蔡伟 作品数:13 被引量:46 H指数:5 供职机构: 重庆医科大学附属大学城医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市自然科学基金 重庆市卫生局科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 艺术 更多>>
RNAi干扰Ska2对H1299细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响 被引量:1 2014年 Ska2(spindle and kinetochore associated complex subunit 2),又称FAM33A(family with sequence similarity 33,member A),是新近发现的一个与细胞周期调控和肿瘤发生发展紧密相关的基因,且与该团队前期发现的新基因PRR11(proline rich 11)共享一个双向启动子。但是,Ska2在肺癌中的具体作用和分子机制仍不清楚。该研究选用肺癌细胞系H1299,采用RNAi技术构建Ska2基因沉默的稳定细胞株,并进行了细胞表型和潜在分子机制分析。RT-PCR和Western blot结果表明,Ska2在mRNA和蛋白质水平上的表达均被有效抑制。细胞增殖、细胞迁移和侵袭实验结果表明,与对照细胞相比,Ska2基因沉默稳定细胞株的细胞增殖能力、细胞迁移和侵袭能力均显著降低。此外,Ska2基因被沉默后,CCNA1基因的表达显著下调。该研究的结果提示,Ska2与其对侧基因PRR11的功能高度相关,可能与PRR11共同参与肺癌细胞增殖、迁移和侵袭行为的调节。 王义涛 蔡伟 朱远远 李溪月 张春冬 王森 雷云龙 张莹 朱慧芳 李轶 卜友泉关键词:细胞增殖 肺癌 迁移 992株临床分离病原菌分布及耐药性分析 被引量:5 2016年 目的了解该院近3年临床分离病原菌的分布及耐药情况。方法回顾性分析该院2011年11月至2014年12月临床分离的992株病原菌及药敏结果。结果该院992株病原菌中革兰阴性杆菌487株(49.1%),大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs检出率分别为47.5%、16.7%,两者对亚胺培南和美洛培南的敏感率分别为100%、98.5%;铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌对多种抗菌药物高度敏感;嗜麦芽窄食假单胞菌对多种抗菌药物均有不同程度的耐药,但对复方黄胺甲噁唑100%敏感。革兰阳性球菌245株(24.7%),耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的检出率分别为45.5%、91.6%,未检出耐万古霉素葡萄球菌和耐万古霉素肠球菌。真菌260株(26.2%),白假丝酵母菌对抗真菌药高度敏感,热带假丝酵母菌的耐药率较高。结论定期回顾分析临床分离病原菌的分布及其耐药性,有利于及时掌握其耐药性的变迁,从而指导临床合理应用抗菌药物。 蔡伟 李代昆 余雪梅 刘定华 李文明 封雪 何祺 薛建江关键词:革兰阴性菌 革兰阳性菌 微生物敏感性试验 耐药率 siRNA介导的PRR11表达抑制导致肺癌细胞系基因表达谱变化的分析 被引量:6 2013年 Proline rich 11(PRR11)是本课题组鉴定的一个新的肿瘤相关基因。为研究PRR11介导肺癌发生发展相关的分子机制,本研究分析了PRR11表达被抑制后人肺癌细胞系H1299的全基因组基因表达谱的变化。首先,采用siRNA抑制H1299细胞中PRR11的表达,提取总RNA,采用基因芯片分析全基因组基因表达谱的变化。然后,对呈现差异表达的基因进行GO和Pathway富集分析,并对部分重要的候选基因进行定量RT-PCR验证。基因芯片结果表明,采用siRNA有效抑制H1299细胞中PRR11表达后,共有550个基因的mRNA水平出现明显变化,其中139个基因表达上调,411个基因表达下调。生物信息学分析结果表明,上述差异表达的基因显著富集于细胞周期和MAPK通路。定量RT-PCR验证分析结果表明,PRR11表达抑制后确实可导致多个与细胞周期和肿瘤发生发展密切相关的基因(包括DHRS2、EPB41L3、CCNA1、MAP4K4、RRM1、NFIB)呈现显著的表达变化。这些结果提示,PRR11可能通过上述通路和/或基因的表达变化参与肺癌的发生发展过程。 龙银江 吉颖 翁华莉 张春冬 谢濛宇 蔡伟 王义涛 朱远远 李轶 李轶 张莹关键词:基因芯片 肺癌 差异表达基因 抑制PRR11基因表达对H1299细胞周期的影响 被引量:7 2013年 Proline-rich protein 11(PRR11)是一个与细胞周期调控和肿瘤发生发展均密切相关的新基因。前期研究表明,PRR11敲减后导致肿瘤细胞周期S期阻滞。该研究利用流式细胞检测和免疫荧光方法在人肺癌细胞系H1299中分析siRNA介导的PRR11表达沉默对细胞周期产生的影响,通过添加dNTPs分析核糖核苷酸还原酶表达下降在PRR11敲降导致的S期阻滞中的作用。Brdu标记结果表明,PRR11敲减阻滞细胞周期在S期,并且核糖核苷酸还原酶表达下降导致细胞周期阻滞。使用分裂期标记蛋白pHH3分析结果表明,PRR11下调表达同时也导致细胞在G2期产生阻滞,从而抑制细胞进入有丝分裂。研究结果表明,在细胞周期过程中抑制PRR11的表达会阻滞DNA合成和有丝分裂进行,推测PRR11异常表达可能导致细胞周期紊乱,从而促进肿瘤的发生发展。 张春冬 王义涛 张莹 李轶 朱慧芳 蔡伟 朱远远 卜友泉关键词:肺癌 细胞周期 脱氧核糖核苷酸 SHH信号通路对肝癌细胞Hep3B中血管内皮生长因子表达的影响 被引量:1 2017年 目的研究sonic hedgehog(SHH)信号通路对肝癌Hep3B细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达的调控。方法对Hep3B肝癌细胞设计VEGF基因的特异性引物,将扩增的基因片段克隆到T载体PMD19-T上,构建标准品质粒并建立标准曲线,建立实时荧光定量PCR(RT-PCR)的检测方法。后将Hep3B肝癌细胞分为对照组和研究组处理,对照组为空白对照,研究组采用特异性抑制剂cyclopamine阻断肝癌细胞中的SHH通路,均采用实时荧光定量PCR方法及免疫印迹试验两种方法测定VEGF的表达量。结果 RT-PCR显示,SHH通路特异性抑制剂cyclopamine可明显下调肝癌Hep3B细胞中VEGF mRNA表达(研究组与对照组分别为10.728±0.186、18.506±0.395,P<0.05),同时免疫印迹试验检测结果提示VEGF蛋白表达也明显降低(研究组与对照组分别为0.84±0.09、0.33±0.07,P<0.05)。结论 cyclosporine可抑制肝癌Hep3B中VEGF的表达,VEGF可能为SHH通路调控的下游基因之一。 余雪梅 吴啸天 李文明 刘定华 蔡伟 陈梅 李莉 薛建江关键词:血管内皮生长因子 HEDGEHOG信号通路 CYCLOPAMINE B-Myb在肺癌发生发展中的作用与分子机制初探 B-Myb是经典癌基因Myb家族的成员之一,在细胞周期和肿瘤发生发展等生物学过程中均具有重要作用。但其在肺癌发生发展中的作用与分子机制仍不清楚。本研究针对该问题开展了如下三方面研究。 (1) B-Myb在肺癌中的表达水... 蔡伟关键词:肺癌 发病机理 分子机制 文献传递 感染性腹泻大便中无活性大肠埃希菌的检测结果分析 被引量:2 2016年 目的分析粪便标本分离的无活性大肠埃希菌的鉴定及耐药性。方法对该院2013年1月至2015年6月临床送检的粪便标本进行细菌培养、鉴定和药敏试验。结果共检出61株无活性大肠埃希菌,18株能与志贺菌诊断血清发生凝集反应。阿莫西林和替卡西林耐药率为100%,哌拉西林、头孢噻吩和复方磺胺甲噁唑耐药率为78%,头孢西丁和阿米卡星耐药率为33%,哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南和美罗培南耐药率为0%。结论无活性大肠埃希菌能引起腹泻,容易被误诊为志贺菌;耐药性与普通大肠埃希菌无显著不同。 李代昆 李莉 蔡伟 余雪梅 封雪 薛建江 张德纯关键词:感染性腹泻 耐药特性 黏液型铜绿假单胞菌临床分布与耐药性分析 被引量:16 2017年 目的为临床合理使用抗菌药物治疗黏液型铜绿假单胞菌感染提供必要的病原学依据。方法收集医院2012年1月-2016年12月临床分离的86株黏液型铜绿假单胞菌感染病例,通过查阅病历获得患者一般资料、疾病情况、抗菌药物使用等信息,回顾性分析黏液型铜绿假单胞菌的临床分布、耐药性及疗效。结果临床送检标本共分离出黏液型铜绿假单胞菌86株,男性占72.09%,女性占27.01%;老年人占83.72%,中年人占12.79%,青年人占3.49%;肺部感染、泌尿系感染和创伤感染分别占93.02%、3.49%和3.49%;氨苄西林/舒巴坦和磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药率为98.84%、95.35%,替卡西林和替卡西林/克拉维酸的耐药率为22.09%、13.95%,哌拉西林和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率为11.63%和10.47%;疗效显著的病例占83.72%。结论黏液型铜绿假单胞菌感染主要集中在老年男性的呼吸道感染,临床应根据药敏结果合理选用抗菌药物。 李代昆 李具琼 余雪梅 蔡伟 薛建江关键词:黏液型铜绿假单胞菌 耐药性 疗效 B-Myb稳定过表达H1299细胞株的构建与分析 2014年 B-Myb是Myb家族的成员之一,在细胞周期和癌变过程中具有重要作用。但其在肺癌中的作用及其分子机制仍不清楚。为了研究B-Myb在肺癌中的作用,构建了B-Myb稳定过表达的H1299肺癌细胞株。流式细胞术和MTT检测的结果表明,B-Myb稳定过表达导致G1期细胞减少,S期细胞增加进而促进细胞增殖;克隆形成实验及Transwell的结果表明,B-Myb稳定过表达显著增强H1299细胞的克隆形成、侵袭及迁移能力。定量RT-PCR检测结果表明,B-Myb稳定过表达显著提高了细胞周期基因CCNA1的表达水平;对CD97和MTSS1等细胞运动相关下游基因的表达则无明显影响。该研究成功构建了B-Myb稳定过表达细胞株,发现了B-Myb过表达可促进肺癌细胞的增殖、侵袭迁移及克隆形成能力,为进一步研究奠定了基础。 蔡伟 王义涛 朱远远 王森 朱慧芳 雷云龙 李轶 张莹 张春冬 卜友泉关键词:细胞周期 细胞增殖 肺癌 沉默DEPDC1基因表达对鼻咽癌细胞系HNE-1生长和细胞周期的影响 被引量:5 2014年 为探讨沉默DEPDC1基因表达对鼻咽癌细胞系HNE-1生长和细胞周期的影响,该实验设计合成靶向DEPDC1的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染人鼻咽癌HNE-1细胞。转染后,采用荧光定量PCR、免疫印迹、MTT及流式细胞术方法检测细胞内DEPDC1的表达量以及细胞周期、生长增殖、凋亡的变化及其可能机制。结果显示,转染DEPDC1 siRNA后,DEPDC1基因在mRNA及蛋白水平的表达量明显降低;大量细胞被阻滞于G2/M期,生长增殖减慢,凋亡增加。荧光定量PCR结果表明,抑制NF-κB激活的A20基因表达量明显上调,受NF-κB调控的肿瘤相关靶基因的表达量下降,包括C-MYC、MMP9、ICAM-1、BCL-2基因。由此说明,沉默DEPDC1基因可以影响HNE-1细胞的周期,抑制其生长增殖,促进凋亡,其机制可能与抑制NF-κB通路有关。 何龙霞 糜燕 张春冬 张莹 蔡伟 王义涛 卜友泉 朱江关键词:鼻咽癌 SIRNA 细胞周期