张洁钰
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
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- SD大鼠超排及TALEN质粒显微注射构建基因敲除大鼠被引量：4
- 2013年
- 目的 应用TALEN技术构建基因敲除大鼠,并探讨SD大鼠超数排卵、显微注射浓度、胚胎移植方式对构建大鼠出生率、阳性率的影响.方法 将SD雌鼠超数排卵后,取受精卵显微注射由TALEN质粒体外转录成的mRNA,注射后存活的受精卵输卵管移植,观察大鼠的出生率,并测序判定出生大鼠的基因敲除阳性率.结果 4～5周和5～6周的雌鼠超数排卵见栓率[（74±9）％vs（77±6％）％]、取卵数量[（25±2）枚vs （23±2）枚]以及卵的受精率[（85±2）％vs（93±2）％]差异均无统计学意义（P＞0.05）;结扎公鼠和受体雌鼠在8～10周时见栓率最高[（23.02±5.26％）％],使用12周后见栓率明显下降[（11.66±2.40）％];单侧和双侧输卵管移植大鼠出生率差异无统计学意义（37.88％ vs 36.49％）,但单侧移植大鼠存活率高于双侧移植（37.88％ vs 20.27％,P＜0.05）,且单细胞移植大鼠出生率显著高于双细胞移植.质粒注射浓度在20 ng/μl组大鼠基因敲除阳性率最高（7.5％）.结论 应用TALEN技术成功构建基因敲除大鼠,显微注射质粒浓度20 ng/μl时大鼠出生率不受影响且基因敲除阳性率最高.
- 卞洲艳杨政徐蔓张洁钰张洁钰廖海含
- 关键词：SPRAGUE-DAWLEY大鼠TALEN显微注射
- 病毒性心肌炎造模及细胞自噬在病毒性心肌炎中的表达
- 张洁钰
- 关键词：柯萨奇病毒B3病毒性心肌炎细胞自噬
- 一种转录激活子样效应因子核酸酶的内源活性检测方法
- 本发明公开了一种转录激活子样效应因子核酸酶的内源活性检测方法。该检测方法包括如下步骤：针对所研究目的基因的外显子序列设计靶位点，构建TALEN质粒对；将TALEN质粒对显微注射至受精卵的原核或将TALEN质粒对体外转录为...
- 唐其柱卞洲艳邓伟周恒杨政徐蔓张洁钰廖海含
- 文献传递
- SD大鼠胚胎体外培养及TALEN质粒内源活性检测的研究
- 2013年
- 目的建立Sprague-Dawley（SD）大鼠1-细胞胚胎体外培养体系，并用于TALEN质粒内源活性检测。方法超排4～6周龄雌鼠，取0．5dpc雌鼠受精卵。将构建的TALEN质粒体外转录为mRNA后显微注射于受精卵胞质中，将注射成功的受精卵培养于mR2ECM培养液中。巢式PCR扩增目的基因，送测序检测TALEN质粒的敲除效率。结果取出的1-细胞胚胎在mR2ECM培养液中最大程度能发育到8-细胞胚胎；培养液的pH值影响了胚胎的发育程度，过滤前pa值7．18±0．12的培养液，胚胎8细胞发育率较高。本研究送检三批显微注射后体外培养的胚胎，检测结果表明胚胎发育至4细胞以上时，mRNA已经能够充分表达和发挥敲除作用，TALEN质粒的敲除效率为（9．3±2．8）％。结论建立SD大鼠1-细胞胚胎体外培养的体系，且将其成功应用于TALEN质粒内源活性检测。
- 卞洲艳杨政徐蔓张洁钰张洁钰廖海含
- 关键词：SPRAGUE-DAWLEYTALEN显微注射
