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表达反义单核细胞趋化蛋白-1的重组逆转录病毒对家兔动脉平滑肌单核细胞趋化蛋白-1基因表达的影响被引量：12: 1999年; 为研究反义单核细胞趋化蛋白－１转基因表达对单核细胞进入动脉壁的作用，首先构建了表达反义单核细胞趋化蛋白－１基因的逆转录病毒重组体，并观察它在培养的细胞中的表达。将家兔单核细胞趋化蛋白－１ｃＤＮＡ反向插入到ｐＬＮＣＸ，构成ＬＮＣＸ－ａｎｔｉ－ＭＣＰ－１重组病毒质粒。再将重组质粒转染φ－２细胞，继以φ－２细胞产生的病毒上清感染ＰＡ３１７细胞，取得Ｇ４１８ＰＡ３１７抗细胞克隆。上述细胞经扩增培养，收集病毒上清并感染ＮＩＨ３Ｔ３细胞后进行检测。结果发现，病毒的滴度为５．６×１０７ＣＦＵＬ，感染的ＮＩＨ３Ｔ３细胞中有重组病毒的整合。重组病毒感染培养的家兔动脉平滑肌细胞后，用聚合酶链反应检测发现，感染的平滑肌细胞基因组ＤＮＡ中有重组病毒整合；ＲＮＡｓｌｏｔ杂交结果显示，感染的平滑肌细胞中有反义单核细胞趋化蛋白－１的表达，与未感染的平滑肌细胞相比，感染的平滑肌细胞中单核细胞趋化蛋白－１ｍＲＮＡ的表达明显受到抑制。结果提示，反义单核细胞趋化蛋白－１逆转录病毒表达载体在培养的动脉平滑肌中能表达反义基因并抑制靶基因的表达。; 李福生王宗立许漫乔绘红刘佩毛张华任国锋赵三妹佘铭鹏; 关键词：MCP-1 反义RNA 逆转录病毒

反义大鼠凝血酶受体基因的构建及其对主动脉血管平滑肌细胞增生的影响被引量：6: 2000年; 凝血酶激活凝血酶受体引起的一系列细胞事件和内源性PDGF-A，bFGF的产生可能是血管病变发生发展过程中平滑肌细胞增生的重要因素。为进一步阐明血管损伤后平滑肌细胞增生的机理及探索有效治疗途径，针对凝血酶受体基因中一段包括转录起始点，翻译起始点，凝血酶结合和切割位点的序列作为靶序列，构建了凝血酶受体反义RNA重组表达载体pLXSN／ATR，并将其导入凝血酶刺激的动脉平滑肌细胞。结果表明重组基因转染能抑制凝血酶对大鼠平滑肌细胞DNA合成的刺激作用。提示序列特异的凝血酶受体反义重组基因的表达可以抑制凝血酶受体介导的血管平滑肌细胞增生。; 任国锋王宗立李拥军许漫赵三妹刘佩毛张华佘铭鹏; 关键词：凝血酶受体反义RNA 再狭窄平滑肌细胞增生

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任国锋

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