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藏猪与雅南猪IGF-I基因的克隆与序列分析被引量：4: 2015年; 为研究IGF-I基因对藏猪、雅南猪生长发育的影响,以Gen Bank中猪IGF-I基因序列(登录号:DQ121132.1)设计引物,提取藏猪、雅南猪肝脏组织总RNA,应用RT-PCR技术克隆出IGF-I基因,分别将藏猪、雅南猪IGF-I基因克隆到PMD19-T载体上,构建重组质粒p MD19-T-IGF-I,经PCR鉴定、测序分析得该基因大小为612 bp,包含一个完整的ORF,该ORF共有462个碱基,编码153个氨基酸;所测得的藏猪和雅南猪基因序列与Muller等报道的猪IGF-I基因编码序列高度同源,序列比对发现,藏猪的同源性为100%,雅南猪的为99.61%;藏猪IGF-I与雅南猪IGF-I基因序列的同源性为99.61%;雅南猪在258 bp处发生A→G突变,但其编码的氨基酸未发生改变。; 李伟张飞燕宋婷婷谷笑笑刘红露潘大敏韩书饼潘康成; 关键词：藏猪 IGF-I基因

藏猪与雅南猪的IGF-I基因的克隆与序列分析: 从藏猪和雅南猪肝脏克隆出胰岛素样生长因子(IGF-I)基因,并对其基因序列进行分析。以GenBank中猪IGF-I基因序列设计引物,应用RT-PCR技术从藏猪和雅南猪肝脏克隆到IGF-1基因,分别将藏猪、雅南猪IGF-I...; 李伟张飞燕宋婷婷谷笑笑刘红露潘大敏韩书饼潘康成; 关键词：藏猪 IGF-1基因克隆; 文献传递

产玫瑰红色素粘质沙雷氏菌的分离鉴定及抑菌活性被引量：9: 2016年; 旨在分离鉴定产玫瑰红色素菌株,及其分离菌株和色素对病原菌的生物拮抗作用。经形态观察、生理生化试验和16S r RNA序列分析对其进行鉴定,通过控制变量法确定最佳产色素的温度及光照条件,破裂菌体提取色素分析此菌株产色素的量和红色素的性质,采用滤纸片法研究对病原菌的拮抗作用。结果表明：（1）分离细菌Dse-01菌株最终鉴定为粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）;（2）该菌在25-35℃条件下培养色素形成较早且颜色较深,30℃温度下产色素最佳,光照对其色素形成时间没有明显影响;（3）30℃150 r·min^-1培养24 h,提取获得色素粗品确定为灵菌红素,产量达（567.90±7.77）mg·L^-1;（4）分离菌株的全菌液、上清液、菌体和提取色素对病原性大肠杆菌、沙门氏菌均无拮抗作用,而全菌液、菌体和提取色素对金黄色葡萄球菌具有明显的抑制作用。; 董婷景波李伟黄晓雅钱俏君杨慧潘康成; 关键词：粘质沙雷氏菌灵菌红素

藏猪IGF-1成熟肽基因的克隆及原核表达被引量：1: 2017年; 旨在克隆藏猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)的成熟肽基因,并进行原核表达的研究。提取藏猪肝脏组织RNA,通过RT-PCR扩增出藏猪IGF-1全长基因,构建重组质粒p MD19-T-IGF-1,以p MD19-T-IGF-1质粒为模板,克隆IGF-1成熟肽序列并构建成熟肽p ET-32α-IGF-1表达质粒,转入大肠杆菌BL21(DE3),对IPTG诱导剂浓度和诱导时间进行优化,Ni-NTA琼脂纯化融合蛋白后采用Western Blot对其鉴定。结果显示,IGF-1成熟肽基因(315 bp),成功构建了成熟肽p ET-32α-IGF-1原核表达质粒;重组大肠杆菌BL21-IGF-1以包涵体形式表达出分子量约31 k Da融合蛋白,最优IPTG浓度为0.5 mmol/L,最佳IPTG诱导时间为10 h;纯化获得了高纯度的融合蛋白,经鉴定IPTG诱导表达和纯化的蛋白为IGF-1融合蛋白。结果表明,成功构建了表达质粒p ET32α-IGF-1及获得重组大肠杆菌BL21-IGF-1,表达了藏猪IGF-1成熟肽融合蛋白及该蛋白具有抗原抗体反应活性。; 张飞燕王振华潘康成唐慧琴谷笑笑李伟; 关键词：藏猪胰岛素样生长因子1 原核表达蛋白纯化蛋白质印迹法

藏猪与雅南猪的IGF-I基因的克隆与序列分析: 为研究IGF-I基因对藏猪、雅南猪生长发育的影响,以GenBank中猪IGF-I基因序列(登录号:DQ121132)设计引物,提取藏猪、雅南猪肝脏组织总RNA,应用RT-PCR技术从藏猪和雅南猪肝脏克隆出IGF-I基因,...; 李伟张飞燕宋婷婷谷笑笑刘红露潘大敏韩书饼潘康成; 关键词：藏猪 IGF-I基因; 文献传递

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李伟