王春景
- 作品数：11 被引量：23H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家科技基础条件平台建设计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 人胚胎肝细胞的体外培养及表型观察被引量：2
- 2007年
- 目的观察体外培养的人胚胎肝细胞的特性。方法采用胰酶分步消化法体外分离人胚胎肝细胞,在培养的不同代数,收集培养上清液测定甲胎蛋白、白蛋白及5种特异性酶(ALT、AST、GGT、ALP、LDH)的分泌量,用免疫组化法测定细胞内细胞色素C的表达情况。观察诱导分化剂丁酸钠对该细胞的作用效果。结果体外分离培养的肝细胞在DMEM培养基中呈单层多边形上皮样生长,常规传代可维持约5个半月(30代),在传代过程中具有分泌白蛋白及5种特异性酶的生理功能。结论建立的人胚胎肝细胞系,保持了肝细胞的表型及分泌多种特异性酶。
- 杨帆王春景苏小玲顾蓓张宏刘玉琴
- 关键词：细胞培养肝细胞胚胎丁酸钠
- 研究工作中实验细胞使用选择被引量：2
- 2009年
- 体外培养的哺乳细胞越来越多地应用于生命科学和医学的科学研究。因为细胞是生命的基本单位,具备生命所有的遗传信息,具备生命的各种功能、特征。作为研究对象和研究工具,培养的细胞给人们带来极大的方便和实惠。近年来国家也将细胞资源的保藏作为基础性工作项目给予资助,并建立了相关的保藏机构。工作中如何选择所需要的细胞?如何获取实验所需细胞?所选用的或得到的细胞可靠性如何?如何判断?这些问题对于需要使用细胞进行研究工作的科研人员是必须首先解决的问题。根据作者多年的工作经验,介绍细胞的可能来源、背景材料的获得、真实性验证、特性鉴定等方面知识。研究工作中实验细胞应选择来源、背景清楚的细胞,要有合理的真实性验证数据,要具备细胞本身应具有的特性。研究工作应使用质量可靠的细胞。到规范的保藏机构使用已建立的细胞系。自建细胞要进行必要的鉴定。
- 王春景刘玉琴
- 关键词：细胞培养
- 人胚胎肝细胞的体外培养及表型观察
- 目的体外培养人胚胎肝细胞并观察其表型特性;方法采用胰酶分步消化法体外分离人胚胎肝细胞,在培养的不同代数,收集培养上清液用电化学发光法测定甲胎蛋白,用全自动血生化分析仪测定白蛋白、ALT、AST、GGT、 ALP、LDH的...
- 杨帆王春景苏晓玲顾蓓张宏刘玉琴
- 关键词：肝细胞胚胎丁酸钠
- 文献传递
- CD133在人结肠癌细胞分化中的作用
- CD133分子在多种肿瘤包括结肠癌中都用来作为肿瘤干细胞的一个标记,但是它本身的的功能现在还不清楚。我们用Western blotting检测了44种人肿瘤细胞系中CD133的表达,8种肿瘤细胞系呈阳性表达,其中5个是结...
- 冯海凉杨丽娟卞晓翠杨振丽顾蓓张宏王春景苏小玲赵晓梅刘玉琴
- 关键词：CD133结肠癌肿瘤干细胞分化
- 文献传递
- 人体小细胞肺癌细胞系LTEP-sm的细胞遗传学研究
- 1990年
- 应用G显带技术对我国第一个小细胞肺癌细胞系(SCLC)LTEP-sm进行细胞遗传学研究,共分析分散及显带良好的55代和99代中期相细胞各30个,并对55代及99代各50个中期相细胞进行染色体计数。结果表明,该细胞系55代细胞染色体众数为51～53条,99代为51～54条,基本是一亚三倍体。恒定出现的标记染色体有6个,其中3号染色体短臂缺失即del3p14-23在30个中期相中高达26(55代)及28(99代)个;另5个标记染色体是t(1;15)(1qter→1p22∷15p12→15qter),del(1)(qter→p31:),del(7)(pter→q31:),t(6;9)(6pter→6q14∷9q21→9qter),del(12)(qter→p12.3:)。99代细胞的染色体众数与55代基本一致,且标记染色体完全相同,表明该细胞系遗传结构稳定。
- 杨力王春景何申董敏李申德
- 关键词：小细胞肺癌细胞遗传学
- 细胞培养操作中常见问题及处理对策被引量：7
- 2009年
- 王春景刘玉琴张宏顾蓓苏小玲
- 关键词：细胞培养技术操作环境机体内环境营养需求操作手法
- 小鼠类巨噬细胞系MMC-1生物学特性的缩时显微电影分析
- 1991年
- 用缩时显微电影技术记录小鼠类巨噬细胞系MMC-1并进行分析。结果证明该细胞系除具有一般培养细胞的性质,如铺开、极性、接触抑制及有丝分裂外,还具有巨噬细胞吞噬及玫瑰花结形成特性。此外,还观察到1个饱食后的MMC-1细胞向周围前进中的红细胞伸出手指样丝状伪足,在伪足与红细胞接触处,红细胞碎片沿伪足移向MMC-1细胞体而溶解。
- 王瑞瑜何申王春景王德斌
- 关键词：巨噬细胞
- 视神经星状胶质细胞的培养被引量：1
- 2009年
- 目的:探索建立视神经星状胶质细胞培养的最佳方法,观察该细胞体外水解酶表达情况。方法:分别取不同年龄WISTAR大鼠(出生4 d、7 d、成年)的视神经,利用胰蛋白酶加EDTA、胶原酶、木瓜酶、胰蛋白酶加胶原酶等不同方法消化,分别接种在0.2%明胶、鼠尾胶、多聚赖氨酸包被的培养瓶中,进行原代培养,观察细胞生长状况。利用免疫组化鉴定分离培养的细胞。连续传代观察其衰老情况。利用水解空斑法观察其水解酶表达。结果:几种方法均可见细胞生长,年龄4、7 d大鼠视神经要比成年大鼠视神经胶质细胞培养成功率高,利用胰蛋白酶与胶原酶混合消化要比其他消化方法细胞损失小,速度快,细胞成活率高。培养细胞呈典型星状胶质细胞形态,GAFP呈阳性。常规3 d传代一次,可传代40次。胶质细胞在蛋白膜上可形成明显的水解空斑。结论:利用胰蛋白酶与胶原酶混合消化法,从新生鼠取材,可成功培养视神经星状胶质细胞,体外可传代40代。该细胞在体外可分泌蛋白水解酶。
- 顾蓓刘玉琴张永鹏张宏王春景苏小玲董继红
- 关键词：星状胶质细胞
- 组织和细胞体外培养现状被引量：2
- 2009年
- 王春景刘玉琴
- 关键词：细胞体外培养细胞培养技术细胞生物学生物工程细胞生存
- 应用聚合酶链式反应鉴定实验细胞的来源种属被引量：12
- 2009年
- 目的应用聚合酶链式反应(PCR)鉴定常见细胞的种属来源,以判断培养细胞是否存在种间的交叉污染。方法根据文献报道和NCBI数据库我们得到了32对种属特异性引物,并分别针对10种常见的细胞种属,对这些引物进行特异性和敏感性的筛选;以待检测细胞的基因组DNA为模板进行PCR及后续的琼脂糖凝胶电泳;以不同种属来源细胞的DNA混合物作为阳性对照模板,以水作为阴性对照模板。结果针对上述10种常见细胞来源的种属分别得到了1对特异性和敏感性均较好的引物,经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳后可以准确鉴定待检测细胞的种属来源,并判断该细胞是否存在种间污染。结论应用聚合酶链式反应可以简便、快速地鉴定实验细胞的种属,并判断该细胞是否存在种间的交叉污染。
- 卞晓翠刘玉琴王春景苏小玲赵晓梅顾蓓张宏
- 关键词：聚合酶链式反应细胞培养种属鉴定
