05);ghrelin可极显著抑制雌激素的分泌(P<0.01),其他阶段未见显著性差异。同时,ghrelin显著增强小鼠各个性周期中ARC区域的神经元活动(P<0.05或P<0.01),均能直接作用于ARC区域ERα神经元,且在发情前期共表达率最高。因此,我们推论小鼠发情前期,腹腔注射ghrelin可直接作用于下丘脑区域的ERα神经元调控血清中雌二醇浓度,并最终介导雌性小鼠采食。
- 沈向华潘登范奎奎李强李婷杜晨光
- 关键词：性周期
- 小鼠脑内细胞色素P450 17A1神经元定位
- 2019年
- 细胞色素P45017A1(CYP17A1)是类固醇激素合成过程中的重要调节因子之一,在不同物种的睾丸、卵巢、肝脏、心脏等均有分布,但在小鼠脑内神经元定位未见系统报道。本试验采用免疫荧光检测CYP17A1神经元在小鼠脑内的分布。结果显示,CYP17A1在小鼠脑内部呈现广泛性表达。阳性神经元集中分布于大脑皮质、丘脑、下丘脑以及脑干等核团中。表明CYP17A1作为类固醇合成调节因子,在小鼠脑内广泛表达,该结果为进一步研究其在脑组织内功能提供形态学依据,并提示通过神经系统参与调节相关类固醇激素合成的积极作用。
- 李强科尔沁满来李鹏辉张雪范奎奎海日罕杜晨光
- 关键词：小鼠免疫荧光技术
- 胰淀素调控生理机能的研究进展
- 2018年
- 胰淀素(Amylin)在机体能量代谢平衡过程中具有重要作用,通过兴奋机体饱食中枢来抑制动物摄食,Amylin的受体广泛分布于第四脑室底部最后区(AP),当受体被激活后,神经信号会通过孤束核(NTS)传至前脑,同时还可通过外侧旁核(LPBN)传至下丘脑外侧区(LHA)及下丘脑其他神经核团,Amylin信号传递必须经过NTS和LPBN,此外,Amylin也是机体发生肥胖的重要信号,肥胖动物机体Amylin的血浆浓度较正常动物显著升高,脑室注射Amylin能引起体重明显降低,而注射Amylin受体的抑制剂则使体重明显上升继而引发肥胖。Amylin是一个潜在治疗肥胖的作用靶点,本文就Amylin在调节动物摄食和能量代谢中的作用进行综述。
- 郭志凯范奎奎潘登李强钱英红杜晨光
- 关键词：AMYLIN能量代谢下丘脑
- 绵羊下丘脑催产素神经元分布的研究
- 2017年
- 催产素(oxytocin,OXT)在动物分娩、维持哺乳方面具有重要作用,近年来发现OXT对能量代谢亦具有积极作用。尽管OXT在小鼠、大鼠、猕猴等动物脑部有广泛的分布表达,但OXT在绵羊下丘脑的表达部位和神经投射通路尚无报道,成为限制研究其生物学功能的瓶颈之一。本试验以绵羊下丘脑为主要研究材料,运用免疫荧光技术明确了OXT神经元在下丘脑的表达分布。结果显示,OXT神经元集中分布在绵羊下丘脑室旁核(paraventricular nucleus,PVN)区域,在视上核(supraoptic nucleus,SON)有零星表达,且均具有较为明晰神经元胞体及纤维结构,这种分布与小鼠的表达部位呈现高度一致。上述结果为进一步研究OXT在绵羊能量代谢方面发挥的生物学作用奠定了免疫学基础。
- 郭志凯范奎奎潘登李婷李强钱英红杜晨光
- 关键词：催产素绵羊下丘脑室旁核神经元
- 胰淀素对小鼠脑内类固醇合成急性调节蛋白表达的影响
- 2019年
- 本试验旨在定位类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)在小鼠脑内的分布,并对胰淀素(amylin)是否影响小鼠脑内StAR的表达进行初步研究。购买C57BL/6品系小鼠,标准环境下饲养一个月后,将获得的子一代饲养7周,选取9只体重及健康状况相近的雄性小鼠为实验动物,随机分为3组:生理盐水对照组、amylin注射组和amylin+AC187(amylin特异性抑制剂)注射组,按体重(100μg·kg^-1)连续注射3 h后,剖取脑组织,采用免疫荧光染色技术研究StAR在脑内的分布规律,同时采用Western blot技术比较不同组中StAR的表达变化规律。试验结果表明,StAR免疫阳性信号主要表达在不定带(ZI),零星分布于蓝斑核(LC)、下丘脑腹内侧核(VMH)、中缝背核(DR)。与对照组相比,腹腔注射amylin (100μg·kg-1)极显著降低ZI内StAR表达量(P<0.01);联合抑制剂处理组amylin+AC187能极显著抑制amylin对ZI内StAR表达的影响(P<0.01)。结果表明,腹腔注射amylin可显著抑制ZI内StAR的表达,由于StAR是调节类固醇激素的限速酶,推测amylin除可调节进食及能量代谢外,还可通过调节StAR的表达影响中枢神经系统内类固醇激素的合成速率。
- 曹晓娟李强范奎奎潘登刘昊东王昆海日汗杜晨光
- 关键词：胰淀素蛋白表达
- Western blot鉴定背肩胛棕色脂肪黑皮质素4型受体的研究被引量：1
- 2018年
- 旨在探究Western blot检测低丰度蛋白表达及试验过程对检测结果的影响。本试验以6~8周龄C57/BL6小鼠背肩甲棕色脂肪组织(Brown adipose tissue,BAT)为试验材料,以低丰度表达的黑皮质素4型受体(Melanocortin-4-receptor,MC4R)为检测蛋白,不同蛋白处理方法及电转膜液的组分、pH为试验对照条件,探究蛋白提取方法、电转液的组分与pH对转膜效率的影响。结果显示,转膜初始电压及功率与转膜液中十二烷基磺酸钠(SDS)含量及pH极显著相关,恒流转膜时,转膜液中SDS含量与转膜电压及功率呈反比,pH为8.0时的转膜电压及功率极显著高于pH 7.6(P<0.01)和8.6的转膜电压及功率(P<0.001);MC4R及相关蛋白在醇类物混合裂解液(20%Methanol+1%Triton+1%SDS+RIPA)的蛋白处理组的表达显著优于单独RIPA的蛋白处理组(P<0.05),极显著优于Trizol的蛋白处理组(P<0.01)。综上,于MC4R蛋白而言,在裂解液的基础上添加增强剂(Triton和SDS),可促进蛋白提取的效率,提高抗体检测的灵敏性。上述结果有助于相关操作人员对主要细节的认识,提高试验的灵敏及重复性。
- 范奎奎李强杨文雅潘登李海军杜晨光
- 关键词：蛋白印迹
- 小鼠脑干3β羟基类固醇脱氢酶1免疫阳性神经元信号检测方法的优化
- 2019年
- 类固醇激素合成关键调节酶-3β羟基类固醇脱氢酶1(3β-HSD1)是类固醇激素合成途径中的关键调节酶,其活性的改变可影响雄激素(睾酮)的分泌水平。检测3β-HSD1在脑组织的分布对研究脑干调节类固醇激素的分泌具有重要意义。但常规检测手段难以检测出3β-HSD1阳性信号的分布。为优化检测小鼠3β-HSD1在脑神经元中分布的方法,本研究分别采用不同固定液(4%多聚甲醛、20%甲醇+0.2%丙酮、4%多聚甲醛+10 mmol/L柠檬酸钠)预先灌注小鼠,取其脑组织制作冰冻切片,经优化的封闭前预处理后,经免疫组化方法检测3β-HSD1在小鼠脑组织中的分布以及不同固定液对其在小鼠脑干中的阳性信号检测结果的影响。同时采用western blot验证该免疫组化试验结果。结果显示,3β-HSD1主要在小鼠后脑脑干内分泌类固醇激素的主要核团,即在脑干中的缝苍白核(RPa)、巨细胞网状核(GRN)及臂旁核(PB)中表达。4%多聚甲醛固定组小鼠在上述核团内均未观察到3β-HSD1阳性荧光信号;20%甲醇+0.2%丙酮固定组小鼠在上述核团内虽可见3β-HSD1阳性信号分布,但荧光信号较模糊;4%多聚甲醛+10 mmol/L柠檬酸铵固定组小鼠在其脑干上述核团内获得染色结果清晰,神经元形态饱满的3β-HSD1阳性荧光信号。Western blot结果也证实了3β-HSD1蛋白在小鼠脑干内上述3个神经核团内的特异表达。综上所述,采用免疫组化试验检测3β-HSD1在小鼠脑内的定位时,经4%多聚甲醛+10 mmol/L柠檬酸钠固定液组的小鼠脑组织切片可在小鼠脑干RPa、GRN及PB核团内获得饱满的3β-HSD1阳性荧光信号。本实验方法的优化将为进一步研究脑内3β-HSD1影响类固醇激素合成过程的研究提供技术手段。
- 曹晓娟李强范奎奎潘登刘昊东王昆海日汗杜晨光
- 关键词：免疫荧光脑干
- Ghrelin和SHU9119通过促进CART神经元调节小鼠采食
- 2018年
- 为研究Ghrelin和SHU9119如何作用于小鼠下丘脑可卡因和苯丙胺转录调节因子（CART）神经元参与小鼠采食调控,本试验以免疫荧光技术为主,利用代谢笼和冰冻切片的方式获取试验材料,综合小鼠采食量测定,CART神经元表达数目的统计学分析,及CART神经元、刺鼠相关蛋白（AgRP）神经元同黑皮质素4型受体（MC4R）神经元间共定位信息,对Ghrelin和SHU9119通过不同方式介导CART神经元以参与小鼠采食调控这一作用机理进行初步阐述。结果显示：健康4周龄C57BL/6雄性小鼠,腹腔注射Ghrelin（50μg/kg,n=3）后,其下丘脑背内侧核（DMH）区域CART神经元表达数目显著上升（P〈0.05）;而SHU9119（50μg/kg,n=5）则显著促进弓状核（ARC）区域的CART神经元的表达（P〈0.01）,2种药物促进CART神经元表达的部位并不相同。同时,2种药物的单独注射均可对小鼠采食活动产生一定的促进作用（Ghrelin组n=7;SHU9119组n=7）。有趣的是,CART神经元在DMH区域同AgRP神经元之间具有突触联系,而CART神经元与表达MC4R的神经元之间的共表达关系则发生在ARC区域。结合已有的研究证据,我们推测Ghrelin和SHU9119可能通过不同方式参与对CART神经元表达的调节,并最终影响小鼠采食活动。期望通过本研究为今后进一步探明外周信号分子如何参与促厌食神经元对机体能量代谢调控提供新的思路和证据。
- 郭志凯范奎奎李婷李强杜晨光
- 关键词：GHRELIN
