李彦玮
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 抗Aβ鼠源单克隆抗体的人源化改造及其表达鉴定被引量:1
- 2010年
- 目的将前期构建的抗Aβ人-鼠嵌合抗体进行可变区人源化改造,为抗Aβ抗体在临床人体中应用奠定基础。方法采用模板替换法对已构建的人-鼠嵌合抗体基因中的重、轻链可变区框架区进行人源化改造,构建抗Aβ人源化抗体的真核表达载体。用脂质体法将重、轻链共转染CHO细胞进行表达,采用ELISA法检测表达产物效价、表达量;同时用SDS-PAGE及Western blot检测表达产物分子质量;免疫组化法鉴定其生物学活性。结果重组改造后的抗Aβ人源化抗体基因重链约为1 500 bp,轻链约为750 bp,与预期一致。转染CHO细胞后获得表达,表达量为1.11 mg/L,抗体重链相对分子质量约为51 ku,轻链约为25 ku。ELISA结果显示能与Aβ特异性结合(细胞培养上清A值:2.24),与改造前的嵌合抗体比较效价基本相同。抗体人源化检测显示,只能被羊抗人抗体识别,不能被羊抗鼠抗体识别。免疫组化显示表达产物有结合Aβ抗原的活性。结论将抗Aβ人-鼠嵌合抗体进行可变区人源化改造后,基本保持了原嵌合抗体的生物学特性,为其今后应用于临床提供了可能性。
- 李彦玮常德赵雪梅梁平
- 关键词:阿尔茨海默病人源化抗体嵌合抗体Β-淀粉样蛋白
- 抗Aβ鼠源单克隆抗体的人源化改造及其表达鉴定
- 阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是一种以老年人记忆力减退和认知功能障碍为主要临床特征的中枢神经系统退行性疾病。老年斑(senile plaque,SP)、神经元纤维缠结(neurofibrilla...
- 李彦玮
- 关键词:阿尔茨海默病Β-淀粉样多肽嵌合抗体人源化抗体真核表达
- 文献传递