张晨
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 供职机构：北京生物制品研究所更多>>
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- 抗脊髓灰质炎病毒Ⅰ型D抗原单克隆抗体的制备及其初步应用被引量：2
- 2012年
- 目的制备脊髓灰质炎病毒(Poliovirus)Ⅰ型D抗原单克隆抗体,并建立双抗体夹心ELISA检测方法。方法采用Vero细胞培养脊髓灰质炎病毒Ⅰ型,柱层析纯化病毒抗原,SDS-PAGE鉴定病毒蛋白,HPLC分析抗原纯度,Western blot分析抗原的反应原性。以纯化的脊髓灰质炎病毒Ⅰ型D抗原免疫BALB/c小鼠,进行细胞融合,筛选可分泌脊髓灰质炎病毒I型D抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株。单克隆抗体经纯化后,采用间接ELISA法检测小鼠腹水抗体效价、单抗的特异性及相对亲和力。分别以纯化的单抗作为捕获抗体和酶标抗体,进行配对试验,建立用于脊髓灰质炎病毒Ⅰ型D抗原检测的双抗体夹心ELISA方法,确定方法的最佳线性范围,并验证方法的特异性。结果纯化的脊髓灰质炎病毒Ⅰ型D抗原经SDS-PAGE分析,共显示4条蛋白条带,相对分子质量分别为约40 000、35 000、32 000和28 000;经HLPC分析,纯度达99%;小鼠免疫血清可与相对分子质量约为35 000的VP1蛋白发生特异性反应。共筛选出5株可稳定分泌脊髓灰质炎病毒I型D抗原单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株,纯化的单抗仅与D抗原发生反应;2H1和3B5株单抗的效价分别为2×107和2×106,且亲和力高于其他3株单抗。采用2H1和3B5株单抗配对,可以特异性检测D抗原,而与C抗原不反应;D抗原最佳线性范围为4.300～0.071 DU/ml,R2为0.994 6。该法仅可检出脊髓灰质炎病毒Ⅰ型D抗原,而与脊髓灰质炎病毒Ⅱ型、Ⅲ型D抗原和脊髓灰质炎病毒Ⅰ型C抗原、EV71抗原、Vero细胞培养上清不发生交叉反应。结论制备了脊髓灰质炎病毒Ⅰ型D抗原单克隆抗体,建立了可用于脊髓灰质炎病毒Ⅰ型D抗原特异性检测的双抗体夹心ELISA方法。
- 张中洋郭会杰赵敏杨永娟郝春生李懿马淑花刘宇宁海京张晨陈明田龙李秀玲
- 关键词：脊髓灰质炎病毒D抗原C抗原抗体单克隆酶联免疫吸附测定
- 新的水痘病毒毒株、水痘减毒活疫苗及其制备方法
- 本发明的目的在于提供一种可用于水痘疫苗生产的新的水痘-带状疱疹病毒，使用该病毒制备水痘疫苗以及用该病毒制备水痘疫苗的方法。该新的水痘-带状疱疹病毒株的保藏编号为CGMCC No.1618。
- 李秀玲王桂秋王用楫章以浩项金忠许丽锋彭佩霞庞成华谢云张晨刘立新
- 文献传递
- 肠病毒71型(EV71)分离株的鉴定及免疫原性研究
- 本研究首先对采用Vero细胞从EV71感染流行地区患者体内分离到的病毒进行鉴定，电镜下可观察到直径约为20-30nm的圆形病毒颗粒，呈典型的肠道病毒形态;采用特异性EV71单抗进行间接免疫荧光试验检测，其可与EV71特异...
- 李秀玲张中洋王潇潇杨永娟郝春生赵敏何薇薇张晨沈心亮
- 关键词：免疫原性间接免疫荧光试验基因序列测定
- 文献传递
- 新的水痘病毒毒株、水痘减毒活疫苗及其制备方法
- 本发明的目的在于提供一种可用于水痘疫苗生产的新的水痘－带状疱疹病毒，使用该病毒制备水痘疫苗以及用该病毒制备水痘疫苗的方法。该新的水痘－带状疱疹病毒株的保藏编号为CGMCC No.1618。
- 李秀玲王桂秋王用楫章以浩项金忠许丽锋彭佩霞庞成华谢云张晨刘立新
- 文献传递
- 肠病毒71型(EV71)空斑测定方法的建立
- 目的：建立EV71空斑测定方法，为EV71病毒生物学研究提供手段。
方法：将不同稀释度的EV71病毒株分别接种至RD细胞或Vero细胞单层，然后加甲基纤维素覆盖。计算空斑滴度。通过三次连续检测观察空斑法的稳定性...
- 郝春生赵敏张晨何薇薇王潇潇杨永娟张中洋沈心亮李秀玲
- 关键词：肠道病毒病毒感染免疫学检验
- 文献传递
