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Decorin基因过表达对HEK 293T细胞微管相关蛋白LC3和自噬基因beclinl表达的影响被引量：2: 2012年; 目的:构建人核心蛋白聚糖(DCN)重组质粒,研究其对微管相关蛋白LC3和自噬基因beclinl表达的影响。方法:从人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)提取总RNA,经RT-PCR获得decorin的全长cDNA,克隆至T-载体pUM-T并测序,亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,再次测序正确后以磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK293T细胞,利用RT-PCR、Western Blot方法检测空载体组和重组质粒转染组微管相关蛋白LC3和自噬基因beclinl转录水平及翻译水平的表达。结果:经DNA测序证实人DCN cDNA片段正确插入真核表达载体中。Western Blot结果显示经磷酸钙共沉淀法转染的HEK 293T细胞中目的基因高表达。RT-PCR和Western Blot结果显示,与空载体组相比,重组质粒转染组LC3转录水平显著降低,beclin1和LC3-II的翻译水平均显著降低。结论:成功构建人DCN重组质粒,其在HEK 293T中过表达可以显著降低微管相关蛋白LC3和自噬基因beclinl表达,为进一步研究DCN与自噬的相互作用奠定了基础。; 赵婷婷古艳婷李平朱斌董晞张浩军; 关键词：核心蛋白聚糖自噬

EPHX2基因过表达质粒的构建及意义探讨: 2014年; 目的:构建LETO、OLETF大鼠EPHX2基因过表达重组质粒,观察其在人胚肾细胞(human embryonic kidney293T,HEK293T)中的表达,及对HEK293T细胞NF-κBp65 mRNA表达的影响。方法:提取LETO、OLETF大鼠肾脏组织总RNA,RT-PCR方法扩增编码EPHX2基因的cDNA,克隆至T-载体并测序,经亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,构建两型大鼠EPHX2过表达重组质粒,酶切鉴定并测序,采用磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞系。Western Blot方法检测EPHX2融合蛋白的表达,RT-PCR方法检测EPHX2基因过表达对HEK293T细胞NF-κBp65表达水平的影响。结果:(1)两个重组质粒均含有完整EPHX2 cDNA,测序证实OLETF型大鼠较LETO型大鼠EPHX2重组质粒有五个核苷酸位点的改变。(2)转染HEK293T细胞后,Western Blot证实融合蛋白成功表达;(3)TNF-α刺激增加HEK293T细胞中NF-κBp65mRNA表达;(4)EPHX2基因过表达促进TNF-α刺激后的HEK293T细胞中NF-κBp65 mRNA表达升高(P<0.05)。结论:成功构建LETO型及OLETF型大鼠EPHX2过表达重组质粒(L-EPHX2/V5、O-EPHX2/V5),可在HEK293T细胞中过表达。为进一步探讨EPHX2基因在糖尿病肾病发生发展中的作用奠定了基础。; 费敏李平赵婷婷孙斯凡古艳婷王华张浩军杨靖; 关键词：重组质粒 NF-ΚBP65 糖尿病肾病

柴黄益肾颗粒对糖尿病并发肝损伤大鼠TGF-β1及GLUT-1的调控作用研究被引量：4: 2012年; 目的:观察柴黄益肾颗粒对糖尿病肾病并发肝损伤大鼠的肝保护作用,并探讨其可能机制。方法:单侧肾切除合并链脲佐菌素注射诱导糖尿病肾病大鼠模型,给药20周后,检测大鼠血糖、肝功能、肝组织病理、肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原及肝糖原蓄积程度,并检测肝组织葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA及蛋白表达水平。结果:与假手术对照组比较,模型组大鼠肝组织表现为肝细胞索排列紊乱,炎性细胞浸润,糖原颗粒蓄积,Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维异常增生,柴黄益肾颗粒组大鼠肝组织炎性细胞浸润、糖原蓄积程度及Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维增生程度显著减轻,肝组织GLUT-1及TGF-β1 mRNA、TGF-β1蛋白表达显著低于模型组(P<0.05)。结论:柴黄益肾颗粒对糖尿病肾病并发肝损伤大鼠具有肝保护作用,这可能与柴黄益肾颗粒显著降低肝组织GLUT-1及TGF-β1表达有关。; 韩文兵李平赵婷婷张浩军路晓光古艳婷朱斌李忻杨鑫马会霞; 关键词：柴黄益肾颗粒糖尿病肾病肝损伤葡萄糖转运蛋白-1

柴黄益肾颗粒对糖尿病大鼠肝糖原及肝组织GLUT-1表达的影响: 目的:观察柴黄益肾颗粒对糖尿病肝损伤的改善作用,并从葡萄糖转运及糖原蓄积角度探讨其作用机制. 方法:雄性Wistar大鼠以腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病,将造模成功的大鼠分为模型组、柴黄益肾颗粒组(2.24g/k...; 韩文兵张浩军李忻赵婷婷古艳婷杨鑫张韫朱斌李平; 关键词：柴黄益肾颗粒糖尿病肝糖原 GLUT-1

AMC与三种同类衍生物抗惊厥作用比较及对GABA和GABA<,C>受体ρ2mRNA表达的影响: 目的：比较胺甲斑蝥素(AMC)、甲苯亚乙酰去甲斑蝥素(MANC)、氯苯亚甲酰胺去甲斑蝥素(CANC)、氯苯亚丁酰去甲斑蝥素(CBNC)的抗惊厥作用、毒性及其体存药效动力学。观察AMC对电刺激大鼠坐骨神经和青霉素(PNC)...; 古艳婷; 关键词：斑蝥素衍生物抗惊厥作用; 文献传递

大鼠ETFβ基因过表达对NADPH氧化酶基因表达的影响: 2012年; 目的:构建大鼠ETFβ的重组质粒并检测其在人胚胎肾293T细胞中的表达和对NADPH氧化酶的影响。方法:应用RT-PCR方法从大鼠肾脏组织总RNA中扩增出编码ETFβ的cDNA,克隆至pUM-T载体并测序,然后亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,酶切鉴定后测序,测序正确后用磷酸钙共沉淀法瞬时转染HEK293T细胞,使用RT-PCR方法检测空载体组和重组质粒转染组的NADPH氧化酶各亚基mRNA水平的表达变化。结果:(1)测序结果证实PCR扩增得到编码ETFβ的cDNA序列正确;(2)磷酸钙共沉淀法转染HEK293T细胞后,ETFβ融合蛋白成功表达;(3)RT-PCR结果显示重组质粒转染组的NADPH氧化酶5个亚基中的NOX3,NOX4的mRNA表达降低(P<0.05),空载体组和重组质粒转染组之间比较NOX1,NOX2,NOX5的mRNA表达差异无统计学意义。结论:成功构建大鼠ETFβ的重组质粒,该重组质粒可在HEK293T中过表达,并且降低了NADPH氧化酶NOX3,NOX4的mRNA表达水平。; 古艳婷孙斯凡李平董晞王红盼赵婷婷张浩军杨靖; 关键词：NADPH氧化酶 HEK293

84例阿帕替尼治疗晚期非小细胞肺癌的临床研究: 2019年; 目的:研究阿帕替尼和紫杉醇联合顺铂化疗方案治疗晚期非小细胞的临床疗效及不良反应,并进行对比分析。方法:本次研究对象为在2015年1月至2018年9月在我院住院的84例晚期非小细胞肺癌患者,按随机数字法分为观察组及对照组,每组42例患者。观察组采用阿帕替尼单药治疗,对照组采用紫杉醇联合铂类化疗,经过4周期的临床治疗之后,对两组患者的临床疗效以及不良反应进行统计分析。结果:治疗前,两组患者的年龄、性别、肿瘤类型、ECOG评分等情况均无显著差异。过4周期治疗后,观察组的疾病控制率为66.7%,显著高于对照组的40.5%,P<0.05。观察组的骨髓抑制、恶心呕吐、高血糖等不良反应发生率显著低于对照组,P<0.05。结论:阿帕替尼和紫杉醇联合铂类化疗方案相比治疗晚期非小细胞肺癌,临床疗效显著,不良反应明显减少,具有良好的有效性和安全性,适用于临床推广。; 常戈鋆师文静陈慧莉姜飞董宏伟古艳婷; 关键词：紫杉醇肺癌

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古艳婷