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王浩
作品数:
3
被引量:4
H指数:1
供职机构:
中国医学科学院基础医学研究所
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
何维
中国医学科学院基础医学研究所
崔莲仙
中国医学科学院基础医学研究所
马驰
中国医学科学院基础医学研究所
巴德年
中国医学科学院基础医学研究所
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2011
2篇
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利用两种真核昆虫表达系统表达可溶性甲型H1N1血凝素蛋白
被引量:4
2011年
目的利用两种昆虫杆状病毒表达系统表达甲型H1N1血凝素(haemegglutinin,HA)蛋白,进而获得具有生物学活性的目的蛋白。方法选取中国内地第1例2009甲型H1N1确诊病例病毒株A/Sichuan/1/2009(H1N1),人工合成完整HA基因序列;分别利用杆状病毒表达系统BaculoGoldsystem和Bac—to-Bacsystem,在昆虫细胞中表达日的基因HA;经亲和层析纯化及Westernblot搭定,红细胞血凝试验检测ttA蛋门的生物学活性。结果获得测序正确的HA基因,分别克隆到pAcGP67B(Baculo Goldsystem)和pFASTBacl(Bac-to-Bacsystem)载体,经杆状病毒同源重组后转染Sf9细胞,Westernblot鉴定硅示,BaculoGoldsystem表达HA蛋白是分泌型的,而Bac—to—Bacsystem是胞内表达且表达效果优于前者;血凝试验证实,这两种表达系统表达的HA蛋白均具有生物学活性。结论利用杆状病毒表达系统成功表达出具有生物学活性的HA蛋白,Bac—to-Bacsystem更适合表达HA蛋白,为流感病毒的相关研究提供了保障。
王浩
马驰
崔莲仙
巴德年
何维
关键词:
昆虫杆状病毒表达系统
BAC-TO-BAC
血凝试验
特异性抗甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)蛋白人源单克隆抗体的制备
王浩
马驰
崔莲仙
何维
甲型H1N1流感病毒血凝素和神经氨酸酶蛋白在真核昆虫细胞中的表达、纯化及鉴定
王浩
马驰
崔莲仙
何维
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