王磊
- 作品数：21 被引量：76H指数：5
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省农业科技攻关项目国家绒毛用羊产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 陕北白绒山羊种公羊的体细胞克隆被引量：12
- 2012年
- 【目的】利用体细胞核移植技术克隆陕北白绒山羊优秀种公羊个体。【方法】以特别优秀成年陕北白绒山羊种公羊耳部皮肤成纤维细胞为供体细胞,体外培养成熟的陕北白绒山羊卵母细胞作为受体,利用显微操作方法对成熟卵母细胞进行去核操作,然后将供体细胞注射到其卵周隙内,经电融合将其导入去核卵母细胞内形成核移植重组胚。利用钙离子载体Ionomycine联合蛋白酶抑制剂6-甲基氨基嘌呤(6-DMAP)对核移植重组胚进行激活处理,挑选激活后完整的胚胎继续进行体外培养,然后在2～16细胞期时将克隆胚胎移植到相应的同期发情受体母羊体内,利用PCR-RFLP技术鉴定克隆羊。【结果】构建了体细胞核移植胚胎253枚,重组胚胎的融合率为71.54%(181/253),体外培养后的卵裂率为68.33%(123/180),囊胚发育率为25.20%(31/123);在此基础上,构建了537枚克隆胚,将其中卵裂的359枚分别移植到32只代孕母羊体内,移植60d后,有2只受体母羊确认妊娠,最终1只受体母羊妊娠第4月流产出2只死羔;另1只受体母羊维持到期并顺产体细胞克隆羊1只。经遗传学鉴定,2只流产羊羔与1只存活个体均为体细胞核移植后代。【结论】获得陕北白绒山羊克隆个体,建立了相对完善的陕北白绒山羊克隆技术体系。
- 屈雷雷安民闫海龙于鸿浩袁超王磊白丁平陈生会冯平马晓玲高晔陈玉林
- 关键词：体细胞克隆核移植陕北白绒山羊
- 产酸性木聚糖酶链霉菌的鉴定、酶学特性及发酵工艺研究被引量：1
- 2016年
- 木聚糖是谷物类饲料中的主要抗营养因子。为筛选高效降解半纤维素的菌株，提高粗饲料利用率，本试验采用水解圈法从土壤中筛选出1株产木聚糖酶的细菌，经鉴定为灰略红链霉菌，命名为Streptomyces griseorubens WL003。该菌所产木聚糖酶的最适酶促反应温度和pH分别为65℃、4．5，于30～55℃处理10min后，残余酶活不低于80％：于pH3．5～11．0处理1．5h，残余酶活仍保持在88％以上；Tween-80可提高木聚糖酶活力，而Cu^2＋．SDS及β-巯基乙醇则会较强地抑制酶活。该菌株以9％接种量接种至最适发酵培养基，碳源为10％麦秸，氮源为1．41％牛肉膏，0．1％吐温-80，初始pH为6．0，经32℃、180r／min下培养7d时，所产木聚糖酶活性最高，可达50．82u／InL，为优化前2．5倍。菌株WL003对麦秸的粗纤维降解效果最好，对苜蓿草粉的粗纤维降解效果最差。证明从土样分离到的酸性木聚糖酶菌株WL003，在降解饲料粗纤维方面具有较好的应用潜力。
- 周宁王智伟曹平华王磊王磊陈玉林
- 关键词：链霉菌木聚糖酶酶学性质产酶条件优化
- 罗伊乳酸杆菌高效电转化方法的建立被引量：1
- 2011年
- 【目的】建立野生型罗伊乳酸杆菌的高效电转化方法,为乳酸杆菌工程菌的研究提供参考。【方法】采用醋酸锂(LiAc)和二硫苏糖醇(DTT)对不同浓度(0.5×109,1.0×109,2.5×109,5.0×109,10.0×109 mL-1)的罗伊乳酸杆菌分别预处理0,10,20,30min,制备罗伊乳酸杆菌感受态细胞,用于电转化,采用PCR和EcoRⅠ酶切鉴定阳性转化子,建立罗伊乳酸杆菌高效电转化方法。【结果】罗伊乳酸杆菌转化效率随LiAc和DTT处理时间的延长和细胞密度的升高而提高,在本试验条件下罗伊乳酸杆菌电转化的最佳菌体浓度为10.0×109 mL-1,LiAc和DTT的最佳处理时间为20min,在该条件下转化效率达(32.60±7.12)×107 cfu/μg,比未经LiAc和DTT处理的细胞转化效率高104倍以上。【结论】建立了罗伊乳酸杆菌高效电转化方法,电转化的最佳菌体浓度为10.0×109 mL-1,LiAc和DTT的最佳处理时间为20min。
- 孙琳胡雄兵王磊黄亚娟杨明明陈玉林
- 关键词：电转化乳酸杆菌
- 不同粗蛋白、消化能水平对商品獭兔生产性能的影响被引量：10
- 2009年
- 旨在研究粗蛋白、消化能对商品獭兔生产性能的影响,选择3月龄獭兔108只,随机分为9组,每组饲喂不同粗蛋白、消化能营养水平的日粮。结果表明:饲喂消化能为(DE)10 MJ/kg、粗蛋白(CP)为15%的日粮时,日采食量最小为129.01 g/d,日增体质量最高为23.15 g/d,料重比最小为5.57;饲喂消化能(DE)为10MJ/kg、粗蛋白(CP)为17%的日粮时,半净膛率和全净膛率均达到最高,分别为69.46%、63.38%。
- 申芳丽任战军蔺艳霞郭斌高渊民郭肖兰王磊李庆芝李兴旺
- 关键词：獭兔消化能粗蛋白
- 日粮中不同Zn添加水平对雏鸵鸟生产性能的影响被引量：2
- 2009年
- 为了探讨日粮中添加不同Zn水平对0-2月龄鸵鸟生产性能、血液生理生化指标的影响。选用1-2月龄鸵鸟120只,随机分成4个组,每组3个重复,共12组。试验组在基础日粮中分别添加ZnSO460、90、120、150 mg/kg,试验期2个月。结果表明：日粮Zn添加水平对1月龄、2月龄鸵鸟的平均体质量增量、采食量差异显著,料重比无显著差异（P〉0.05）,不同Zn水平对血浆Zn水平和血浆碱性磷酸酶活性影响显著。综合生产性能和血液生理生化指标,0-2月龄鸵鸟饲料中Zn的最佳添加量为90 mg/kg。基础日粮中Zn含量32.4 mg/kg,当日粮Zn含量为122.4 mg/kg时0-2月龄鸵鸟才达到最佳生产性能。
- 李庆芝任战军王磊石芳萍王益民王广勇申芳丽张勇孙艳伟
- 关键词：鸵鸟碱性磷酸酶
- 陕北白绒山羊瘤胃乳酸杆菌的分离鉴定及生物学特性研究
- 2014年
- 无菌采集陕北白绒山羊瘤胃内容物,梯度稀释后涂布CaCO3-MRS培养基,厌氧培养分离乳酸杆菌,并对分离菌株的生长、发酵液pH、酸耐受性、胆盐耐受性、抑菌性及有无内源质粒等生物学特性进行了比较研究。结果显示:从陕北白绒山羊瘤胃液中共分离出11株乳酸杆菌,经16S rDNA比对鉴定,分别是植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)4株(ZW-4、ZW-8、ZW-10、ZW-11),干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)2株(GL-1、GL-5),罗伊乳酸杆菌(Lactobacillus reuteri)2株(LY-6、LY-7),短乳杆菌(Lactobacillus brevis)1株(DR-9),棒状乳酸杆菌(Lactobacillus coryniformis)1株(BZ-2)及弯曲乳酸杆菌(Lactobacillus curvatus)1株(WQ-3)。在相同培养条件下,植物乳酸杆菌ZW-4和干酪乳酸杆菌GL-1生长、产酸以及抑菌能力较强,同时植物乳酸杆菌ZW-4对胆盐和酸的耐受能力强于其他菌株;在上述菌株中,仅罗伊乳酸杆菌LY-7没检测到内源质粒,而植物乳酸杆菌ZW-4有6个内源质粒,明显多于其他几株乳酸杆菌。结果表明,分离自陕北白绒山羊瘤胃的植物乳酸杆菌ZW-4和干酪乳酸杆菌GL-1具有优良生物学特性,初步具备了作为益生菌使用的基本条件。
- 方明建王磊胡艳平陈玉林
- 关键词：陕北白绒山羊乳酸杆菌生物学特性
- 人乳铁蛋白对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响被引量：4
- 2009年
- 为了研究人乳铁蛋白对宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用及其对细胞凋亡、p53蛋白表达和Caspase-3活性的影响,试验采用MTT方法检测细胞的生长抑制率、DNA片段化试验检测细胞凋亡、流式细胞术测定细胞周期、Western-blot检测p53蛋白表达、Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3的活性。结果表明:人乳铁蛋白对宫颈癌Hela细胞的抑制呈现时间和剂量依赖性,有73%的Hela细胞停滞在G0G1期;Western-blot检测结果显示人乳铁蛋白可以上调p53蛋白的表达;人乳铁蛋白作用48 h后Caspase-3的活性是0小时时的5.5倍,二者差异极显著(P<0.01)。结果说明人乳铁蛋白能显著抑制宫颈癌Hela细胞生长,其抗肿瘤机制与诱导细胞凋亡、调控细胞周期、上调p53表达、活化Caspase-3有关。
- 吴国芳李青旺李健韩增胜张勇宁国柱王磊
- 关键词：人乳铁蛋白细胞凋亡细胞周期P53CASPASE-3
- 微生态制剂EM液在种鸵鸟生产中的应用被引量：1
- 2011年
- 在饲养模式相同的条件下,将陕西英考官池鸵鸟繁育中心的216只种鸵鸟随机分为试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和对照组,每组72只;对照组使用英考公司自制的鸵鸟饲料及药物正常饲养和预防,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组分别使用微生态制剂EM液和益生素拌料饲养,且不使用任何抗生素,分别于2004-2006年的2-11月进行为期9个月的饲养试验。结果表明,①试验Ⅰ组发病率分别比试验Ⅱ组和对照组高5.11%和15.26%(P<0.05),试验Ⅰ组无鸵鸟死亡,试验Ⅱ组和对照组死亡率分别为1.85%和4.63%(P<0.05);②试验Ⅰ组产蛋分别比试验Ⅱ组和对照组高出314和901枚(P<0.01),其种蛋合格率也分别比试验Ⅱ组和对照组高出10.23%和22.95%(P<0.01);③试验Ⅰ组受精率分别比试验Ⅱ组和对照组高出9.76%和22.12%(P<0.01),孵化率分别比试验Ⅱ组和对照组高出14.83%和19.06%(P<0.01),健雏率分别比试验Ⅱ组和对照组高出11.94%和20.14%(P<0.01);④整个试验期结束后,饲养每只种鸵鸟试验Ⅰ组比试验Ⅱ组和对照组节省243和599.4元。可见,添加微生态制剂EM的饲料饲喂种鸵鸟效果非常明显,是目前鸵鸟养殖上比较好的微生态制剂,具有非常大的推广价值。
- 张勇阮鹏王磊任战军徐启华赵泮峰白康冯奇张涛吴艳王斌
- 关键词：鸵鸟
- 林麝饲用植物叶常规营养成分分析被引量：13
- 2009年
- 用国标规定的饲料常规养分分析方法对林麝喜食的勾儿茶等24种野生植物叶样品中的干物质、粗蛋白质、粗纤维、粗脂肪、粗灰分、总能进行测定，并将测定结果与泡桐、苜蓿的营养成分进行比较。结果表明，这些样品的粗蛋白含量介于8．4％～27．4％之间，其中构树、律草、桑的蛋白含量均高于泡桐、苜蓿，分别为27．4％、22．3％、19．0％；干物质含量介于90．1％～93．5％之间，粗脂肪含量介于0．8％～7．1％之间，粗纤维含量介于7．8％～23．0％之间，粗灰分含量介于4．8％～13．2％之间，总能介于14．38～19．73MJ／kg之间。这将为林麝的饲养管理及其营养基础研究提供一定的依据。
- 白彦任战军刘文华王永奇邓铸疆王乐申芳丽王磊
- 关键词：林麝树叶营养成分
- 纤维素酶产生菌的筛选、其酶学性质及对饲料粗纤维降解效果的研究被引量：7
- 2013年
- 从桑天牛排泄物中分离产纤维素酶的菌株并进行鉴定,对其酶学特性以及饲料粗纤维的降解效果进行研究。采用刚果红染色法筛选出1株产纤维素酶的菌株HY3,利用形态学和分子生物学进行种属鉴定,并通过DNS法测定所产纤维素酶活力,用尼龙袋法测定其对三种饲料(麸皮、麦草秸秆、燕麦秸秆)粗纤维的降解率。结果表明,菌株HY3为地衣芽孢杆菌,此菌株所产纤维素酶的最适反应温度为70℃,最适反应pH值为6.5、菌株HY3对麸皮的粗纤维降解率最高(7.41%),对麦草秸秆粗纤维的降解率最差(4.89%)。结果提示,该菌株所产纤维素酶具有较好的热稳定性,不耐强酸碱;粗纤维的降解率随时间的变化不大。
- 胡艳平王磊曹平华胡雄兵方明建陈玉林
- 关键词：酶学特性粗纤维降解率
