杨健
- 作品数:20 被引量:86H指数:6
- 供职机构:贵州医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金贵州省科技计划项目贵州省优秀青年科技人才计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 一种应用于大鼠肝组织的取样装置
- 本实用新型公开了一种应用于大鼠肝组织的取样装置,包括套筒,所述套筒的竖直方向上贯穿设有与其滑动连接的穿刺针,所述套筒上套接有限位装置,所述穿刺针上套接有与其固定连接的滑块,所述滑块与套筒的内侧壁滑动连接,所述套筒的一侧设...
- 刘亭刘香香杨健李勇军王永林
- 文献传递
- 抗EGFRvⅢ单链抗体间接ELISA方法的建立及条件优化被引量:3
- 2017年
- [目的]以合成抗原EGFRvⅢ-BSA作为被检测物,建立检测抗EGFRvⅢ单链抗体的间接ELISA检测方法并优化其反应条件。[方法]利用N-马来酰亚胺甲基环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯(SMCC)将EGFRvⅢ与BSA偶联制备抗原。利用方阵滴定法对间接ELISA法的抗原包被浓度,单链抗体的稀释度、包被时间和温度、包被液、抗His-tag多抗稀释度和酶标抗体的稀释度进行优化,并对建立的间接ELISA方法的方法学进行验证。[结果]通过SDS-PAGE电泳和全波长紫外扫面显示EGFRvⅢ-BSA合成成功。用PBS于37℃包被1.25μg/m L的EGFRvⅢ-BSA 2 h,加入19.044μg/L的ChiMR1、1∶8 000的兔抗His-tag多抗和1∶10 000酶标抗体可获得最佳ELISA检测结果。应用优化后的条件检测4.761~152.35μg/L范围内的ChiMR1显示线性良好。线性方程为y=(A-D)/[1+(x/C)^B]+D(A:1.99706;B:-1.09760;C:35.54885;D:0.01558),R2=0.99923;60μg/L和20μg/L的质控品的检测精密度分别为7.142%和4.828%;准确度分别为91.8%和82.90%,准确度和精密度良好。[结论]建立的间接ELISA方法的线性、准确度和精密度良好,为临床疾病的检测奠定良好基础。
- 杨友辉杨健宋菲薛维娜孙佳王爱民兰燕宇刘亭
- 关键词:ELISABSA
- 乳没活络散微生物限度检查方法适用性研究被引量:1
- 2018年
- 目的:建立乳没活络散微生物限度的检查方法。方法:按《中国药典》2015年版四部通则微生物限度检查方法,采用平皿法对乳没活络散的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉进行回收率测定,常规检测方法对制剂控制菌进行试验。结果:通过平皿法和常规检测方法,乳没活络散试验菌种的回收率均达到70%以上,且都可以检测出控制菌,符合验证要求。结论:平皿法和常规检测方法可以用于乳没活络散的微生物限度检查。
- 陆定艳杨健宋菲宋菲王永林李勇军王永林王爱民
- 关键词:微生物限度平皿法
- 一种取样洁净的川贝母组织取样装置
- 本实用新型公开了一种取样洁净的川贝母组织取样装置,包括底座,所述底座上焊接有侧板,所述侧板上焊接有支架,所述支架上使用螺栓安装有伺服电机,所述伺服电机的输出轴焊接有第一连杆,所述第一连杆使用销轴转动连接有第二连杆,所述第...
- 刘亭李靖杨健李勇军王永林
- 文献传递
- 一种适用于生化实验的可调式支架装置
- 本实用新型公开了一种适用于生化实验的可调式支架装置,包括底座,所述底座的顶壁上开设有左右连通的通槽,所述底座的前后侧壁上均开设有矩形滑槽,所述通槽的内壁中央固定连接有竖直的挡板,位于所述挡板两侧的矩形滑槽内均滑动连接有滑...
- 刘亭宋菲杨健李勇军王永林
- 文献传递
- 实时荧光定量PCR法鉴别川贝母掺伪被引量:16
- 2020年
- 目的 建立实时荧光定量PCR法检测川贝母样品中掺伪程度.方法 利用川贝母ITS1区序列的特点,设计4条用于特异性鉴别川贝母的正向引物1~4.同时,设计相应的反向引物,配合正向引物组成引物对,进行实时荧光定量PCR扩增.利用川贝母、浙贝母、平贝母、伊贝母和湖北贝母对照品以及市售川贝母样品,通过PCR扩增来考察引物对1~4鉴别川贝母的准确性.通过实时荧光定量PCR法,考察引物检测川贝母掺伪程度的准确性.结果 引物对1~4可以准确检测川贝母的真伪;通过荧光定量PCR法,可准确检测出川贝母样品中的伪品的掺伪程度.结论 该方法简便、快捷、准确,可用于川贝母样品中掺伪程度的定量鉴别.
- 杨健李靖李靖王爱民何彬王爱民何彬王永林李勇军
- 关键词:川贝母掺伪荧光定量PCR
- 灯盏细辛和赤芍配伍组方对小鼠部分肝细胞色素P450亚型活性的影响及其机制分析被引量:4
- 2018年
- 目的:探讨灯盏细辛和赤芍配伍组方(辛芍组方)对小鼠细胞色素P450酶(CYP450s)主要亚型CYP1a2,CYP2d22,CYP2e1和CYP3a11代谢活性的影响以及相关机制。方法:小鼠分为5组,分别为正常组、苯巴比妥组(70 mg·kg-1)和辛芍组方低、中、高剂量组(0.31,0.62,1.25 g·kg-1)。给药结束后,取各组小鼠肝脏制备微粒体,考察CYP1a2,CYP2d22,CYP2e1和CYP3a11的代谢活性;并提取肝组织总RNA和蛋白,实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)考察辛芍组方对CYP1a2,CYP2d22,CYP2e1,CYP3a11和孕烷X受体(PXR)mRNA及蛋白表达的影响;利用报告基因法考察辛芍组方对PXR的激活作用。结果:与正常组比较,辛芍组方可诱导CYP3a11酶活性,上调CYP3a11,PXR mRNA和蛋白水平,并具有PXR激活作用(P〈0.05,P〈0.01);与模型组比较,辛芍中、高剂量组方能抑制CYP1a2酶活性(P〈0.05),但对CYP1a2的mRNA水平和蛋白水平无明显影响;而辛芍组方对CYP2e1,CYP2d22的酶活性,mRNA水平和蛋白水平无明显影响。结论:辛芍组方具有CYP3a11活性诱导作用,该作用很可能与辛芍组方上调PXR表达并激活PXR从而促进CYP3a11表达有关;而其CYP1a2活性抑制作用机制与CYP1a2的表达调控无关,需要进一步研究。
- 刘亭刘香香陆定艳杨健吴琼王永林李勇军
- 关键词:细胞色素P450孕烷X受体
- 一种用于生化实验的防滚动移液工具
- 本实用新型公开了一种用于生化实验的防滚动移液工具,包括外壳和胶头滴管,所述胶头滴管由胶头和吸管组成,所述外壳内设有安装腔,所述外壳的下方开设有与安装腔连通的插口,所述吸管固定安装在插口内,所述胶头位于安装腔内,所述外壳的...
- 刘亭杨健宋菲李勇军王永林
- 文献传递
- 骨康胶囊对SaOS-2人成骨样细胞增殖、分化及矿化的影响被引量:6
- 2018年
- 目的:研究骨康胶囊对体外培养的SaOS-2成骨肉瘤细胞增殖、分化及矿化的影响。方法:培养成骨肉瘤细胞SaOS-2,设立对照组、不同浓度的骨康胶囊组(生药浓度为1、10、100、200、400、800 mg/L)及维生素D3组,采用MTT法检测SaOS-2细胞增殖能力;选择10、100及200 mg/L骨康胶囊浓度处理SaOS-2细胞,对-硝基苯磷酸盐法(PNPP法)检测SaOS-2细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,ELISA法检测SaOS-2细胞骨钙素(OTC)和钙离子(Ca^(2+))分泌能力,采用细胞钙茜素红染色法对成骨细胞进行染色、观察SaOS-2细胞矿化能力。结果:与对照组相比,骨康胶囊在体外可以显著促进成骨肉瘤细胞的增殖(P<0.01),当骨康胶囊浓度为200 mg/L时作用最大,此后随着骨康胶囊浓度增大对SaOS-2细胞增殖的促进作用有明显减弱的趋势;在10、100、200 mg/L浓度范围内,骨康胶囊剂量依赖性地增加SaOS-2细胞ALP活性、促进OTC和Ca^(2+)的分泌及细胞矿化结节形成(P<0.05或P<0.01)。结论:骨康胶囊对体外培养的SaOS-2细胞的增殖、分化和矿化有明显的促进作用。
- 杨健陆定艳彭潇董莉董莉李勇军李勇军席晓岚
- 关键词:骨康胶囊成骨肉瘤细胞增殖分化矿化
- 后路经椎弓根钉棒系统内固定治疗上颈椎损伤的回顾性分析
- 目的:探讨后路经椎弓根钉棒系统内固定治疗上颈椎损伤的手术方法、生物力学性、解剖结构的可行性及临床疗效。 方法:根据统计,我院2009年09月~2013年01月共收治有手术适应症的上颈椎损伤患者16例,其中有7例出现神经...
- 杨健
- 关键词:上颈椎损伤手术方法临床疗效