刘畅
- 作品数：40 被引量：150H指数：7
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家中医药管理局基金资助项目国家中医药管理局课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 血液透析患者龋病和牙周健康状况的系统评价被引量：7
- 2017年
- 目的对接受维持性血液透析的终末期肾病患者的龋病和牙周健康状况进行系统评价。方法计算机检索中国学术期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库、Pub Med、Web of Science、Cochrane Library数据库,收集国内外公开发表的研究血液透析患者口腔健康状况的病例对照和横断面研究,检索时间截止2016年5月。由2名研究者根据纳入与排除标准对相关文献进行筛选,并对文献进行质量评价和提取数据,对同质研究采用Revman 5.3软件进行Meta分析。结果研究最终纳入16篇文献,Meta分析结果显示,血液透析患者人群的牙菌斑指数(MD=0.62,95%CI为0.51~0.72)、牙石指数(MD=1.09,95%CI为0.56~1.63)、牙周袋深度(MD=0.63,95%CI为0.29~0.98)、附着丧失(MD=0.63,95%CI为0.56~0.69)均高于对照组(P<0.01),而龋失补牙数(MD=1.12,95%CI为-1.08~3.32)与对照组无统计学差异(P=0.32)。结论行血液透析治疗的终末期肾病患者的龋病状况与健康对照人群无明显差异,但口腔卫生和牙周状况较差,在临床治疗时需得到重视。
- 魏习胡波彭海洋刘畅宋锦璘唐明
- 关键词：血液透析肾衰竭牙周病龋病
- p75NTR敲除对小鼠股骨矿化发育的抑制作用被引量：5
- 2017年
- 目的对比野生型和p75 neurotrophin receptor(p75NTR)敲除小鼠股骨骨质的改变,探讨p75NTR敲除对小鼠股骨矿化发育的影响。方法取同窝p75NTR^(+/+)(野生型)和p75NTR^(-/-)(敲除型)雄性小鼠,出生后8周龄时行股骨Micro-CT扫描,检测股骨松质骨的骨量(BV)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨表面积/骨量(BS/BV)、骨小梁分离度(Tb.Sp)和皮质骨的骨量(Ct.BV)、骨皮质厚度(Ct.Tb Th)、骨皮质的骨表面积/骨量(Ct.BS/BV);出生后40 d分别取同窝两种基因型雄性小鼠行钙黄绿素荧光双标实验,以检测股骨的矿化沉积速率;提取4周龄大小鼠股骨总RNA及蛋白质,RT-PCR和Western blot检测ALP、Runx2的表达。结果 Micro-CT结果显示:p75NTR^(-/-)小鼠股骨的BV、BV/TV、Tb.N、Tb.Th、Ct.BV、Ct.Tb Th明显低于同窝p75NTR~(^(+/+))小鼠(P<0.05),同时,p75NTR^(-/-)小鼠的BS/BV、Tb.Sp、Ct.BS/BV明显高于p75NTR^(+/+)小鼠(P<0.01);钙黄绿素荧光双标检测结果显示:p75NTR^(-/-)小鼠股骨的矿化速率明显低于同窝p75NTR^(+/+)小鼠(P<0.01);RT-PCR及Western blot结果显示:p75NTR~(^(-/-))小鼠的ALP、Runx2表达均明显低于p75NTR~(^(+/+))小鼠(P<0.01)。结论 p75NTR敲除对小鼠股骨的矿化发育有一定的抑制作用。
- 王莹莹储庆杨琨温秀杰李刚刘骏宇刘畅刘鲁川
- 关键词：神经生长因子受体股骨矿化小鼠
- 大黄素诱导白血病K562细胞凋亡及对Caspase-3基因表达的影响被引量：5
- 2009年
- 目的:探讨大黄素对人白血病K562细胞的增殖抑制与诱导凋亡作用.方法:采用四唑蓝比色试验(MTT)检测大黄素对K562细胞的增殖抑制作用;通过电子显微镜观察细胞的形态学变化;运用原位缺口末端标记技术检测大黄素对K562细胞的凋亡效应;采用流式细胞技术检测细胞周期变化与凋亡情况;通过比色法检测Caspase-3的相对活性,RT-PCR检测细胞内凋亡相关基因Caspase-3的转录水平.结果:大黄素能显著抑制K562细胞的增殖,作用24,72 h后的半数抑制率浓度分别为80,40μmol/L;处理组细胞可见典型的凋亡形态学改变;TUNEL法检测到K562细胞在大黄素的诱导下出现凋亡;流式细胞仪结果分析发现,处理组的K562细胞被阻滞于G0/G1期,与对照组相比,凋亡率明显升高并呈现时间-剂量依赖性(P<0.01);大黄素可触发Caspase-3的活性增高(P<0.01),并呈现剂量依赖性;RT-PCR结果显示,Caspase-3mRNA表达上调.结论:大黄素能有效地抑制K562细胞的增殖并诱导其凋亡,可能与Caspase-3活化有关.
- 金丹婷刘北忠刘畅王春光王翀王东生郝坡钟梁
- 关键词：大黄素K562细胞白血病细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
- 糖皮质激素受体结合域诱饵表达载体的构建及鉴定
- 2008年
- 目的构建糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)结合域的诱饵表达载体。方法RT-PCR扩增GR结合域,克隆入pMD18-T,测序正确后,再亚克隆入诱饵载体pGBKT7中,再把构建好的诱饵载体pGBKT7-GR转化到酵母AH109细胞中,并用Western blot分析诱饵蛋白的表达情况,同时检测诱饵蛋白的毒性和自激活作用。结果成功扩增了GR结合域,并分别成功克隆到pMD18-T和pGBKT7中,测序结果正确。诱饵载体成功转化到酵母AH109细胞中,无毒性和自激活作用,Western blot分析结果也证实了酵母细胞高表达诱饵蛋白。结论成功构建了GR结合域的酵母诱饵表达载体。
- 郝坡刘北忠欧阳峰王东生刘畅钟梁金丹婷王翀
- 关键词：诱饵载体诱饵蛋白
- 人HL-60细胞GR-αLBD诱饵表达载体的构建和鉴定
- 2008年
- 目的:构建糖皮质激素(Glucocorticoid,GC)受体α配体结合域(GRα-LBD)的诱饵表达载体,为小分子配体酵母三杂交系统的建立奠定基础。方法:RT-PCR扩增HL-60细胞的GRα-LBD,克隆入诱饵载体pGBKT7中,测序正确后,再把构建好的诱饵载体pGBKT7-GRα-LBD转化到酵母AH109细胞中,提取酵母蛋白,并用Western blot分析诱饵蛋白的表达情况。同时检测诱饵蛋白的毒性和自激活作用。结果:成功扩增了GRα-LBD,并成功亚克隆到pGBKT7中,测序结果正确。诱饵载体成功转化到酵母AH109细胞中,无毒性和自激活作用,Western blot分析也证实了酵母细胞高表达诱饵蛋白。结论:成功构建了GRα-LBD酵母诱饵表达载体,为建立小分子配体酵母三杂交系统奠定了基础。
- 钟梁郝坡刘北忠王东生刘畅金丹婷王翀王春光
- 关键词：HL-60诱饵载体诱饵蛋白
- IL-21R在舌鳞状细胞癌中的表达及意义
- 2017年
- 目的炎症通过其对肿瘤微环境的影响在癌症的发展过程中起着重要作用。然而炎症与肿瘤之间的关系仍然需要进一步阐明。本研究主要观察IL-21R在舌鳞状细胞癌的表达和分布情况。方法使用逆转录酶聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot免疫印迹方法检测来自54个舌鳞状细胞癌患者手术标本IL-21R的基因和蛋白表达,并且观察IL-21R表达与临床病理特征的关系。同时,进一步通过免疫组织化学和免疫荧光技术观察IL-21R表达与分布规律。结果 RT-PCR和Western印迹分析的结果表明,与癌旁组织相比,舌鳞状细胞癌标本中IL-21R基因和蛋白表达显著降低(P<0.05)。IL-21R低表达与性别、年龄、分化程度、肿瘤大小均无密切关系。这种表达特点主要与临床分期呈正相关。免疫组织化学结果显示,IL-21R主要表达于舌癌旁组织鳞状细胞和上皮细胞,而鳞状细胞癌组织中表达较弱或散在的表达。IL-21R与IL-10的双染荧光结果显示,IL-21R阳性的细胞中可见IL-10的阳性染色。结论这些数据表明IL-21R在舌癌肿瘤发生与侵袭性过程中可能起着重要作用。
- 刘畅温秀杰易青洁彭海洋王丹唐明
- 关键词：舌癌炎症免疫
- TNF-β基因+252A/G多态性与胃癌易感性Meta分析被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-β基因+252 A/G多态性与胃癌的发病相关性。方法:检索Pubmed、Ovid、Springer、CBM、CNKI、万方数据库,时间从建库至2013年6月期间关于TNF-β基因+252 A/G多态性与胃癌发病相关性的病例-对照研究。根据纳入排出标准选择文献,提取资料,评价纳入研究质量,采用Review Manager 5.2及Stata 12.0软件进行Meta分析,亚组分型及敏感性分析评估其结果稳定性,并用Begg’s漏斗图和Egger’s回归图来评估发表偏倚。结果:共纳入了16篇病例对照研究,共计病例组2 538人,对照组3 908人。Meta分析结果显示:在各组遗传模型中,TNF-β基因+252 A/G多态性与胃癌发病无统计学意义:共显性遗传模型(G/G vs.A/A):OR及95%CI:0.95(0.76,1.20);显性遗传模型[(A/G+G/G)vs.A/A]:OR及95%CI:1.09(0.91,1.32);隐性遗传模型[G/G vs.(A/G+A/A)]:OR及95%CI:0.88(0.72,1.07);等位基因遗传模型(G vs.A):OR及95%CI:1.00(0.90,1.11)(G/G、A/G、A/A分别代表基因型)。针对人种的亚组分析也无统计学意义。结论:TNF-β+252A/G基因多态性与胃癌发病无明显相关性。本次结果受纳入研究质量及数量的限制,结论仍需进一步大规模研究验证。
- 刘畅张玲姜政姚巧玲
- 关键词：肿瘤坏死因子-Β胃癌META分析
- 大黄素诱导白血病K562细胞凋亡的实验研究被引量：8
- 2009年
- 目的:探讨大黄素对人白血病K562细胞的增殖抑制与诱导凋亡作用。方法:采用MTT法检测大黄素对K562细胞的增殖抑制作用;通过Wight-Giemsa染色(W-G染色),在普通光镜下观察细胞的形态学变化;运用AnnexinV/PI双标记法检测大黄素对K562细胞的凋亡效应;采用流式细胞技术检测细胞周期变化与凋亡情况;通过比色法检测Caspase-3、8、9的相对活性,分析大黄素诱导K562细胞凋亡的信号途径。结果:大黄素能显著抑制K562细胞的增殖,作用24、48、72h后的半数抑制率浓度分别为80、50、40μmol/L;处理组细胞在普通光镜下可见典型的凋亡形态学改变;AnnexinV/PI双标记法检测到K562细胞在大黄素的诱导下出现早期凋亡并呈剂量依赖性(P<0.01);流式细胞仪结果分析发现,处理组的K562细胞被阻滞于G0/G1期,与对照组相比,凋亡率明显升高并呈现剂量依赖性(P<0.01);大黄素可触发Caspase-3、8、9的活性增高(P<0.01)。结论:大黄素能有效地抑制K562细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制和Caspase信号途径的活化有关。
- 金丹婷刘北忠刘畅王春光王翀王东生郝坡钟梁
- 关键词：大黄素K562细胞细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
- 前B细胞克隆增强因子对急性肺损伤／急性呼吸窘迫综合征大鼠肺组织细胞黏附分子的影响被引量：11
- 2013年
- 目的观察前B细胞克隆增强因子（PBEF）对急性肺损伤，急性呼吸窘迫综合征（ALI／ARDS）大鼠肺组织细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）的影响。方法将40只SD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、药物干预组、溶媒对照组，每组10只。采用油酸尾静脉注射复制ALI／ARDS模型。药物干预组制模前腹腔内注射PBEF抑制剂FK866，溶媒对照组制模前注射等体积FK866溶媒二甲亚砜。制模成功6h后取材，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）含量；观察肺组织病理学变化；用逆转录-聚合酶链反应和免疫组化染色测定肺组织中PBEF、ICAM-1、VCAM-1的mRNA及蛋白表达。结果与对照组比较，模型组大鼠肺组织出现明显的ALI／ARDS病理学改变，BALF中TNF-α（ng/L）、IL-1β（ng／L）含量增多（TNF-α：656．51±47．13比84．82±7．84，IL-1β：379．60±31．55比74．56±8．51，均P〈0．01），PBEF、ICAM-1、VCAM-1的mRNA和蛋白表达增加（PBEF mRNA：0．581±0．079比0．186±0．051，ICAM-1mRNA：0．558±0．060比0．176±0．070，VCAM-1mRNA：0．646±0．059比0．226±0．047；PBEF蛋白：0．089±0．024比0．037±0．011，ICAM-1蛋白：0．061±0．012比0．025±0．008，VCAM-1蛋白：0．072±0．013比0．033±0．010，均P〈0．01）。与模型组比较，药物干预组大鼠肺组织病理改变有所减轻，BALF中TNF-α、IL-1β含量显著降低（TNF-α：478．80±72．93比656．51±47．13，IL-1β：244．62±52．17比379．60±31．55，均P〈0．05），PBEF、ICAM-1、VCAM-1的mRNA和蛋白表达明显减少（PBEFmRNA：0．456±0．110比0．581±0．079，ICAM-1mRNA：0．413±0．073比0．558±0．060，VCAM-1mRNA：0．483±0．062比0．646±0．059；PBEF蛋白：0．059±0．010比0．089±0．024，ICAM-1蛋白：0．043±0．007比0．061±0．01
- 刘畅张虹程鹏雁周发春
- 关键词：前B细胞克隆增强因子细胞间黏附分子-1血管细胞黏附分子-1急性肺损伤
- 大鼠胚胎下颌磨牙发育初期p75NTR及RUNX2时空表达被引量：2
- 2017年
- 观察p75神经营养受体(p75 neurotrophin receptor,p75NTR)及Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)在SD大鼠下颌第一磨牙成牙发育初期不同发育阶段的表达分布情况,并探讨两者在SD大鼠出生后下颌第一磨牙发育矿化的作用。我们首先制备SD大鼠下颌第一磨牙发育初期标本(E13.5 d,E14.5 d,E15.5 d,E16.5 d,E18.5 d和P0.5 d),免疫组织化学检测p75NTR和RUNX2的表达分布情况。并用表达强度差异较大的天数P0.5 d的大鼠外胚间充质干细胞(ectomesenchymal stem cells,EMSC)进行体外矿化诱导,同时本实验采用蛋白质印迹法检测0 d、7 d、14 d和21 d的p75NTR和RUNX2的表达情况。我们发现p75NTR在蕾状期(E13.5 d)开始表达于成釉器旁边的间质;帽状期(E14.5 d,E15.5 d)广泛表达在内釉上皮、釉结、星网状层、牙乳头、牙囊;钟状期(E16.5 d,E18.5 d,P0.5 d)表达在内釉上皮、釉结、星网状层、中间层、牙乳头,牙囊。RUNX2在蕾状期、帽状初期(E13.5 d,E14.5 d)表达在成釉器下方间质;帽状末期(E15.5 d)达在在内釉上皮、釉结、星网状层、牙乳头、牙囊;钟状期(E16.5 d,E18.5 d,P0.5 d)表达在在内釉上皮、釉结、星网状层、中间层、牙乳头、牙囊;在帽状末期到钟状期(E15.5 d,E16.5 d,E18.5 d)RUNX2与p75NTR的表达范围和强度是相似的,但在钟状分化期(P0.5 d)RUNX2的表达范围类似于p75NTR但强度下降。P0.5 d EMSC蛋白质印迹法结果显示:随着矿化诱导时间的上升,p75NTR和RUNX2的表达均呈上升趋势。这些结果提示我们p75NTR和RUNX2在成牙初期不同天数表达位置及变化,具有时空特异性,可能与牙齿矿化发育相关,矿化诱导后变化趋势趋于一致说明二者在SD大鼠成牙发育初期下颌第一磨牙的发育及矿化中都起到一定的作用,可能存在正相关关系。
- 刘畅杨琨李刚温秀杰赵曼竹易青洁唐明
- 关键词：P75NTRRUNX2牙胚发育
