王强
- 作品数:7 被引量:16H指数:3
- 供职机构:浙江大学宁波理工学院生物与化学工程学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- DHAP胁迫对天山云杉种子萌发过程抗氧化酶活性影响的研究被引量:3
- 2015年
- 通过对3,4-二羟基苯乙酮(DHAP)诱导天山云杉(Picea schrenkiana Fisch.et Mey.)种子萌发及幼苗生长过程抗氧化酶活性变化的分析阐明自毒物质发生作用的生理机制。选择3个浓度梯度DHAP溶液处理萌发中的天山云杉种子及生长的幼苗,以发芽率和发芽势为种子表观萌发参数,以胚芽长、胚根长、鲜重为幼苗生长表观参数,荧光素二乙酸酯-碘化丙啶(FDA-PI)荧光双染色法测定胚根发育状况,分光光度法测定不同时间阶段采集样品中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性变化。荧光染色结果显示,1.0mmol/L DHAP处理加速种子萌发,根细胞组织营养胁迫过程提前出现,3.0和5.0mmol/L处理组发芽第3天种子根尖未突破种皮,比对照发芽延迟,5.0mmol/L处理组发芽第12天种子根弯曲程度提高出现畸变;酶活性分析结果显示,与对照相比,1.0mmol/L处理组SOD活性第2天、第10天峰值增大,3.0和5.0mmol/L处理组主峰出现时间提前且峰值减小;DHAP处理增强了CAT活性在第7天、第10天双峰峰值;1.0 mmol/L处理组POD活性第7天主峰峰值增大,3.0和5.0mmol/L处理组主峰出现时间延迟且峰值减小;1.0mmol/L处理组第4天、第8天APX活性主峰峰值增大,3.0mmol/L处理组主峰峰值减小,5.0mmol/L处理组主峰出现时间延迟且峰值减小;1.0mmol/L处理组第5天、第8天GR活性峰值增大,3.0和5.0mmol/L处理组峰值减小,第二个峰出现时间提前;1.0mmol/L处理组GPX活性第2天、第5天峰值增大第8天、第11天峰值减小,3.0 mmol/L处理组峰值减小且前两个峰时间延迟,5.0mmol/L处理组第6天、第9天出现强度减小双峰。DHAP处理诱导的种子萌发过程中抗氧化酶活性变化可能是延迟和抑制天山云杉种子萌发的原因之一。
- 张玉竹刘润潘存德王强
- 关键词:天山云杉抗氧化酶种子萌发
- 共振光散射法测定南方红豆杉叶多糖含量被引量:3
- 2015年
- 当氢氧化钠(NaOH)和氯化十六烷基吡啶(CPC)共存时加入南方红豆杉叶多糖(polysaccharides in Tax-us chinensis var.mairei leaves,PTL)在460.0nm 处可以使体系产生较强的共振光散射(RLS).2.4-12.0μg/mL范围内,多糖浓度与共振光散射强度成正比,据此建立了南方红豆杉叶多糖测定的新方法.用此法与苯酚G硫酸法和蒽酮G硫酸法测定同一份南方红豆杉叶多糖含量,结果分别为22.79、23.59、25.18mg/g,共振光散射法测定结果更准确.还分析了2013年1月1日至2013年12月15日24份南方红豆杉叶样本多糖含量变化,发现2013年9月1日样本多糖含量最高(28.92mg/g,RLS法).共振光散射法对南方红豆杉多糖的检测限为0.041μg/mL,方法灵敏度高,可以用于南方红豆杉多糖含量的快速测定.
- 成芳刘润马晓艳崔文霞潘存德王强
- 关键词:南方红豆杉共振光散射氯化十六烷基吡啶
- 天山云杉ABI5基因的克隆与原核表达活性测定
- 2024年
- ABI5又名植物脱落酸不敏感蛋白5(Abscisic acid-insensitive 5),作为ABA信号通路中重要的转录因子,协调参与了种子发育和萌发、植物生长、逆境胁迫等方面的调控。目前的研究多是以拟南芥为对象,而在天山云杉等木本植物上报道极少。本研究以天山云杉的cDNA为模板进行了PCR扩增,得到了天山云杉ABI5序列,经测序发现其全长为1071 bp,共编码了352个氨基酸。将ABI5基因连接pET-24a原核表达载体,得到了重组质粒pET-24a-ABI5。对IPTG浓度、诱导时间、培养基类型和孵育温度进行了优化,得到了最适培养条件为采用LB培养基,IPTG终浓度为0.2 mmol/L,20℃下诱导8 h。通过SDS-PAGE检测纯化产物发现大部分蛋白以包涵体形式存在,对部分包涵体蛋白进行了复性并利用孔雀石绿显色反应进行了活性的验证。
- 范晓聪王佳琰阮晓奚雨欣杨丽吴庆飞王强
- 关键词:天山云杉分子克隆原核表达包涵体复性
- 三叶青黄酮的提取工艺优化及抗氧化活性分析被引量:3
- 2023年
- 目的响应面法优化三叶青块根黄酮的提取工艺,测定9种单体物质的含量,评价黄酮的体外抗氧化活性。方法根据中心组合设计,对提取温度、提取时间、甲醇浓度、液料比4个因素进行考察,以三叶青黄酮得率为指标优化提取工艺。采用超高效液相色谱分析9种黄酮单体的含量。以DPPH自由基和羟自由基清除率为指标评价总黄酮的体外抗氧化能力。结果确定的优化工艺条件为提取温度78℃,提取时间92 min,甲醇浓度78%,液料比15∶1,总黄酮得率为1.725%,通过中试验证,总黄酮得率为1.709%。异荭草苷、荭草苷、芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、紫云英苷、槲皮素、芹菜素和山柰酚含量依次为119.6、25.3、26.4、28.8、41.6、30.4、150.8、18.1、20.6μg·g^(-1)。总黄酮对DPPH自由基和羟自由基的清除率高达92.56%和72.96%,IC50值分别为0.061 mg·mL^(-1)与0.115 mg·mL^(-1)。结论确定的提取工艺稳定、高效、经济,可用于三叶青黄酮的提取,所得提取物具强抗氧化活性。
- 李兆慧师砚首喻晓雁陈云王强阮洪生
- 关键词:响应面分析法黄酮抗氧化活性
- 山核桃外果皮化感作用验证与主要化感物质的初步解析被引量:1
- 2016年
- 为了验证山核桃(Carya cathayensis Sarg.)外果皮化感活性及分离、纯化、结构解析主要化感活性物质。以种子发芽率和发芽势为种子萌发参数,胚根、胚芽长度和鲜重变化为幼苗生长参数,通过研究山核桃外果皮水提取物对双子叶植物莴苣、萝卜、黄瓜和单子叶植物洋葱、水稻、小麦种子萌发和幼苗生长的影响;比较了山核桃外果皮水提取物及经X-5大孔树脂分离获得的11个洗脱组分对莴苣种子萌发与幼苗生长影响的强弱;结合超高效液相色谱、核磁共振、气相-质谱联用检测与分析方法。研究结果表明,山核桃外果皮水提取物存在化感活性。11个洗脱组分中6∶4、5∶5、4∶6、3∶7存在较强化感效应,其中4∶6组分化感效应最强。从化感活性最强的4∶6洗脱组分中分离纯化与结构解析出了主要成分:4,8-二羟基-1-四氢萘酮。
- 张金云杨丽马晓艳阮晓王强潘存德
- 关键词:山核桃化感作用生物测定
- 4,8-DHT林地除草活性研究被引量:1
- 2020年
- 4,8-二羟基-1-四氢萘酮(4,8-DHT)为山核桃Carya cathayensis外果皮化感物质,室内试验证实4,8-DHT具有除草活性,但在林地中尚未得到验证。为明确4,8-DHT对林地杂草的防除效果,依据《农药田间药效试验准则(一)中除草剂防除林地杂草》(GB/T 17980.48-2000)设置试验处理,对比分析不同浓度4,8-DHT对杂草株数、覆盖率及株防效的影响。结果表明,36 mmol·L-14,8-DHT药后8 d对东京樱花Cerasus yedoensis林地内的陌上菜Lindernia procumbens,拟鼠麴草Pseudognaphalium affine,车前Plantago asiatica,碎米荠Cardamine hirsuta,匙叶合冠鼠麴草Gnaphaliumpens ylvanicum和紫薇Lagerstroemia indica林地内的耳草Hedyotis auricularia的株防效均达100%;不同施药方法对杂草的防除效果分析表明,4,8-DHT对杂草种子萌发期的抑制作用强于幼苗期;对林地间杂草防除效果比较发现,36 mmol·L-14,8-DHT对东京樱花和紫薇林地药后20 d的杂草防除效果存在差异,这可能与林地环境因素和生物因素等有关。
- 胡琪瑶范晓聪杨丽阮晓章建红王强郑炳松
- 关键词:生物除草剂林地防除效果
- 3,4-二羟基苯乙酮胁迫对天山云杉种子萌发过程中内源植物激素含量变化的影响被引量:5
- 2013年
- 3,4-二羟基苯乙酮(DHAP)是天山云杉(Picea schrenkiana ssp.tianschanica)叶和凋落物中存在的主要自毒物质,是导致天山云杉林天然更新障碍的原因之一。为了解释自毒物质发生作用的生理机制,该文设计多个浓度梯度的DHAP溶液处理天山云杉种子,以发芽率和发芽势为种子萌发参数,运用反相超高效液相色谱(UPLC)分析技术,检测了种子萌发过程中内源植物激素玉米素(ZT)、赤霉素(GA3)、吲哚乙酸(IAA)和脱落酸(ABA)含量水平的变化。研究结果表明:DHAP处理对天山云杉种子萌发影响具有浓度效应,表现为5.0 mmol·L–1>0.1 mmol·L–1>1.0 mmol·L–1>对照,即5.0 mmol·L–1DHAP处理组对种子萌发的抑制作用最强、0.1 mmol·L–1DHAP处理组次之、1.0 mmol·L–1DHAP处理组最弱;DHAP处理组的种子内源ZT、GA3浓度水平降低,ABA含量升高,GA3浓度峰值出现时间延迟,IAA浓度在高浓度(5.0 mmol·L–1DHAP)处理组短时间内(3–6天)过量积累,1.0和5.0 mmol·L–1DHAP处理组的种子内源ABA浓度峰值出现时间延迟;DHAP处理种子萌发1–6天时,ZT/(GA3+IAA)比值降低,IAA/ZT、ABA/ZT比值增大;ABA/(ZT+GA3+IAA)比值在0.1 mmol·L–1DHAP处理组增大,在5.0mmol·L–1DHAP处理组降低。DHAP处理引发种子内源激素含量水平及激素含量间比值变化,可能是抑制、延迟天山云杉种子萌发的主要原因。
- 陈志颖阮晓张玉竹潘存德王强
- 关键词:内源植物激素天山云杉种子萌发