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利用简并PCR克隆烟草节杆菌02181肌酸酶基因被引量：4: 2007年; 目的用简并PCR从烟草节杆菌02181中扩增出肌酸酶部分序列,以期获得其全长编码基因。方法从NCBI查询已发表的肌酸酶蛋白质序列,将其递交到Block Maker服务器,利用工具软件CODEHOP设计简并引物,以烟草节杆菌02181基因组DNA为模板做PCR。结果将所得目的片段(414bp)在NCBI上BLASTx,结果表明,所得序列与不同菌种来源的肌酸酶高度同源,其中与节杆菌属肌酸酶基因的同源性最高,一致性达到了71%。结论从烟草节杆菌02181中成功克隆出了肌酸酶基因的部分序列。; 智强李淑慧高利宏李鹏周玉易维京王源胡川闽; 关键词：肌酸酶简并PCR MAKER CODEHOP

烟草节杆菌02181肌酸酶的基因克隆: 2011年; 目的在已知烟草节杆菌02181肌酸酶基因部分序列的基础上，从烟草节杆菌02181基因组DNA中克隆得到肌酸酶全基因。方法根据已得到的肌酸酶部分序列，利用基因组步移技术，分另q克隆得到肌酸酶基因已知部分序列的上、下游序列，再将3段序列拼接，得到肌酸酶全基因，并在NCBI上检索证实。结果得到的烟草节杆菌02181肌酸酶基因的全长序列，在NCBI上检索后证实为一新基因，该基因全长1254bp（舍终止密码子TAA），为一完整的开放读码框架（ORF），编码417个氨基酸，理论分子量为46377Da，并与多种不同来源的肌酸酶有着较高的同源性。其中，与Arthrobactersp．FB24来源的肌酸酶氨基酸序列的一致性达到了80％（332／417），同源性则达到了87％（365／417）。结论成功地克隆了烟草节杆菌02181肌酸酶基因，为今后的基因表达奠定了基础，也为肌酐测定试剂的国产化迈出了坚实的一步。; 智强胡川闵易维京周玉侯小平; 关键词：肌酸酶基因克隆基因组步移

人NT-proBNP的高效原核表达及免疫学检测标准品的研究被引量：4: 2008年; 目的构建人NT-proBNP(氨基末端脑钠肽,amino-terminal pro-brain natriuretic peptide)的高效原核表达载体,建立重组NT-proBNP纯化工艺,制备NT-proBNP免疫学检测工作标准品。方法采用人工合成和套叠(GeneSOEing)PCR技术相结合的方式对NT-proBNP基因序列进行密码子进行偏嗜性改造后克隆入原核表达质粒pET32a和pET42a构建不同形式的NT-proBNP原核表达重组质粒;采用离子交换、HIS和GST亲和层析柱以及肠激酶(EK酶)酶切等方法建立NT-proBNP重组蛋白的纯化工艺;用Roche公司NT-proBNP检测试剂盒测定所制备的标准品的免疫活性和稳定性。结果pET32a和pET42a构建的不同形式NT-proBNP原核表达质粒在BL21(DE3)均实现了高效可溶性表达,通过多种纯化方案制备了纯度达98.3%的NT-proBNP-83重组蛋白,经测定具有良好免疫活性和稳定性,适合用于免疫学检测工作标准品。结论成功构建了人NT-proBN的高效原核表达载体,筛选出较适合用于免疫学检测工作标准品的NT-proBNP重组蛋白。; 易维京李鹏李淑慧智强胡川闽; 关键词：蛋白纯化工作标准品

烟草节杆菌02181肌酸酶基因的克隆与表达研究: 血清和尿液中肌酐测定是临床评价肾小球滤过功能的重要指标，因而是临床上开展的重要生化项目之一。肌酐测定主要有化学法和酶法，这两种方法都是基于比色法。化学法主要源于Jeffe反应法，其优点是成本低，操作简单，易于基层单位开展...; 智强; 关键词：基因克隆基因表达肌酸酶; 文献传递

检验专业五年制本科开展临床生化双语教学的调查分析: 目的:评价对检验专业五年制本科生三个年级的临床物化学开展双语教学的效果.方法:对我校99-01级五年制检验专业本科临床生化的双语教学教学进行问卷调查,并对双语教学中出现的问题进行总结分析.结果:五年制检验专业本科学员对开...; 胡川闽智强易维京高利宏黄松生; 关键词：临床生物化学检验双语教学本科学生医学检验专业; 文献传递

5年制本科开展临床生化双语教学的调查分析被引量：2: 2007年; 目的评价对检验专业5年制本科生3个年级的临床生物化学开展双语教学的效果。方法对本校1999～2001级5年制检验专业本科临床生化双语教学进行问卷调查,并对双语教学中出现的问题进行总结分析。结果5年制检验专业本科学生对开展临床生化双语教学是认可的,收到了较好的效果,但双语教学的整体环境、教材和教学方式方法上还存在一些问题。结论可以对检验专业的本科学生实施临床生化的双语教学,临床生化双语教学的开展有助于提高学生的专业外语水平,开阔学生视野;同时对双语教学中发现的问题进行了总结分析,积累了一些经验;为进一步做好临床生化双语教学提供了可以借鉴的依据。; 胡川闽智强易维京高利宏黄松生; 关键词：检验本科临床生物化学双语教学

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智强