李君
- 作品数：9 被引量：12H指数：2
- 供职机构：北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 年龄对心脏瓣膜种子细胞体外培养增值的影响被引量：1
- 2009年
- 目的在心脏瓣膜构建中,年龄对作为种子细胞的人类间充质干细胞体外增值培养的影响。方法人类间充质干细胞采自不同青少年、中年、老年供体。对三种不同来源干细胞体外增殖能力进行组间比较。同时在三组间进行细胞分化、细胞迁移能力的比较。结果在青少年组,细胞克隆数量显著高于中年组和老年组(P<0.05);增殖曲线表明,青少年组和中年组细胞增殖能力显著高于老年组(P<0.05)。在干细胞定向分化能力和细胞迁移,青少年组和中年组显著高于老年组(P<0.05)。结论应用老年供体来源间充质干细胞进行自体组织瓣膜工程构建应采取审慎态度。
- 袁昕王宇枚张浩李君王巍魏英杰胡盛寿
- 关键词：衰老间充质干细胞
- 接触抑制对转化生长因子β诱导基因22(TSC-22)在心脏成纤维细胞中表达的影响
- 2012年
- 目的通过建立体外原代培养的新生大鼠心脏成纤维细胞模型,研究接触抑制对TSC-22表达的影响,并为进一步探明TSC-22在心脏成纤维细胞中的确切功能奠定基础。方法采用差速贴壁法原代分离培养Sprague-Dawley大鼠心脏成纤维细胞,分别进行下述实验:①以不同初始密度接种细胞,分为两组:A组为50%融合组:以1.0×105/ml密度接种细胞于T25细胞培养瓶中,培养24h;B组为100%融合组:以2.0×105/ml密度接种细胞于T25细胞培养瓶中,培养24h;②均以2.0×105/ml的初始密度接种细胞于T25细胞培养瓶中,分为4组:A组为未融合组:接种后培养6h(至贴壁未融合状态);B组为融合组:接种后培养24h(至100%融合状态);C组为胰酶消化打破融合组:接种后培养至100%融合后,0.25%胰酶消化,离心混悬后重新贴壁,继续培养6h(此时细胞重新贴壁但未融合);D组为胰酶消化重新达融合组:接种后培养至100%融合后,0.25%胰酶消化,离心混悬后重新贴壁,继续培养24h(此时细胞重新达到100%融合)。以上各组分别提取mRNA和蛋白,应用实时定量PCR(real-time PCR)、蛋白印记(Western blotting)法分别检测TSC-22 mRNA、蛋白表达的变化。结果实时定量RT-PCR和蛋白印记结果表明:①心脏成纤维细胞融合度达到100%,即发生接触抑制时,与50%融合度组相比,TSC-22的mRNA和蛋白水平水平均显著升高(P<0.05);②融合组心脏成纤维细胞与未融合组相比,TSC-22的mRNA和蛋白水平均显著升高;胰酶消化打破融合组心脏成纤维细胞与融合组相比,TSC-22的mRNA和蛋白水平均显著下降;胰酶消化重新达融合组成纤维细胞与胰酶消化打破融合组相比,TSC-22的mRNA和蛋白水平均显著升高(P均<0.05)。结论本实验结果明确表明,在体外培养的心脏成纤维细胞中,接触抑制是诱导TSC-22表达升高的重要因素。当心脏成纤维细胞发生接触抑制时,TSC-22可能通过行使其转录因子的生物学功能,在接触抑�
- 史强魏英杰崔传珏李君刘晓艳白媛媛
- 大鼠心肌梗死后心肌中转化生长因子β诱导基因-22蛋白表达的变化规律及白细胞介素-6对其表达的诱导作用被引量：1
- 2011年
- 目的:检测大鼠心肌梗死(心梗)后心肌组织中转化生长因子β诱导基因-22(TSC-22)蛋白水平表达的动态变化,并在细胞水平上研究白细胞介素-6(IL-6)是否对其蛋白表达有诱导作用。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠,通过结扎左冠状动脉前降支制备心梗模型。分为心肌梗死模型组(心梗组)和假手术对照组(假手术组),于术后1天、3天、7天、2周、4周进行心脏标本取材,酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠左心室心肌组织中TSC-22蛋白的表达。胰酶消化法分离培养乳鼠原代心肌细胞,随机分为心肌细胞对照组和心肌细胞实验组,心肌细胞对照组正常培养,心肌细胞实验组分别在2.5、5.0、10.0 ng/ml浓度的IL-6刺激下培养24 h。采用ELISA法、免疫细胞化学法和免疫印迹法(Western blot)等方法检测TSC-22蛋白表达。结果:ELISA法结果表明,大鼠心肌梗死1天、7天心梗组比假手术组左心室心肌组织中TSC-22蛋白含量显著升高,4周时则显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。心肌细胞实验的ELISA法结果表明,在10.0 ng/ml的IL-6刺激24 h后,心肌细胞实验组比心肌细胞对照组TSC-22蛋白表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),在2.5、5.0 ng/ml IL-6刺激24 h后,心肌细胞实验组与心肌细胞对照组比较差异无统计学意义;免疫细胞化学法和蛋白免疫印迹法结果显示,10.0 ng/ml的IL-6刺激24 h后,TSC-22在细胞核中的染色明显加深。结论:大鼠心梗后的急性期,如梗死1天、7天后,左心室心肌组织中TSC-22蛋白水平迅速升高。炎症细胞因子IL-6可能是其在心梗后上调的诱导因素之一。
- 史强魏英杰张秀芳崔传珏李君刘晓艳白媛媛
- 关键词：心肌梗塞白细胞介素-6
- 课题1 汉族人ABCA1基因R219K多态性对血脂的影响及其与冠心病和2型糖尿病的关系;课题2 流感病毒的快速诊断
- 背景和目的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平降低是早发动脉粥样硬化(AS)发展的独立危险因素。HDL-C动员胆固醇从外周组织细胞转运至肝脏进行代谢，在胆固醇逆转运(RCT)中发挥了重要作用。ATP结合盒转运子A1(AB...
- 李君
- 关键词：基因多态性血脂冠心病糖尿病流感病毒
- 文献传递
- 1.汉族人ABCA1基因R219K多态性对血脂的影响及其与冠心病和2型糖尿病的关系 2.流感病毒的快速诊断
- 背景和目的 高密度脂蛋白胆同醇(HDL-C)水平降低是早发动脉粥样硬化(AS)发展的独立危险因素。HDL-C动员胆同醇从外周组织细胞转运至肝脏进行代谢，在胆固醇逆转运(RCT)中发挥了重要作用。ATP结合盒转运子...
- 李君
- 关键词：基因多态性血脂冠心病
- 文献传递
- 低氧无血清诱导乳鼠心肌细胞胰岛素样生长因子2受体表达上调被引量：4
- 2010年
- 目的研究胰岛素样生长因子2受体(IGF-2R)在体外模拟心肌缺血低氧环境时表达的变化。方法分离培养SD乳鼠心肌细胞,以低氧和无血清处理不同时间点后收获细胞,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和实时定量RT-PCR测定IGF-2RmRNA的表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定IGF-2R蛋白水平。结果与对照组相比,低氧无血清处理12和24 h乳鼠心肌细胞IGF-2RmRNA表达显著增高(P<0.01),处理24 h后IGF-2R蛋白表达也升高(P<0.05)。结论低氧无血清可诱导乳鼠心肌细胞IGF-2R的表达,IGF-2R可能在缺血低氧引起心肌损害过程中发挥重要的作用。
- 张秀芳史强崔传珏李君魏英杰胡盛寿
- 关键词：心肌细胞
- 转化生长因子β1对乳鼠心肌细胞转化生长因子结合蛋白2表达的影响被引量：3
- 2012年
- 目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在诱导心肌细胞表达转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)中的作用及信号传导通路。方法培养乳鼠心肌细胞;实时定量聚合酶链式反应、蛋白质印迹和免疫细胞化学方法检测不同时间和不同浓度的TGF-β1对大鼠乳鼠心肌细胞LTBP2基因及蛋白表达的影响;用TGF-β1相关信号通路阻断剂探讨TGF-β1调节LTBP2表达改变的信号传导机制。结果 LTBP2基因表达随着TGF-β1浓度增加(0、2、5及10μg/L)而明显升高,在5μg/L时刺激最强(P<0.05);5μg/L的TGF-β1刺激下心肌细胞内LTBP2基因和蛋白表达的升高呈时间依赖性,均在12 h最高,24 h开始呈下降趋势(P<0.05或P<0.01);免疫细胞化学结果显示TGF-β1明显升高LTBP2的表达。信号传导通路研究显示TGF-β1在心肌细胞内主要通过ERK信号通路和PI3K信号通路诱导LTBP2的表达。结论 TGF-β1在乳鼠心肌细胞内通过ERK信号通路和PI3K信号通路上调LTBP2的表达。
- 白媛媛魏英杰崔传珏李君刘晓艳史强
- 关键词：转化生长因子Β1心肌细胞
- 光氧化处理脱细胞牛心包构建组织工程心肌补片的实验研究被引量：1
- 2011年
- 目的探讨经染料介导光氧化处理的脱细胞牛心包构建组织工程心肌补片的可行性。方法新鲜牛心包先脱细胞，再经光氧化法处理，消毒后种植雄性sD骨髓间充质干细胞（MSCs）。结扎雌性大鼠左冠状动脉前降支，制作心肌梗死模型，1周后将符合心肌梗死标准的大鼠随机分成3组，心肌梗死对照组（MI）、补片组（P）、种细胞补片组（P＋C）分别进行干预。4周后，超声评价心功能；2周、4周取材行组织学和免疫组化检查。结果脱细胞处理完全去除了牛心包组织中的细胞，光氧化处理使组织结构致密；种植的细胞在组织表面形成连续的细胞层。P＋C组牛心包心肌补片降解程度、微血管密度在2周、4周时均较P组大。超声评价补片4周后大鼠心功能，P＋C组左室射血分数（LYEF）、左室缩短分数（LVFS）均较MI组和P组大，与MI组的差异有统计学意义。结论光氧化处理脱细胞牛心包构建的组织工程心肌补片可以延缓心功能恶化，该处理方法具有良好的应用潜力。
- 张振亮周建业胡盛寿刘立群孙平平杨子鹤李君
- 关键词：心肌心肌梗塞牛心包光氧化
- 微囊化重组CHO细胞移植促进大鼠心肌梗死后血管新生的实验研究被引量：1
- 2008年
- 目的在大鼠心肌梗死部位植入微囊化重组中华仓鼠卵巢(chinese hamster ovary,CHO)细胞,观察其分泌的血管内皮细胞生长因子(VEGF)是否可以促进心肌梗死部位的血管新生,改善心功能。方法通过质粒转染的方法构建可以分泌VEGF的重组CHO细胞系,用微囊包裹,观察微囊内细胞的生长及分泌情况。制备大鼠心肌梗死模型,随机将48只8周龄SD雄性大鼠分成微囊化细胞移植组(MC-CHO组)、单纯细胞移植组(CHO组)、空微囊移植组(MC组)和无血清培养基移植组(对照组),每组12只。移植3周后检测心功能改善情况,病理切片观察微囊结构及囊内细胞存活情况,注射部位微血管计数比较促血管新生效果。结果体外检测可见重组CHO细胞在微囊生长迅速,第8d时培养上清中VEGF达3852pg/ml;移植3周后MC-CHO组左心室大小和心功能明显好于其它3组,差异有统计学意义(P<0.05);局部微血管密度MC-CHO组较CHO组、MC组和对照组明显增加(22.3±3.1vs.15.6±2.8,11.4±2.5和13.2±2.7个/每高倍视野,P<0.05);组织学检查可见微囊结构完整,内有存活且具有分泌功能的CHO细胞。结论微囊化重组CHO细胞移植可促进大鼠心肌梗死后血管新生,改善心功能。
- 朱沈军张浩胡盛寿王为张虹李君魏英杰
- 关键词：微囊血管内皮生长因子心肌梗死细胞治疗血管新生
