彭娟
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 多巴胺D_1受体Ala229Thr多态性对受体信号转导功能的影响
- 2017年
- 目的:构建表达不同基因型的人多巴胺D_1受体(DRD_1)真核细胞表达载体,明确DRD_1Ala229Thr多态性对受体信号转导功能的影响。方法:从人基因组经PCR扩增DRD_1基因编码区全长,将纯化后的PCR产物与pMD_19-T载体进行T连接,得到DRD_1229Ala(野生型)重组克隆载体。在野生型重组克隆载体的基础上,应用定点突变方法构建229Thr(突变型)重组克隆载体。用KpnⅠ和EcoR Ⅰ双酶切野生型和突变型重组克隆载体,将酶切后得到的目的片段纯化后与经相同双酶切的pc DNA3.1(+)表达载体连接,即得到野生型和突变型DRD_1-pcDNA3.1(+)重组真核细胞表达载体。将pc DNA3.1(+)空载体、野生型和突变型DRD_1-pcDNA3.1(+)重组真核细胞表达载体瞬时转染入COS-7细胞,用c AMP ELISA试剂盒分别检测forskolin和不同浓度多巴胺及(±)-SKF38393处理下细胞内基础cAMP的水平及激动剂诱导的cAMP的水平。结果:经双酶切及测序证实野生型和突变型DRD_1-pcDNA3.1(+)重组真核细胞表达载体构建正确。在forskolin处理的情况下,空载体组和阴性对照组细胞内cAMP的水平分别为(0.40±0.14)和(0.78±0.24)pmol/well,两者之间并没有显著差异(P=0.082),野生型组和突变型组细胞内c AMP的水平分别为(2.06±0.35)和(1.37±0.12)pmol/well,野生型组细胞内c AMP水平显著高于空载体组(P<0.001)和突变型组(P=0.007);在多巴胺及SKF38393处理的情况下,细胞内cAMP的水平均呈浓度依赖性升高,但突变型组细胞内的cAMP水平均显著低于野生型组(P<0.001)。多巴胺的EC_(50)值在野生型组为625 nmol/L,突变型组为9 612 nmol/L,比野生型组增加15倍;SKF38393的EC_(50)值在野生型组为421 nmol/L,突变型组为417 nmol/L,两者之间不存在明显差异。结论:本研究成功构建了野生型和突变型DRD_1-pcDNA3.1(+)重组真核细胞表达载体;DRD_1Ala229Thr多态性影响受体的激活和信号转导功能,与野生型相比,229Thr型受体信号转导功能显著降
- 彭娟黎翠林刘剑秋李智
- 关键词：多巴胺D1受体信号转导CAMP
- miR-146a G>C基因多态性与中国原发性肝癌患者遗传易感性的Meta分析被引量：2
- 2017年
- 目的:对国内外公开发表的中国原发性肝癌与miR-146a G>C(rs2910164)遗传易感性的相关文献进行Meta分析。方法:检索Pub Med数据库、Cochrane Library数据库、中国学术期刊全文数据库(CNKI)和万方数据库获得文献。检索时限为自建库至2017年3月。采用Stata 12.0软件进行Meta分析,计算各基因型的合并比值比(OR)及95%置信区间(CI)。结果:共纳入9篇病例对照研究,累计病例组3 937例,健康对照组5 025例,研究间存在中等强度的异质性。固定效应的合并OR值及95%CI在显性模型[(GG+GC)/CC]和隐性模型[GG/(GC+CC)]分别为1.26(1.12,1.41)(P=0.00)和1.23(1.12,1.34)(P=0.00),随机效应等位模型(G/C)为1.17(1.10,1.25)(P=0.00)。Meta回归分析发现显性模型样本的地域来源与合并OR值正相关。亚组分析表明,在中东人群和西部人群及采用PCR-RFLP分型时,miR-146a G>C与原发性肝癌的遗传易感性密切相关;而在西南人群和采用非PCR-RFLP(Non-PCR-RFLP)分型时无明显相关性。三个基因型的敏感性分析结果稳定,也没有发表偏倚。结论:miR-146a G>C与原发性肝癌的遗传易感性密切相关,携带G等位的个体有更高的发病风险,该位点基因多态性具有成为原发性肝癌的生物标记物的潜能。
- 李芸李兵胜张卫芳李义秀李春彭娟赖鑫朱静徐睿来熊爱珍
- 关键词：META分析原发性肝癌MIR-146A
