吴家雪
- 作品数：10 被引量：35H指数：3
- 供职机构：复旦大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省医药卫生科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- PARP15在肺腺癌中的表达及其对肺腺癌细胞生长、凋亡的影响
- 2023年
- 该文研究了PARP15过表达在肺腺癌中的临床意义及其对肺腺癌细胞生长、凋亡的影响。利用UALCAN和GEPIA数据库比对PARP15基因在肺腺癌组织和正常组织中的表达水平,利用GEPIA数据库分析PARP15基因对肺腺癌患者预后生存的影响。构建核心质粒pCDH-PARP15,通过慢病毒包装及感染的方法在人肺腺癌细胞系A549和H1299中获得PARP15过表达稳定株,用Western blot鉴定PARP15过表达情况。采用CCK-8、克隆形成实验检测过表达PARP15对A549和H1299细胞生长的影响,流式细胞仪检测PARP15对A549和H1299细胞凋亡和细胞周期的影响。PARP15基因在肺腺癌组织中的表达水平均低于正常组织(P<0.05),且PARP15基因的表达水平与肺腺癌患者的良好预后呈正相关(P=0.0036)。过表达PARP15抑制肺腺癌细胞的生长(P<0.05),并诱导细胞凋亡(P<0.05),但对细胞周期没有显著影响。PARP15可通过诱导肺腺癌细胞凋亡从而发挥抑制其生长的作用。
- 周晓敏刘唯洁吴家雪
- 关键词：肺腺癌细胞增殖细胞凋亡
- PARP1调节肝癌细胞的生长和迁移被引量：3
- 2019年
- 为了探究聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶1(PARP1)在肝细胞癌发生发展中的功能,通过免疫组化检测PARP1在肝癌组织中的表达水平;通过CRISPR/CAS9技术构建PARP1缺陷的肝癌细胞株,并采用CCK8实验、克隆形成法和细胞迁移实验来探究PARP1缺陷对肝癌细胞的影响.免疫组化结果显示PARP1在肝癌细胞中高表达,PARP1缺陷抑制肝癌细胞生长和迁移.
- 游莉芳魏莉吴家雪
- 关键词：肝细胞癌细胞迁移
- 人CARABIN蛋白过表达慢病毒载体构建及其稳定表达细胞株的筛选被引量：2
- 2016年
- 构建并鉴定人CARABIN蛋白过表达慢病毒载体,筛选CARABIN过表达的弥散性大B淋巴瘤细胞SUDHL-6的稳定细胞株。通过设计Carabin上下游引物,用同源重组的方法构建慢病毒载体pLENTI-c GFP-CARABIN,将其与psPAX2和pMD2.G包装质粒按3∶2∶1的比例用PEI Transfection Reagent共转染HEK293T细胞制备病毒,用病毒颗粒感染SU-DHL-6细胞2周后,用流式细胞仪分选GFP表达阳性的细胞,Western Blot检测CARABIN-GFP融合蛋白表达。成功构建pLENTI-c GFP-CARABIN慢病毒过表达载体。包装病毒颗粒并感染SU-DHL-6细胞后,荧光显微镜检测和流式细胞分选鉴定表达效率为26.5%,筛选出的GFP阳性细胞用Western Blot检测到CARABINGFP融合蛋白表达。成功构建了Carabin过表达慢病毒载体并筛选出了CARABIN-GFP稳定表达的细胞株。
- 刘凯玉蒋维王瑞娜吴家雪党永军
- 关键词：过表达
- 海南省花卉病害调查和病原初步鉴定被引量：24
- 2001年
- 对海南省海口、琼山、通什、儋州等市 (县 )花卉基地 4 1个品种花卉进行了病害普查 ,共查出 10 0种病害。其中 ,真菌性病害 83种 ,细菌性病害 7种 ,病毒病 9种 ,寄生性藻类病害 1种 ;其中 ,柱孢属、单孢枝霉属引致的非洲菊叶斑病 ,黑曲霉引致的富贵竹茎腐病 ,青枯假单胞细菌引致的万寿菊青枯病和凤仙花青枯病 ,寄生性头孢藻属引致的红掌藻斑病等 6种病害 ,在国内尚未见报道。在查出的病害中 ,以疫霉菌引致的非洲菊根腐病和红掌的根腐病最为严重。
- 易小平毛邦杰吴家雪刘华清
- 关键词：花卉观赏园艺病害调查病原鉴定
- 乐果对瓜蚜的毒力测定及其繁殖力的影响被引量：5
- 2003年
- 用浸渍法以40% 乐果乳油对瓜蚜(Aphisgossypii)成虫进行毒力测定和繁殖力的影响试验。结果表明:瓜蚜对乐果反应极不敏感,LC50值851.13 μg/mL;800 μg/mL、400 μg/mL的乐果溶液对瓜蚜的繁殖力有明显的抑制作用;200 μg/mL的乐果溶液对瓜蚜繁殖力的影响不明显;100 μg/mL的乐果溶液对瓜蚜的繁殖力有微弱的增殖作用。
- 程立生高宏华吴家雪陈攀
- 关键词：瓜蚜乐果毒力测定繁殖力浸渍法药效试验
- 人LC3B-β的鉴定及其对LC3B-α的负反馈调节机制
- 大鼠微管相关蛋白1轻链3(LC3)经过一系列翻译后修饰，最后定位到自噬体膜上，目前已经作为自噬体的分子标记广泛应用于自噬过程和与之相关的许多生理，病理过程的研究中。我们以前报道了3个人LC3家族的新成员，LC3A，LC3...
- 吴家雪
- 关键词：基因修饰自噬体分子标记
- 核因子蛋白90敲减对肝癌细胞增殖影响及机制的研究
- 2017年
- 目的探究核因子蛋白90(NF90)敲减对肝癌细胞增殖影响并探讨其可能机制。方法将靶向NF90的寡核苷酸链克隆至PLKO质粒后,包装出靶向敲减NF90的慢病毒shRNA(带有绿色荧光标签及G418抗性)。将肝癌细胞QGY-7703、SMMC-7721分为对照组及干扰组,分别感染包含随机序列shRNA和靶向NF90 shRNA的病毒液。48 h后流式分选出带有绿色荧光的阳性细胞,G418筛选阳性单克隆细胞株,Western blotting鉴定NF90的蛋白表达水平,最终在对照组中选取一株细胞命名shRNA-ns,在干扰组中选取NF90敲减效果良好且稳定的两株细胞命名为shRNA-1、shRNA-2。采用CCK-8法检测各株细胞的增殖情况,克隆形成试验分析各株细胞的克隆形成能力。质谱分析预测NF90的相关结合蛋白,内、外源免疫共沉淀确定NF90与多聚ADP核糖合成酶(PARP1)的关系,荧光定位分析NF90与PARP1在细胞内的定位情况。结果 shRNA-1、shRNA-2细胞中的NF90表达水平显著低于shRNA-ns细胞,表明包装的慢病毒敲减NF90效果良好。与shRNA-ns细胞比较,shRNA-1、shRNA-2细胞的生长缓慢,克隆形成数减少,差异均有统计学意义(P<0.01)。NF90与PARP1在细胞内相互结合并且共定位于细胞核。结论敲减NF90可抑制肝癌细胞增殖,其机制可能与PARP1相互作用有关。
- 宋丹魏莉吴家雪
- 关键词：NUCLEARFACTORPOLYMERASE
- PARP9促进肺腺癌细胞的迁移和侵袭被引量：1
- 2022年
- 目的探究聚(ADP-核糖)聚合酶9[poly(ADP-ribose)polymerase 9,PARP9]在肺腺癌组织中的表达、预后及其对肺腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法通过UALCAN数据库、GEO数据库和72例配对肺腺癌组织样本的免疫组化染色结果,分析PARP9在肺腺癌组织中的表达、预后以及与肺腺癌患者临床病理特征的相关性。利用CRISPR/Cas9在肺腺癌细胞H1299和A549中敲除PARP9基因,通过慢病毒感染在PARP9缺陷的A549细胞中恢复表达PARP9,使用Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力的改变。结果数据库分析与免疫组化染色结果表明,与正常肺组织相比,PARP9在肺腺癌组织中的mRNA和蛋白质水平均显著提高(P<0.05)。PARP9高表达的肺腺癌患者总体生存期更短,且PARP9表达与肺腺癌患者的临床分期与淋巴结转移相关(P<0.05)。PARP9缺陷显著抑制H1299和A549细胞的迁移和侵袭能力,恢复表达PARP9可以逆转该表型(P<0.05)。结论PARP9在肺腺癌中高表达,高表达PARP9的肺腺癌患者预后不良,PARP9可促进肺腺癌细胞的迁移和侵袭,提示其可能是肺腺癌的一个重要原癌基因。
- 郑芬周晓敏吴家雪
- 关键词：肺腺癌细胞迁移细胞侵袭
- 多聚ADP-核糖结合蛋白的鉴定
- 2018年
- 多聚ADP-核糖基化(poly(ADP-ribose),PAR)是一种蛋白翻译后修饰方式,在很多细胞生命过程中行使重要的功能.近年来已经鉴定了许多被PAR修饰或与PAR结合的蛋白.本研究中,通过亲和纯化和质谱分析的方法发现了很多与PAR结合的蛋白,其中包括一些已经报道的与PAR结合的蛋白,但大部分是未知的.通过体外实验,我们进一步验证了HRP-2,CDK9,EWSR和FXR1与PAR的结合,并发现HRP家族的PWWP结构域是一个特异的与PAR结合的结构域.此外,HPR-2缺失的细胞对DNA损伤试剂敏感,说明HRP-2参与了DNA的损伤应答过程,可能在DNA损伤修复中起到非常重要的作用.
- 沈莉芳张弛吴家雪
- 数据挖掘结合实验证明hsa-miR-371a-3p促进肝癌细胞迁移
- 2020年
- 肝细胞癌严重威胁着人类的生存,其转移是肝癌患者主要的死亡原因.microRNA参与调控肿瘤的转移,具有成为治疗靶点的潜力.本研究通过生物信息学的手段挖掘公共数据库中的microRNA表达谱数据,鉴定出新的潜在的促进肝癌转移的microRNA hsa-miR-371a-3p.细胞愈伤实验和细胞迁移实验的结果证明hsa-miR-371a-3p的过表达能够促进肝癌细胞的迁移.而且,在hsa-miR-371a-3p过表达的肝癌细胞中,预测的靶基因MRVI1和UBR7的mRNA表达水平下降,说明hsa-miR-371a-3p可能通过下调MRVI1和UBR7的方式促进肝癌细胞的迁移.
- 何懿吴家雪
- 关键词：肝细胞癌细胞迁移MICRORNA数据挖掘
