孙倩
- 作品数:2 被引量:17H指数:2
- 供职机构:大连医科大学附属第一医院更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- MAPK/ERK信号通路在卵巢上皮性癌组织和细胞中的表达及其临床意义被引量:13
- 2019年
- 目的探讨有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在卵巢上皮性癌(卵巢癌)组织和细胞中的表达及其临床意义。方法(1)收集2004年1月—2013年12月大连医科大学附属第一医院收治的术后病理检查证实为卵巢癌的104例患者的石蜡标本,采用免疫组化SP法检测卵巢癌组织中磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达,并分析其与各临床病理特征的关系。(2)蛋白印迹(western blot)法检测MAPK激酶(MEK)抑制剂——司美替尼(AZD6244)作用前后不同卵巢癌细胞(包括SKOV3、OV2008、C13、A2780S、A2780CP、OVCAR4、OVCAR5、OVCAR8和CAOV3细胞共9种)中p-ERK1/2、ERK1/2蛋白的表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测AZD6244作用后不同卵巢癌细胞的增殖情况,流式细胞仪检测AZD6244作用后不同卵巢癌细胞的凋亡率及细胞周期比例。结果(1)免疫组化SP法检测显示,p-ERK1/2蛋白的阳性表达率与卵巢癌患者的年龄、病理类型、手术病理分期、术前血清CA125水平均无明显相关性(P>0.05)。进一步分析发现,在不同病理类型的卵巢癌组织中,p-ERK1/2蛋白的阳性表达率,高级别浆液性癌、黏液性癌及子宫内膜样癌均低于低级别浆液性癌(LGSC),分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);而透明细胞癌与LGSC比较,差异则无统计学意义(P=0.196)。(2)western blot法检测显示,p-ERK1/2、ERK1/2蛋白在9种卵巢癌细胞中均有不同程度的表达;不同浓度(5、10 μmol/L)的AZD6244分别作用于OVCAR5和OVCAR8细胞后,均可抑制p-ERK1/2、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)蛋白的表达,且AZD6244作用后可伴有PARP裂解片段的出现。MTT比色法检测显示,不同浓度(0、2.5、5、10、25、50、100 μmol/L)的AZD6244作用后,OVCAR5、OVCAR8和A2780S细胞增殖的抑制率均随着AZD6244浓度的增高而降低,呈显著的浓度依赖性(P<0.05)。流式细�
- 江雪莲高景春姜丽张朋新亢铁金孙倩祁文静张秋萍关宏伟石红
- 关键词:卵巢肿瘤丝裂原激活蛋白激酶类细胞增殖磷酸化
- IKKε蛋白在卵巢上皮性癌组织和细胞中的表达以及抑制其表达后对癌细胞增殖和凋亡的影响被引量:4
- 2017年
- 目的探讨卵巢上皮性癌(卵巢癌)组织和细胞中IKKε蛋白的表达,以及抑制其表达后对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响。
方法(1)选取2006年1月至2013年4月大连医科大学附属第一医院经手术治疗且经病理检查证实为卵巢癌的石蜡组织标本118份,患者中位年龄为59岁;另取同期因子宫肌瘤行子宫及卵巢切除术且术后经病理检查证实为正常卵巢组织标本20份作为对照,患者中位年龄为55岁。免疫组化SP法检测卵巢癌和正常卵巢组织中IKKε蛋白的表达,并分析IKKε蛋白表达与卵巢癌患者临床病理特征之间的关系。(2)选择卵巢癌细胞系SKOV3、OV2008、C13、A2780S、A2780CP、OV4、OV5、OV8和CAOV3细胞,蛋白印迹法检测卵巢癌细胞中IKKε蛋白的表达,以及IKKε抑制剂对卵巢癌细胞IKKε蛋白表达的影响;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和流式细胞仪分别检测IKKε抑制剂对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响。结果(1)免疫组化SP法检测显示,卵巢癌、正常卵巢组织中IKKε蛋白阳性表达率分别为66.1%(78/118)、35.0%(7/20),两者比较,差异有统计学意义(χ2=6.993,P=0.008)。卵巢癌组织中IKKε蛋白的表达与手术病理分期、病理分化程度、术前血清CA125水平和肿瘤分布(包括单侧卵巢、双侧卵巢)均明显相关(P〈0.05),而与年龄、病理类型、发病模式分型[包括Ⅰ型(即低级别卵巢癌)、Ⅱ型(即高级别卵巢癌)]和肿瘤直径均无明显相关性(P〉0.05)。(2)蛋白印迹法检测显示,9种卵巢癌细胞即SKOV3、OV2008、C13、A2780S、A2780CP、OV4、OV5、OV8和CAOV3细胞中均表达IKKε蛋白,其表达强度略有差异;IKKε抑制剂(分别为0.1、0.5 μmol/L)作用后,OV2008、C13、A2780S和A2780CP细胞中IKKε蛋白的表达强度分别与IKKε抑制剂作用前比较均明显减弱。MTT比色法检测显示,不同浓度(分别为0.05、0.1、0.
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- 关键词:卵巢肿瘤细胞增殖免疫组织化学