刘勇
- 作品数：11 被引量：8H指数：2
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- 相关领域：医药卫生理学生物学更多>>
- 含有金纳米粒子的筛分介质对不同长度DNA片段的毛细管电泳分离被引量：1
- 2009年
- 探讨了含有金纳米粒子(GNPs)的筛分介质在毛细管电泳(CE)中对不同长度DNA片段的分离。以聚环氧乙烷(PEO)-金纳米粒子(GNPs)-TBE为CE筛分介质,用涂层的毛细管柱(37 cm×75μm,有效长度27 cm)分离DNAMarker D和1 kbp DNALadder Marker标准DNA片段,考察了CE过程中各参数(如筛分介质质量浓度、分离电压、温度和筛分介质pH值)对不同长度DNA片段分离的影响。对比了新型筛分介质与不含GNPs的PEO-TBE筛分介质的分离效果,并将新型筛分介质用于实际样品的检测。结果表明,在筛分介质中添加GNPs后能够改进CE的分离效果,且分离时间短。方法较适于分离较宽范围的DNA片段。
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- 关键词：毛细管电泳金纳米粒子DNA片段
- CE-SSCP和CE-RFLP检测肺癌突变基因的方法学研究
- p53基因是一个具有独特作用的抑癌基因，它不同于通常的抑癌基因一突变后具有癌基因作用，因而一直是癌症研究的热点。它是迄今为止发现的与人类肿瘤相关性最高的基因。在众多癌症中肺癌较为普遍，而癌症的发生多为基因突变引起，导致癌...
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- 关键词：肺癌毛细管电泳凝胶电泳
- 文献传递
- 影响毛细管电泳分离生物大分子的因素被引量：2
- 2009年
- 目前毛细管电泳在分离方面的应用越来越广泛,但重复性一直是制约其应用的主要问题。随着毛细管电泳技术的发展,影响毛细管电泳结果的因素也发生着变化。本文对影响毛细管电泳分离生物大分子的因素进行综述,希望对使用毛细管电泳的使用者者有所帮助。
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- 关键词：毛细管电泳影响因素
- 无胶筛分毛细管电泳分离蛋白质的实验研究
- 随着基因组计划的完成,功能基因组即蛋白质组计划逐渐拉开帷幕。对于蛋白质的研究首先在于蛋白质的分离,而分离后的检测更是重中之重。无论是非变性还是变性蛋白质,传统聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的检测方法已经比较成熟,但其检测...
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- 文献传递
- 毛细管电泳检测肺癌及癌旁正常组织蛋白质混合物差异被引量：2
- 2011年
- 以建立的毛细管电泳(CE)-激光诱导荧光(LIF)检测蛋白质的方法对提取肺癌及癌旁正常组织蛋白质混合物(变性/活性)差异进行检测.采用异硫氰酸荧光素(FITC)为衍生剂,电泳缓冲液为1×TBE(TBE为Tris-硼酸-EDTA,变性电泳pH 10.0,活性电泳为pH 8.3且含有2 mg/L考马斯亮蓝),分离电压15 kV,柱温15℃,电动进样(10 kV×10 s),激发波长/发射波长=488/520 nm检测时,肺癌及癌旁正常组织蛋白质混合物样品得到较好分离且有明显差异.与目前常用蛋白分析方法:变性SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)以及活性蓝绿温和胶电泳(BN-PAGE)进行比较.BN-PAGE结果显示肺癌组织相比正常组织有较明显蛋白种类差异;SDS-PAGE结果表明一些蛋白质表达量差异也是肺癌及癌旁正常组织的显著差别,且主要集中在20～116 kDa.CE-LIF检测结果与PAGE结果大致相同,且CE-LIF检测蛋白质的灵敏度高于PAGE,能更准确反映肺癌及癌旁正常组织的蛋白质差异.结论是CE-LIF可用于蛋白质差异检测,时间短,效果较好,对活性蛋白质进行分析体现了其优点:可提供较强的动力——电压,及强动力下良好的温度稳定性.
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- 关键词：蛋白质组学毛细管电泳肺癌聚丙烯酰胺凝胶电泳
- 毛细管电泳法检测肺癌p53基因第七外显子的突变被引量：2
- 2009年
- p53基因点突变在肺癌的发生过程中起重要作用,检测基因点突变的方法学研究将有助于临床准确诊断肺癌。本实验用PCR扩增包含249位密码子的肺癌及癌旁正常组织p53基因第七外显子,扩增样品分别经96℃变性和HaeⅢ酶切处理,以CE-SSCP、CE-RFLP、PAGE-SSCP和PAGE-RFLP对其突变情况进行检测,并从上样量、时间、检出限和检出率4个方面进行比较。PAGE凝胶浓度为15%;CE筛分介质PEO浓度3.0%,pH8.2,电压15kV,温度15℃,λex=488nm,λem=520nm荧光检测。检出率由高到低分别为:CE-SS-CP>PAGE-SSCP>CE-RFLP>PAGE-RFLP。CE-SSCP可作为大规模肺癌早期诊断的简便可靠的方法。
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- 关键词：基因突变毛细管电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳单链构象多态性限制性片段长度多态性
- 毛细管电泳法检测胃癌APC基因第十一外显子的杂合缺失
- APC基因杂合缺失在胃癌的早期发生过程中起重要作用，检测基因突变的方法学研究将有助于临床准确诊断胃癌。本实验采用PCR扩增胃癌及癌旁正常组织中APC基因易发生杂合缺失的第十一外显子的部分碱基序列，扩增样品分别经96℃变性...
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- 关键词：胃癌杂合缺失毛细管电泳单链构象多态性限制性片段长度多态性
- 文献传递
- 毛细管电泳法检测胃癌APC基因第十一外显子的杂合缺失
- APC基因杂合缺失在胃癌的早期发生过程中起重要作用,检测基因突变的方法学研究将有助于临床准确诊断胃癌。本实验采用PCR扩增胃癌及癌旁正常组织中APC基因易发生杂合缺失的第十一外显子的部分碱基序列,扩增样品分别经96℃变性...
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- 关键词：胃癌杂合缺失毛细管电泳单链构象多态性限制性片段长度多态性
- 文献传递
- 肺癌组织蛋白质混合物检测方法学研究被引量：4
- 2010年
- 采用无胶筛分毛细管电泳-激光诱导荧光法(NGS-CE-LIF)检测蛋白质,考察了分离条件对分离的影响,并对提取的肺癌组织蛋白质混合物进行分析,与毛细管电泳紫外检测(CE-UV)及常规蛋白质检测手段聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)进行比较。异硫氰酸酯(FITC)衍生蛋白质,筛分介质为0.05%(w/V)聚环氧乙烷(PEO,Mr=300000),以TBE缓冲液(pH10.0)为电极缓冲液,分离电压为15kV,柱温15℃,氩离子激光器(λex=488nm,λem=520nm)检测。在此条件下可对6.5～200kDa范围的蛋白质进行分离,分离效果较好,15min内完成分离,理论塔板数(N)均值为9.12×104/m,检出限为0.28mg/L。结果表明,本方法具有筛分介质浓度调节简便,分离效果好,时间短等优点,具有一定的实际应用价值;对提取肺癌组织蛋白质混合物进行检测,检测效率和效果优于CE-UV及PAGE。
- 刘勇刘勇王荣高岚贾正平辛晓婷谢华马骏
- 关键词：肺癌聚环氧乙烷异硫氰酸酯激光诱导荧光检测蛋白质
- 毛细管电泳分离筛分介质的选择
- 近年来，毛细管电泳(CE)己成为分离生物大分子的重要手段，在CE分离生物大分子过程中，筛分介质的性能直接影响其迁移特性、分离度、读出长度、重现性、注入时间、注入压力以及毛细管寿命等，因此筛分介质的选择尤为重要，它是样品成...
- 王荣刘勇贾正平高岚谢华张强郭志强
- 关键词：毛细管电泳分离筛
- 文献传递
