吴继红
- 作品数：23 被引量：47H指数：4
- 供职机构：上海市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划上海市卫生局“百人计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 阿糖胞苷与腺相关病毒的复合制剂及其用途
- 本发明属于生物医药领域，涉及新的基因治疗复合制剂及其用途和使用方法。公开了在使用腺相关病毒作为基因传递载体时，联合使用一定剂量的阿糖胞苷，可以明显增加腺相关病毒对正常和肿瘤细胞的转导效率，使腺相关病毒介导的外源基因的表达...
- 黄倩张圣海吴继红吴小兵董小岩李川源
- 文献传递
- 免疫毒素腺病毒载体靶向性提高肿瘤基因治疗效果研究
- 恶性肿瘤是危害人类健康与生命的最主要的疾病,尽管近年来在化疗、放疗和手术治疗等方面取得了长足的进步,但仍然不能遏制肿瘤发病率和死亡率的上升趋势。基因治疗正逐渐成为一种很有效的肿瘤辅助治疗手段,主要应用于中晚期病人。目前肿...
- 刘新建张圣海吴继红陈霞芳于惠黄倩
- 关键词：免疫毒素腺病毒靶向性肿瘤基因治疗
- 文献传递
- 重组腺病毒介导绿色荧光蛋白基因对小鼠眼组织的转染和表达被引量：2
- 2007年
- 目的研究不同剂量Ad5-EGFP前房注射后,报告基因在小鼠眼部组织的表达情况及分布特点。方法24只BALB/c小鼠随机分组。实验组以不同浓度梯度前房注射Ad5-EGFP。对照组前房分别注射PBS和不给予任何注射。观察活体眼部组织EGFP表达情况及阳性细胞的类型。结果低浓度注射组在各个时间点眼表均未观察到EGFP荧光表达。高浓度注射组在注射病毒第1d即可以观察EGFP的表达,在第10d时眼表EGFP荧光亮度、范围增加最为明显。EGFP在角膜内皮细胞、虹膜色素上皮细胞及小梁网阳性表达。结论Ad5型腺病毒载体定向携带报告基因在眼前节表达,为眼前节疾病的基因治疗提供了实验依据。
- 于慧吴继红张圣海刘新建张巨峰易苗英黄倩
- 关键词：角膜内皮细胞报告基因
- 二氯化钴对腺病毒基因表达的影响被引量：3
- 2009年
- 目的:研究二氯化钴(CoCl2)对缺氧反应元件调控E1AE1B表达的条件复制型腺病毒载体(Ad-5HRE-E1AE1B-RFP)和缺乏缺氧反应元件的复制缺陷型腺病毒载体(Ad-EGFP)在肿瘤细胞内表达和复制的影响。方法:肿瘤细胞经不同浓度的CoCl2处理后,Western印迹法检测缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达;倒置荧光显微镜、FCM法及空斑形成实验等观察经CoCl2处理后,感染条件复制型腺病毒和(或)复制缺陷型腺病毒的肿瘤细胞中外源基因的表达水平和病毒复制情况;小动物成像仪观察缺氧调控的条件复制型腺病毒在肿瘤内提高复制缺陷型腺病毒表达的效率。结果:适当浓度的CoCl2(0.4和0.08μg/mL)能使胃癌细胞株(SGC7901)中HIF-1α蛋白稳定表达并积聚,可较好地模拟缺氧状态;在0.4μg/mLCoCl2作用下,Ad-5HRE-E1AE1B-RFP对肿瘤细胞的感染效率明显提高,表现为外源基因RFP阳性表达的百分率和荧光强度均明显提高,但空斑形成实验显示Ad-5HRE-E1AE1B-RFP并没有复制。0.4μg/mLCoCl2也能提高其他非缺氧调控的复制缺陷型腺病毒如Ad-EGFP、Ad-Luc的感染效率和表达水平;Ad-5HRE-E1AE1B-RFP与复制缺陷型腺病毒Ad-Luc联合注射裸鼠肿瘤能显著提高Ad-Luc的表达。结论:CoCl2能明显提高腺病毒的基因表达水平,其作用机制不仅与CoCl2诱导缺氧有关,也可能与影响基因转录有关。
- 刘新建季迅达田毓华陈霞芳谢匡成吴继红张圣海徐萍李川源黄倩
- 关键词：胃肿瘤腺病毒感染基因表达调控肿瘤缺氧诱导因子1二氯化钴
- 逆转录病毒及睫状神经营养因子联合诱导成人视网膜色素上皮细胞转分化成为神经细胞被引量：1
- 2006年
- 目的观察逆转录病毒及睫状神经营养因子(CNTF)诱导的成人视网膜色素上皮(RPE)细胞转分化过程中的形态特征与标志物变化。方法成人RPE细胞经携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的逆转录病毒感染后,进一步用脂质体介导CNTF表达质粒进行转染。倒置荧光显微镜观察细胞形态变化,酶联免疫吸附实验、免疫组织化学染色及Westernblotting方法检测细胞产生和分泌CNTF的能力、CNTF受体(CNTFR)、多种神经细胞标志物及信号传导分子一类蛋白酪氨酸激酶(JAK)的表达水平。结果体外培养的成人RPE细胞经GFP逆转录病毒感染后,RPE细胞的形态无明显变化,但开始表达神经元和胶质细胞的某些标志物,如神经丝蛋白(NF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP);经CNTF表达质粒转染后,持续高水平表达CNTF的RPE细胞出现明显的神经细胞分化,CNTFR的表达量虽无明显变化,但其分布发生改变,主要分布在细胞膜上;此外,信号传导分子JAK表达明显上调。结论体外培养的成人RPE细胞在逆转录病毒及CNTF的影响下可出现明显的神经细胞形态分化,转分化与CNTF-CNTFR-JAK信号传导通路有关。
- 李惠明吴继红徐萍黄倩
- 关键词：色素上皮睫状神经营养因子
- 大鼠视网膜神经节细胞发育分化及免疫组织化学染色特征
- 2006年
- 吴继红易苗英黄倩
- 关键词：免疫组织化学
- 孤立性脑转移瘤:动态增强MR表现与VEGF表达对照研究被引量：6
- 2004年
- 目的 探讨应用动态增强磁共振成像 (DCE MRI)评价的孤立性脑转移瘤血管通透性与血管内皮生长因子(VEGF)表达的空间分布相关性。方法 2 4例孤立性脑转移患者于术前行DCE MRI检查 ,分析肿瘤不同区域强化斜率 ,测定标本VEGF表达。结果 肿瘤强化呈环形 16例 ,结节状 4例 ,靶心样 4例。在环形强化中 ,肿瘤边缘呈高通透性 ,边缘VEGF高表达 12例 ;在结节状和靶心样强化中 ,边缘与中心区均表现为高通透性 ,边缘VEGF高表达为 6例 ,中心区高表达为 5例。VEGF表达与DCE MRI强化斜率间具有显著的相关性 (P <0 .0 1)。结论 DCE
- 赵京龙张贵祥胡运胜吴继红李玉洁周根泉张悦萍缪竟陶
- 关键词：磁共振成像血管内皮生长因子肿瘤转移
- 早期移植性肿瘤生长与新生血管形成过程观察及机理研究
- 黄倩王丰李川源徐萍田毓华李凌吴继红武文森胡宏惠陈霞芳谢匡成易苗英刘文文王晓莉
- 该课题采用GFP表达质粒或GFP逆转录病毒介导GFP基因转移，建立了多种能持续、稳定表达GFP的肿瘤细胞株。建立了新的，以GFP基因标记的膀胱和视网膜原位肿瘤动物模型，观察到了接近自然状态下的肿瘤生长方式、转移途径和部位...
- 关键词：
- 关键词：肿瘤新生血管VEGF
- 电穿孔介导质粒DNA肿瘤内转移抑制恶性肿瘤生长与转移被引量：14
- 2002年
- 利用携带绿色荧光蛋白 (greenfluorescentprotein ,GFP)编码基因的表达质粒 ,测试电穿孔方法介导目的基因活体组织内转移的效率并优化电击参数 .在此基础上采用电穿孔技术直接将编码白介素 12 (IL 12 )、白介素 2 (IL 2 )、粒单细胞克隆刺激因子 (GM CSF)等免疫调节因子或反义血管内皮细胞生长因子 12 1(VEGF12 1)、可溶性血管内皮细胞膜受体 (sFlk 1及ExTek)等血管生成抑制因子表达质粒转移至肿瘤局部 .实验结果表明电穿孔介导GFP表达质粒肌肉内转移的效率较高 ,GFP可在肌细胞内持续高水平表达 3周以上 ,而在肿瘤细胞内只能表达 4～ 6d ,但高电压短脉冲电击组肿瘤内GFP阳性细胞数比低电压长脉冲组高 2 6 8倍 .多次电击介导IL 12表达质粒转移至肿瘤组织内 ,可有效地抑制小鼠膀胱癌BTT gfp、人乳腺癌MCF 7及肝癌SMMC 772 1 gfp的生长 .MCF 7对血管生成抑制因子基因转移治疗较敏感 ,单独应用反义VEGF12 1、sFlk 1或ExTek即显示明确的治疗效果 .SMMC 772 1 gfp单独应用sFlk 1有效 .小鼠膀胱癌对单独应用反义VEGF12 1、sFlk 1或ExTek治疗效果不理想 ,但联合应用sFlk 1和ExTek仍然可以有效地抑制肿瘤生长与转移 ,甚至使肿瘤缩小或消失 .提示电穿孔技术是一项高效、安全。
- 王丰陈霞芳田毓华吴继红李凌李川源黄倩
- 关键词：电穿孔质粒DNA恶性肿瘤生长免疫调节血管生成肿瘤转移
- 人肝癌细胞中缺氧反应元件对微环境的反应被引量：1
- 2008年
- 目的:通过观察缺氧反应元件(hypoxia-response element,HRE)调控下,绿色荧光蛋白质(green fluorescent protein,GFP)构建的肝癌细胞Bel-7402/5HRE-EGFP在缺氧条件下,缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等表达水平的变化,研究HRE对微环境的反应特性。方法:以5个串连的HRE和巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)的微小启动子为转录调控元件、GFP为报告基因构建表达载体,应用FCM和细胞免疫染色法观察缺氧、一氧化氮、过氧化物和酸性pH等微环境的变化对人肝癌细胞Bel-7402中HRE活性的影响,以及缺氧条件下HIF-1α、VEGF表达水平的变化。观察缺氧探针哌莫硝唑的染色强度和分布与HIF-1α、VEGF和GFP表达强度和分布之间的关系,探求裸鼠体内肿瘤组织缺氧对HRE活性及其相关基因表达的影响。结果:肝癌细胞中HRE对缺氧非常敏感,肿瘤细胞和组织缺氧时可上调HIF-1α和VEGF的表达,两者的分布也基本一致。结论:缺氧在调控肝癌血管生成因子表达方面可能起着重要的作用。
- 王丰陈霞芳韦芳吴继红谢匡成田毓华易苗英李川源黄倩
- 关键词：缺氧缺氧诱导因子1缺氧反应元件绿色荧光蛋白质类
