朱霞
- 作品数：10 被引量：20H指数：3
- 供职机构：北京大学第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢性特发性血小板减少性紫癜相关T细胞克隆的T细胞受体特征被引量：11
- 2005年
- 目的研究与特发性血小板减少性紫癜(ITP)发病相关的反应性T细胞克隆的T细胞受体β链可变区(TCRBV)基因特征.方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增25例ITP患者和20名正常人外周血以及20例脐带血的TCRBV 24个家族的基因序列,在长泳道测序胶上电泳,形成TCRBV互补决定区3(CDR3)基因表达谱型图.通过谱型图上电泳条带分析TCRBV基因分布特征,切割代表性条带测序.结合临床特点进行分析.结果 (1)急性ITP(aITP)和慢性ITP(cITP)的TCRBV CDR3基因表达谱型图有明显不同,15例aITP浓集条带与正常对照组相比,差异无统计学意义(P=0.179).10例cITP则都出现以一些浓集条带为代表的寡克隆T细胞增生,浓集条带明显多于正常对照组(P<0.05).其中6例cITP在TCRBV8亚家族分别出现1～2条浓集条带,共8条浓集条带,3例cITP在TCRBV 13.1亚家族各出现1条浓集条带,4例cITP在TCRBV 14亚家族出现5条浓集条带,3例cITP在TCRBV 17亚家族出现4条浓集条带.将这20个浓集条带直接测序,有19个条带测序为单克隆T细胞扩增,1条BV14条带测序呈多克隆性.(2)比较10例cITP患者T细胞克隆的TCRBV基因或者编码CDR3的氨基酸,其中2例患者的TCRBV8全部基因序列相同,另有3例患者的TCRBV 13.1全部基因序列相同.4例cITP患者中有2例的T细胞克隆TCRBV17的CDR3完全一致,全部序列仅仅框架区4有3个氨基酸不同,另有2例的T细胞克隆的TCR BV 17的CDR3序列仅有4个氨基酸不同,表明不同cITP患者有同样或者功能类似的TCRBV基因编码的T细胞克隆增殖.不同患者分属不同TCRBV基因家族的19个T细胞克隆的CDR3区共用3种模体,有7个T细胞克隆的TCRBV CDR3 共用模体 E(D)TQYFGPG;4个T细胞克隆的TCRBV CDR3共用模体 N(K)EQFFGPG;4个TCRBV17的T细胞克隆中有3个T细胞克隆的 TCRBV17 CDR3共用模体 GANVLTFGAG.结论 cITP发病与特定的T细胞寡克隆扩增有关,这些T细胞克隆的 CDR3共享3种可能结合同样抗原的模体.a
- 朱霞朱平郭晓玲
- 用TCRβ链可变区谱型图分析疾病中T淋巴细胞克隆的变化被引量：4
- 2005年
- T细胞是通过T细胞受体(Tcellreceptor,TCR)识别抗原,根据基因重排所产生的TCRβ链可变区(BV)基因可以将T细胞克隆分为24个基因家族。利用T细胞表面的TCRBV片段的不同可以建立TCRBV基因谱型图,分析并识别具有不同功能的T细胞克隆,了解各种T细胞克隆在恶性疾病及自身免疫性疾病中的功能和增殖情况。体外扩增具有特异性抗肿瘤活性的T细胞,再将其输给患者,有可能发展为肿瘤免疫治疗的新方法。通过对TCRBV的基因特征分析,可以发展抗TCR的单克隆抗体或者DNA疫苗抑制自身免疫病相关性或者肿瘤性T细胞生长,以治疗这些难治性疾病。TCR转基因技术还能使普通T细胞修饰成抗肿瘤T细胞。本文就T细胞受体特征、TCRBV基因谱型分析方法、TCRBV片段与自身免疫性疾病、血液病中增殖的T细胞克隆,识别肿瘤抗原肽的T细胞的寡克隆增生和TCRBV谱型分析与骨髓移植作一概述。
- 朱霞郭晓玲朱平
- 关键词：T细胞受体免疫治疗
- 抗磷脂综合征识别相关抗原的T细胞克隆受体分析被引量：2
- 2006年
- 为了了解识别抗磷脂综合征相关抗原的T细胞受体特征,用基因谱型图的方法分析一例抗磷脂综合征患者体内的T细胞特征。结果发现优势T细胞呈寡克隆性增生;进一步分析2群主要T细胞克隆的T细胞受体(TCR)基因特征表明,其TCRβ链基因主要由TCRβV8和TCRβV23家族基因编码,T细胞接触抗原的TCRβVCDR3区氨基酸序列分别是CASSLLVAGGPRAYNEQFFGPG和CASSLAGFGQPQHFGDG,其CDR3区模体YNEQFF-GPG和QHFGDG与报道的特发性血小板减少性紫癜和系统性红斑狼疮高度一致。结论这些自身免疫病增殖的T细胞克隆可能识别同样的抗原。
- 欧媛朱平朱霞顾江英刘静杜金伟张英刘红星庄昕
- 关键词：抗磷脂综合征T细胞受体
- 应用家族特异性抗原九肽获得具有抗淋巴瘤功能的特异性CTLs细胞
- 目的:B细胞淋巴瘤是B淋巴细胞恶性克隆性扩张所致,其表面的免疫球蛋白(Ig)的可变区也被称为独特型(idiotype),是淋巴瘤的肿瘤特异性抗原。这些独特型分子上的抗原决定簇(T细胞表位epitope)可以作为CTL介导...
- 郭晓玲刘英刘静朱霞朱平
- 文献传递
- 慢性血小板减少性紫癜发病相关的T细胞克隆特征
- 目的通过比较特发性血小板减少性紫癜患者(ITP)T细胞受体β(TCR β)CDR3基因表达谱型的变化,寻找与发病有关的T淋巴细胞克隆。方法选择25例特发性血小板减少性紫癜(慢性10例急性15例),应用RT-PCR扩增AP...
- 朱霞欧元郭晓玲朱平
- 关键词：T细胞受体TCRΒ
- 文献传递
- 淋巴瘤相关抗原肽刺激所获细胞毒性T细胞克隆的特征被引量：3
- 2005年
- 目的研究抗肿瘤细胞毒性T淋巴细胞(CTL)克隆识别靶细胞的肽特异性和人类白细胞抗原(HLA)限制性,以及其赖以识别抗原肽的T细胞受体(TCR)基因表达序列的分子特征。方法利用体外CTL刺激扩增体系,应用免疫球蛋白重链可变区(IgHV)框架区上的B淋巴瘤相关抗原九肽(IgHV1QLVQSGAEV和IgHV3SLYLQMNSL)负荷的抗原递呈细胞(APC),刺激正常HLAA0201供者的外周血单个核细胞(PBMC),每周1次共4次,用流式细胞仪检测体外培养细胞的免疫表型的变化,并用肽/主要组织相容性基因复合体(MHC)四聚体方法检测肽特异性的CTL增殖情况。应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测CTL与不同的靶细胞共同孵育时释放干扰素γ(IFNγ)的能力。应用逆转录多聚酶链反应(RTPCR)和T细胞受体(TCR)基因指纹谱型图方法检测培养前后的淋巴细胞的克隆变化,并用直接测序的方法得到CTL克隆的TCR基因序列。结果B淋巴瘤相关抗原肽4次刺激体外培养的PBMC后CD8+CTL大量增殖,CD4/CD8明显下降(0.10vs1.43,P<0.05)。IgHV1QLVQSGAEV/HLAA0201四聚体和CD8双阳性的肽特异性CTL数量(49.38%)比刺激前(0.04%)明显上升。ELISA检测IFNγ的分泌表明其识别靶细胞是肽特异性和HLA限制性的。TCR基因指纹谱型图显示抗原肽反复刺激获得的CTL的TCR表达集中于个别基因家族,呈克隆性增殖。结论应用IgHV基因框架区来源的B淋巴瘤相关抗原九肽可以使特异性CTL克隆增殖,这些克隆以肽特异性和HLA限制性的方式识别靶细胞。了解这些CTL的作用和TCR识别相关抗原肽的分子结构,将有助于确定体内T细胞和B细胞相互调节的机制。
- 郭晓玲朱平朱霞刘静欧媛杜金伟
- 关键词：抗原肽T细胞克隆免疫球蛋白重链可变区逆转录-多聚酶链反应主要组织相容性
- 慢性血小板减少性紫癜相关T细胞克隆的T细胞受体特征
- ＜正＞目的通过分析特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者T细胞受体β链可变区（TCRBV）互补决定区3（CDR3）基因表达谱型的变化,寻找与发病有关的T淋巴细胞克隆。方法应用RT- PCR扩增25例ITP患者和20例正常人...
- 朱霞朱平郭晓玲
- 文献传递
- 应用免疫球蛋白重链可变区上框架区来源的抗原九肽获得的细胞毒T细胞功能分析被引量：1
- 2005年
- 目的明确在B淋巴细胞肿瘤表面的免疫球蛋白重链可变区(IgHV)的框架区(FR)上是否存在可以激发细胞毒T淋巴细胞(CTL)的抗原表位,这些来源于FR的抗原肽是否能够激发家族特异性的免疫反应,探讨按照B淋巴细胞肿瘤的IgHV基因分型进行家族性的免疫治疗的可能性。方法利用生物信息学系统预测了40例B淋巴细胞肿瘤表面的免疫球蛋白序列的抗原表位,人工合成不同基因家族的抗原九肽,利用T2细胞结合实验检测预测的抗原肽和HLA分子的亲合力。利用体外CTL刺激扩增体系,诱导特异性的CTL细胞增殖,用肽/HLA四聚体检测特异性CTL的数目,应用LDH释放实验检测CTL的细胞毒活性并验证其家族特异性。结果在B淋巴细胞肿瘤的7个IgHV基因家族中找到了12个高亲和力的抗原九肽,其中10个(83%)位于FR,以HLA-A*0201正常供者的外周血单个核细胞(PBMNC)负荷该九肽作为抗原呈递细胞去刺激自身PBMNC,经过4轮刺激,CD8和肽/HLA四聚体双阳性细胞从0.38%上升到49.38%。LDH释放实验证明对HLA-A*0201(+)、IgHV1(+)靶细胞有明显的杀伤作用,并且被IgHV1肽刺激出的CTL不能识别负荷IgHV3肽的靶细胞。结论IgHV基因FR抗原九肽可以刺激产生具有HLA限制性的并且肽特异性的CTL,同时这样的杀伤作用具有家族特异性,以此为靶位有望对B淋巴细胞肿瘤进行家族特异性的免疫治疗。
- 郭晓玲朱平刘英刘静朱霞
- 关键词：免疫球蛋白重链可变区细胞毒T细胞淋巴瘤细胞
- 用TCR基因指纹图发现抗磷脂综合征患者优势T细胞克隆
- ＜正＞抗磷脂综合征（antiphospholipid syndrome,APS）是由抗磷脂抗体（aPL）引起并表现为反复动静脉血栓、习惯性流产和血小板减少的一组临床征象的总称。抗磷脂抗体是针对自身抗原产生的一组异质性抗体...
- 欧媛朱平张英顾江英郭晓玲朱霞
- 文献传递
- 慢性血小板减少性紫癜发病相关的T细胞克隆特征
- 特发性血小板减少性紫癜(idiopathicthrombocytopenicpurpura,ITP),是一种临床常见的出血性疾病.是因为大量血小板被自身单核巨噬系统吞噬而引起机体血小板减少的一种自身免疫性疾病,主要原因是...
- 朱霞朱平郭晓玲
- 关键词：血小板减少性紫癜T细胞克隆自身免疫性疾病免疫病理TH1细胞
- 文献传递
