高峰
- 作品数：7 被引量：9H指数：2
- 供职机构：上海交通大学微纳米科学技术研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 聚酰胺树形分子递送Survivin反义寡核苷酸诱导结肠癌细胞凋亡的研究被引量：1
- 2009年
- 目的观察聚酰胺（PAMAM）树形分子高聚合物介导Survivin反义寡核苷酸（Sur—vivin—asODN）转染结直肠癌SW620细胞的可行性以及对结直肠癌SW620细胞凋亡的影响。方法制备PAMAM反义基因复合物和阳离子脂质体反义基因复合物，透射电镜观察复合物的形态，激光散射粒径分析仪测定粒径，zeta电位分析仪测定zeta电位，离心法和紫外分光分度仪测定复合物的的包封率、载药率和体外DNA释放速度。将上述两种基因转染复合物转染结直肠癌细胞，测定其转染效率；检测转染后细胞中Survivin蛋白的表达和细胞的凋亡率。结果PAMAM—Survivin—asODN复合物的粒径小于脂质体-Survivin—asODN复合物的粒径（P〈0．01），但zeta电位高于后者（P〈0．05）；基因载药率、包封率两组差异无统计学意义；PAMAM对DNA持续释放14d，但脂质体只持续5d。PAMAM-Survivin—as ODN转染结直肠癌细胞的效果强于脂质体-SurvivinasODN（P〈0．05）。转染后结直肠癌细胞Survivin蛋白的表达低于脂质体复合物（P〈0．05），细胞的凋亡率高于脂质体复合物（P〈0．05）。结论PAMAM能将Survivin—as ODN高效递送到结直肠癌SW620细胞，降低Survivin蛋白表达并诱导结直肠癌细胞凋亡。
- 厉周黄宗海姚航潘碧峰高峰崔大祥
- 关键词：反义寡核苷酸SURVIVIN
- 纳米高聚合物转导Survivin反义寡核苷酸对大肠癌的体内杀伤作用(英文)被引量：1
- 2009年
- 背景:近年来纳米载体已被视为突破基因转移瓶颈最有前途的技术之一。聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(polyamidoamine,PAMAM)是一种新型的纳米材料,体内外实验表明,PAMAM比其他阳离子载体的基因转染效率高、细胞毒性低。目的:探讨PAMAM介导Survivin反义寡核苷酸(Survivin antisense oligonucleotide,Survivin-asODN)对结直肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用。设计、时间及地点:肿瘤基因治疗体内实验,于2008-02/08在上海交通大学微纳米科学技术研究院生物纳米工程研究室及南方医科大学珠江医院中心实验室完成。材料:人结直肠癌细胞株SW620购自中科院上海细胞所,PAMAM树形分子由上海交通大学微纳米研究院生物纳米工程研究室提供,脂质体LipolifectmainTM2000购自美国Invitrogen公司。Survivin-asODN由上海生工公司合成。方法:将PAMAM和阳离子脂质体分别与Survivin-asODN混合得到载反义基因转染复合物。透射电镜观察复合物的形态,激光散射粒径分析仪测定粒径,zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光分度仪测定复合物的包封率和体外DNA释放速度。将对数生长期的人结直肠癌细胞SW620细胞接种于18只Balb/C裸鼠皮下建立结直肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机均分为脂质体组、PAMAM组和空白对照组。分别注射脂质体-survivin-asODN转染复合物、PAMAM-survivin-asODN转染复合物、血清培养液,观察两组移植瘤体积,Westernbloting方法检测移植瘤组织中survivin基因的表达。主要观察指标:阳离脂质体-survivin-asODN复合物及PAMAM-survivin-asODN复合物的粒经,zeta电位,基因载药率,包封率,释放率,转染后survivin表达率及对凋亡的诱导率,种植肿瘤生长抑制率,移植瘤细胞Survivin蛋白的表达及活性。结果:PAMAM-survivin-asODN复合物的粒径小于脂质体-survivin-asODN复合物的粒径(P<0.01),而zeta电位高于PAMAM-survivin-asODN复合物zeta电位(P<0.0
- 蔡寨厉周黄宗海方素珍崔大祥高峰
- 关键词：反义寡核苷酸SURVIVIN
- 聚酰胺树形分子递送survivin反义脱氧寡核苷酸抑制裸鼠肝癌移植瘤被引量：4
- 2008年
- 目的:探讨聚酰胺-胺型(polyamidoamine,PAMAM)树枝状高聚合物介导survivin反义寡核苷酸(survivin antisense oligodeoxynucleotide,survivin-asODN)对肝癌裸鼠移植瘤及其微血管形成的抑制作用。方法:以人肝癌细胞SMMC-7721裸鼠皮下注射建立肝癌裸鼠皮下移植瘤模型。将PAMAM和阳离子脂质体分别与survivin-asODN混合得到载反义基因复合物,透射电镜观察复合物的形态、粒径,zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光分度仪测定复合物的的包封率和体外DNA释放速度。将两种反义基因复合物分别注射裸鼠移植瘤体内,观察两组移植瘤大小;免疫组化方法检测瘤组织中微血管密度(microvesseldensity,MVD);Westernblotting检测移植瘤组织中survivin蛋白的表达。结果:PAMAM-survivin-asODN复合物的粒径小于脂质体-survivin-asODN复合物的粒径[(64.9±9.6)vs(193.9±32.2)nm,P<0.01],而zeta电位高于脂质体-survivin-asODN复合物[(37.7±3.8)vs(22.6±2.2)mV,P<0.05];基因包封率两组比较无显著差异;PAMAM反义基因复合物对DNA持续释放达14d,但脂质体复合物只持续5d。PAMAM-survivin-asODN复合物治疗组裸鼠移植瘤组织survivin蛋白表达低于脂质体-survivin-asODN复合物组[(26.8±5.6)vs(37.0±5.9),P<0.05];PAMAM-survivin-asODN复合物治疗组移植瘤重量低于脂质体-survivin-asODN复合物组[(124.8±25.2)vs(210.2±33.6)mg,P<0.05],其微血管密度低于脂质体-survivin-asODN复合物组[(2.8±1.5)vs(6.4±2.7),P<0.05]。结论:PAMAM能将survivin-asODN高效递送到肝癌移植瘤细胞,降低瘤组织中survivin蛋白的表达,可通过抑制移植瘤微血管的形成来抑制癌细胞的生长。
- 姚航岳隧岩金跃明潘碧峰高峰崔大祥
- 关键词：SURVIVIN反义脱氧寡核苷酸肝癌
- 聚酰胺树形分子高聚合物介导Survivin反义寡核苷酸诱导血管内皮细胞凋亡被引量：1
- 2008年
- 目的:观察聚酰胺树形分子高聚合物作为survivin反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotide,asODN)传递系统的可行性以及对人脐血管内皮细胞的survivin表达、细胞生长的影响。方法:实验于2005-05/2006-03在上海交通大学微纳米科学技术研究院微纳制造技术国家重点实验室完成。①将200μg/Lsurviving-asODN和3.66μg/L聚酰胺制备聚酰胺反义基因复合物,同时制备阳离子脂质体反义基因复合物作为对照。②透射电镜观察复合物的形态、粒径,zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光分度仪测定复合物的包封率、载药率和体外DNA释放速度。③将上述两种基因载体复合物转染人脐血管内皮细胞,测定其转染效率;Westernblotting检测转染后细胞中survivin蛋白的表达;流式细胞术检测两组细胞的凋亡率。结果:①成功制备聚酰胺反义基因载体系统聚酰胺-survivin-asODN。该复合物的粒径小于脂质体-survivin-asODN复合物(P<0.01),但zeta电位高于后者(P<0.05);两者基因载药率、包封率无显著差异(P>0.05);聚酰胺对DNA持续释放14d,但脂质体只持续5d。②聚酰胺-survivin-asODN转染人脐血管内皮细胞的效果强于脂质体-survivin-asODN(P<0.05),转染后人脐血管内皮细胞siurvivin蛋白的表达低于脂质体复合物(P<0.05),该细胞的凋亡率高于脂质体复合物(P<0.05)。结论:聚酰胺能将Survivin-asODN高效递送到人脐血管内皮细胞,降低survivin蛋白的表达并诱导血管内皮细胞凋亡。
- 姚航岳燧岩金跃明潘碧峰高峰崔大祥
- 关键词：反义寡核苷酸血管内皮细胞SURVIVIN生物材料
- 聚酰胺-胺型树枝状高聚合物介导survivin反义寡核苷酸抑制结直肠癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用被引量：4
- 2008年
- 目的探讨聚酰胺-胺型树枝状高聚合物(PAMAM)介导survivin反义寡核苷酸(survivin-ASODN)对结直肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法以人结直肠癌细胞SW620裸鼠皮下注射建立结直肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,将PAMAM和阳离子脂质体分别与survivin-ASODN混合得到载反义基因转染复合物。透射电镜观察复合物的形态,激光散射粒径分析仪测定粒径,zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光分度仪测定复合物的包封率和体外DNA释放速度。将两种反义基因复合物注射裸鼠移植瘤体内,观察两组移植瘤体积,Western bloting方法检测移植瘤组织中survivin基因的表达。结果PAMAM-survivin-ASODN复合物的粒径小于脂质体-survivinASODN复合物的粒径(P<0.01),而zeta电位高于PAMAM-survivin-ASODN复合物zeta电位(P<0.05),基因包封率两组无显著差异。PAMAM对DNA持续释放达14d,但脂质体复合物只持续5d。PAMAM-survivin-ASODN复合物治疗组裸鼠移植瘤survivin蛋白表达低于脂质体-survivin-ASODN复合物组(P<0.05)。PAMAM-survivin-ASODN复合物治疗组移植瘤体积低于脂质体-survivin-ASODN复合物组(P<0.05)。结论PAMAM能将survivin-ASODN高效递送到结直肠癌移植瘤细胞,降低survivin蛋白的表达,抑制移植瘤生长。
- 厉周黄宗海崔大祥姚航俞金龙李强潘碧峰高峰
- 关键词：结直肠癌反义寡核苷酸SURVIVIN
- Survivin反义寡核苷酸树形分子载体的构建及其对肝癌细胞凋亡的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:研究聚酰胺(polyamidoamine,PAMAM)树形分子高聚合物作为survivin反义寡核苷酸(survivin antisense oligodeoxynucleotide,survivin-asODN)载体传递系统的可行性以及对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响。方法:将200μg/Lsurvivin-asODN和3.66μg/L PAMAM混合制备PAMAM反义基因复合物,同时制备阳离子脂质体反义基因复合物作为对照。透射电镜观察复合物的形态、粒径,Zeta电位分析仪测定复合物的zeta电位,离心法和紫外分光光度仪测定复合物的包封率、载药率和体外DNA释放速度。将上述两种基因载体复合物转染肝癌SMMC-7721细胞,测定其转染效率;Western blotting检测转染后肿瘤细胞中survivin蛋白的表达;流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡率。结果:成功制备PAMAM反义基因载体系统PAMAM-survivin-asODN。该复合物的粒径小于脂质体-survivin-asODN复合物的粒径[(64.9±9.60)vs(193.9±32.20)nm,P<0.01],但zeta电位高于后者[(37.7±3.80)vs(22.6±2.20)mV,P<0.05];两者基因载药率、包封率无显著差异;PAMAM反义基因复合物对DNA持续释放达14 d,但脂质体复合物只持续5 d。PAMAM-survivin-asODN转染肝癌细胞的效果强于脂质体-survivin-asODN(P<0.05)。转染后肝癌细胞siurvivin蛋白的表达显著低于脂质体复合物[(26.80±5.65)vs(36.96±5.89),P<0.05],该细胞的凋亡率显著高于脂质体复合物转染细胞[(60.3±8.25)%vs(48.7±9.39)%,P<0.05]。结论:PAMAM作为载体系统能将survivin-asODN高效递送到肝癌SMMC-7221细胞,诱导人肝癌细胞的凋亡。
- 姚航岳隧岩金跃明潘碧峰高峰崔大祥
- 关键词：反义寡核苷酸SURVIVIN基因肝癌凋亡
- 量子点标记与绿色荧光素标记对survivin反义寡核苷酸生物功能影响的比较被引量：2
- 2007年
- 目的观察量子点和绿色荧光素分别标记的survivin反义寡核苷酸(ASODN)转染人乳腺癌细胞株MCF-7后,在标记存在时间、survivin的表达及细胞增殖、凋亡方面有无差异。方法将量子点和绿色荧光素分别标记的survivin ASODN通过脂质体转染MCF-7,MTT法检测细胞生长抑制率,RT-PCR检测survivin mRNA,Western blot检测survivin蛋白表达,流式细胞仪分析细胞凋亡率变化,荧光倒置显微镜观察细胞内荧光物质分布。结果量子点与绿色荧光素分别标记的survivin ASODN作用MCF-7后,survivin mRNA和survivin蛋白表达均下降,但两者间无显著差异(P>0.05)。两者细胞生长抑制率、凋亡率间无显著差异(P>0.05)。转染后4d绿色荧光素标记组细胞内荧光消失,而量子点标记组荧光1周仍存在。结论量子点标记survivin ASODN与绿色荧光素标记比较,对survivin的表达及细胞增殖、凋亡方面无差异,而标记更稳定,存在时间更长。
- 姚航黄宗海厉周贺蓉高峰崔大祥
- 关键词：量子点反义寡核苷酸
