肖飞
- 作品数：8 被引量：96H指数：4
- 供职机构：首都儿科研究所更多>>
- 发文基金：“首都临床特色应用研究”专项北京市科技新星计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 交叉置换扩增联合纳米生物传感器检测乙肝病毒方法的建立与应用被引量：3
- 2023年
- 目的建立一种敏感、特异的乙肝病毒(HBV)快速检测方法,并评价其应用。方法基于多交叉置换扩增(MCDA)技术和纳米生物传感(LFB)检测技术,以HBV特异性S基因为检测靶标,建立HBV-MCDA-LFB方法,优化反应温度和时间等实验条件,并应用临床样本进行评价,同时与实时PCR(RT-PCR)进行比较。结果HBV-MCDA-LFB能在30 min内完成HBV检测,最佳反应温度为60℃,其特异性良好,未与其他病毒、细菌发生交叉反应。此外,该方法的检出限低至1×101拷贝/反应,且能准确检测临床样本的HBV,检测灵敏度优于RT-PCR方法。结论本研究建立了一种特异、敏感、便捷的乙肝病毒快速检测方法,即HBV-MCDA-LFB,其诊断效率优于临床采用的RT-PCR方法,可作为临床快速诊断HBV感染的替代方法。
- 贾楠肖飞周娟伏瑾黄小兰陈敏黄辉王毅
- 关键词：乙肝病毒RT-PCR
- 川崎病抗核抗体谱特点分析
- 2022年
- 目的对297例川崎病(Kawasaki disease,KD)患儿血清抗核抗体谱进行回顾性分析,并与儿童系统性红斑狼疮(juvenile systemic lupus erythematosus,JSLE)患儿抗核抗体谱进行比较,探讨血清抗核抗体谱检测在KD诊断及鉴别诊断中的意义。方法收集2016年12月至2017年12月在我院确诊为KD的病例297例,选取同时期130例JSLE作为对照组,回顾性分析血清抗核抗体(ANA)、抗ds-DNA抗体及抗核抗体谱结果。结果297例KD患儿中,ANA阳性218例,阳性率73.4%(218/297),其中滴度为1∶100者213例,占阳性病例的97.71%(213/218),滴度大于1∶100者5例,占阳性病例的2.29%(5/218);抗Ro-52抗体阳性112例,94例为弱阳性(+),仅18例患儿为阳性(++);抗AMA抗体阳性113例,109例为弱阳性(+),仅4例患儿为阳性(++);抗SSA抗体阳性7例,均为弱阳性(+)。130例JSLE患儿,ANA阳性者113例,阳性率86.92%(113/130),其中滴度1∶100者30例,占阳性病例的26.55%(30/113),滴度大于1∶100者83例,占阳性病例的73.45%(83/113);抗Ro-52抗体阳性55例,抗AMA抗体阳性14例,抗SSA抗体阳性49例,均为强阳性,此外JSLE患儿还存在大量其他自身抗体阳性,如抗SSB抗体、抗ds-DNA抗体等。结论血清抗核抗体谱检测可能有助于KD的诊断及与JSLE的鉴别诊断。
- 贾楠黄小兰肖飞伏瑾孙春荣朱佳崔小岱
- 关键词：儿童川崎病系统性红斑狼疮抗核抗体谱
- 基于多交叉置换扩增和纳米生物传感技术快速检测肺炎支原体方法的建立
- 2024年
- 目的建立一种简单、灵敏、快速的肺炎支原体(MP)检测方法,并对其应用性进行验证和评价。方法利用多交叉置换扩增(MCDA)技术对肺炎支原体特异基因CARDS毒素基因进行扩增,利用侧流免疫层析生物传感(LFB)技术读取扩增结果,命名该方法为MP-MCDA-LFB。分析扩增反应在60~67℃(间隔1℃)的扩增效率,筛选最适反应温度;分析分别扩增10、20、30、40 min时能够检测到的最低核酸浓度,筛选最佳反应时间。利用10倍系列稀释的肺炎支原体核酸分析MP-MCDA-LFB方法的灵敏度和检测限,利用35株非肺炎支原体菌株分析MP-MCDA-LFB方法的特异性。利用MP-MCDA-LFB方法检测80份疑似MP感染的临床样本,并与RT-PCR法检测结果进行比较,分析MP-MCDA-LFB方法的临床应用性。结果MP-MCDA-LFB能够实现对肺炎支原体CARDS毒素基因的快速检测。其最佳反应温度为63℃,最短反应时间为40 min,整个检测过程可在1 h内。MP-MCDA-LFB方法具有较高的灵敏度和特异性,其检测限低至45 ng/L,与其他临床表现相似的病原体无交叉反应,特异性为100%。MP-MCDA-LFB方法从80份临床样本中检出45份阳性样本(56.3%),检出率与RT-PCR方法一致。结论本研究建立的以CARDS毒素基因为靶标的MP-MCDA-LFB检测方法具有简单、快速、灵敏度高、特异性强的优点,在基层医疗机构和现场检测具有较好的应用潜力。
- 肖飞郑宝英徐文健伏瑾黄小兰孙春荣贾楠张裕许峥周娟王毅
- 关键词：肺炎支原体RT-PCR
- 3种多病原核酸检测技术在儿童呼吸道感染病原学检测中的对比研究被引量：4
- 2022年
- 目的比较3种多病原检测技术在呼吸道病原检测中的应用结果,为临床呼吸道感染的早期诊断提供依据。方法选取2019年9月至2019年11月首都儿科研究所附属儿童医院呼吸科收治的111例呼吸道感染病例样本,使用呼吸道病原体多重RNA双扩增法(方法1)、多重RT-PCR核酸扩增毛细管电泳法(方法2)和RNA恒温扩增微流控芯片法(方法3)3种多病原核酸检测技术检测呼吸道病原。通过四格表分析及Kappa检验一致性评价,比较3种方法对呼吸道病原的检出差异。结果方法1、2、3的病原检测出率分别为:18.92%、49.54%、38.74%。针对不同病原体指标分别进行方法学的两两分析,3种检测技术对腺病毒的检出一致性均较好,总符合率均大于95%;对副流感病毒,方法学1与方法学3的一致性较好;对呼吸道合胞病毒,方法学1与方法学2的一致性较好;对人鼻病毒/肠病毒,方法学2和方法学3检测一致性较差。结论3种多病原检测技术的结果一致性较好,但在个别指标及应用上存在一定差异,需结合临床实际情况参考使用。
- 黄小兰贾楠李正莉肖飞孙春荣伏瑾王毅崔小岱王菲
- 关键词：儿童呼吸道感染
- 儿童百日咳疑似病例400例临床特征分析被引量：6
- 2021年
- 目的总结儿童百日咳疑似病例,了解其病原,分析儿童百日咳临床特点。方法采用回顾性研究方法,对2015年6月至2019年5月在首都儿科研究所附属儿童医院感染科就诊的百日咳疑似病例临床资料进行分析。结果1.400例百日咳疑似病例完成呼吸道分泌物百日咳杆菌核酸检测,检测阳性198例(49.5%)。2.百日咳以<1岁患儿为主要发病年龄(158/198例,79.8%),有咳嗽患者密切接触史113例(113/198例,57.1%),未接种或未完成全程百白破疫苗接种共162例(162/198例,81.8%)。痉挛性咳嗽发生率73.7%(146/198例),发病至确诊病程为(17.2±12.3)d,咳嗽后发绀31.3%(62/198例),咳嗽伴呕吐17.7%(35/198例),吸气性吼声12.1%(24/198例),其他伴随症状有喘息、流涕、发热、腹泻等。3.病例分为百日咳杆菌核酸检测阳性组(198例)、其他病原组(104例)、病原未明组(98例),3组临床症状比较显示,百日咳杆菌核酸检测阳性组咳嗽后发绀发生率最高(χ^(2)=15.334,P<0.001),其他病原组喘息、呼吸困难、发热、肺部啰音、喘鸣音发生率最高(χ^(2)=79.208、38.214、16.709、44.794、42.480,均P<0.001)。百日咳杆菌核酸检测阳性组血白细胞、淋巴细胞比例及血小板均高于其他2组(F=15.812、18.198、10.819,均P<0.001)。结论儿童百日咳疑似病例感染病原多样,完善百日咳杆菌核酸检测及呼吸道病毒检测有助于明确诊断。儿童百日咳以1岁以下婴儿、未完成疫苗接种者更为常见,临床症状以痉挛性咳嗽最突出,与其他病原感染相比,咳嗽后发绀症状发生率更高。
- 黄辉邓莉张榕肖飞邓洁杨健
- 关键词：百日咳荧光定量聚合酶链反应痉挛性咳嗽儿童呼吸道病毒
- 北京市三家妇幼保健院产妇及脐带血百日咳抗体水平调查被引量：11
- 2019年
- 目的了解北京市产妇及初生新生儿血清百日咳抗体水平,为今后开展针对性干预工作提供指导.方法选取2016年12月至2017年3月北京市朝阳区、门头沟区、大兴区妇幼保健院收治的产妇及其分娩的新生儿为研究对象进行前瞻性研究,采集产妇分娩前或分娩时静脉血、新生儿生后即刻脐带血各3 ml,采用酶联免疫吸附试验法分别检测百日咳杆菌IgG抗体(pertussis bacillus IgG antibody,PER-IgG)及百日咳毒素IgG抗体(pertussis toxin IgG antibody,PT-IgG)滴度,应用χ^2检验比较3家妇幼保健院产妇静脉血和新生儿脐带血百日咳抗体水平及阳性率,对各医院配对的产妇静脉血及新生儿脐带血抗体水平进行相关分析.采用问卷调查方法收集研究对象的信息、包括百日咳患者接触史、孕前3个月至孕期咳嗽病史及百日咳疫苗接种史.结果总计收集612例产妇静脉血及其新生儿脐带血标本,其中4例产妇分娩双胎,故母血612份,脐带血616份.612例产妇孕期均无诊断百日咳病史.616份脐带血标本中,PER-IgG阳性率13.3%(82/616),PT-IgG阳性率0.5%(3/616).612份产妇静脉血标本中,PER-IgG阳性率7.7%(47/612),PT-IgG阳性率0.3%(2/612).产妇PER-IgG及PT-IgG阳性率与居住地点不相关(P值分别为0.676和0.544);产妇静脉血PER-IgG滴度与新生儿脐带血PER-IgG滴度成正相关(r=0.842,P<0.001),产妇静脉血PT-IgG滴度与新生儿脐带血PT-IgG滴度成正相关(r=0.619,P<0.001).结论北京市产妇和新生儿百日咳抗体水平及百日咳抗体阳性率均较低,产妇静脉血与新生儿脐带血百日咳抗体水平正相关,多数产妇及新生儿无百日咳免疫保护抗体.
- 李驰郭九叶关莉郭方方米荣伏瑾崔小岱肖飞马官福吕岩玉耿珊珊邓玲玲程云富冬梅王桂云
- 关键词：百日咳抗体免疫脐带血产妇
- 呼吸道病原体核酸双扩增法在儿童上呼吸道感染病原诊断中的应用研究被引量：13
- 2020年
- 目的研究新型的多重核酸检测技术在儿童呼吸道感染的诊断价值。方法急性呼吸道感染病例43例,应用双扩增法及直接免疫荧光法对患儿的鼻咽拭子和咽拭子样本进行7种常见的呼吸道病原体的核酸检测,具体为甲型流感病毒(H1N1/H3N2)、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒(PIV1/PIV2/PIV3)、腺病毒(AdvB/E)、肺炎支原体和肺炎衣原体,同时应用直接免疫荧光法检测流感病毒A型、流感病毒B型、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒1、2、3型,对于2种方法检测结果不一致的样本,进行巢式PCR法进行检测。结果双扩增法阳性检出率为53.3%,复合感染率8.8%。除去肺炎支原体和肺炎衣原体指标外,与抗原直接免疫荧光法相比,阳性检出率提高了11.1%,复合感染检出率提高了4.5%,8例不一致的样本,双扩增法和巢式PCR法的检测结果一致率高于直接免疫荧光法。结论双扩增法可同时完成7种呼吸道病原体RNA检测,敏感性高、特异性强,为临床提供全面病原学鉴别诊断信息,辅助诊断呼吸道感染性疾病,具有较高的临床应用价值。
- 黄小兰贾楠肖飞伏瑾邓莉崔小岱
- 关键词：上呼吸道感染病原体儿童
- 儿童百日咳发病特点及诊断中联合呼吸道病毒检测的临床意义分析被引量：61
- 2017年
- 目的 分析儿童百日咳的发病特点及诊断中联合呼吸道病毒检测的必要性,提高临床医生对儿童百日咳的认识,及早完善病原学诊断并规范治疗.方法 临床资料回顾性分析2015年1月至2016年12月在首都儿科研究所附属儿童医院感染门诊及住院的195例疑似百日咳患儿临床资料.结果 195例疑似百日咳患儿均完成呼吸道分泌物百日咳鲍特菌核酸检测,其中172例同时完成呼吸道7种病毒[呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、流感病毒A（INFA）、流感病毒B（INFB）、副流感病毒Ⅰ型（PIV Ⅰ）、副流感病毒Ⅱ型（PIVⅡ）、副流感病毒Ⅲ型（PIVⅢ）]直接免疫荧光检测.（1）百日咳核酸检测阳性80例（阳性率41.0％）,男47例,女33例,年龄从1月龄至10岁,全部病例均有阵发性咳嗽（100.0％）,伴痉挛性咳嗽50例（62.5％）,咳嗽后呕吐9例（11.2％）,咳嗽后青紫22例（27.5％）,咳嗽后吸气性吼声13例（16.2％）,伴明显呼吸困难4例（5.0％）,胸X线片诊断为肺炎18例（22.5％）,并发百日咳脑病1例（1.2％）;（2）完成呼吸道病毒检测的172例中病毒病原阳性69例（检出阳性率40.1％）,其中RSV阳性32例（18.6％）,PIVⅢ阳性29例（16.8％）;（3）80例百日咳核酸检测阳性病例中,66例完成了呼吸道病毒检测,阳性9例（9/66,13.6％）,其中7例为PIVⅢ混合感染,临床表现为咳嗽后青紫6例,呼吸困难2例,肺部X线片诊断为肺炎3例,临床症状较普通百日咳患儿表现突出;（4）以确诊病原为分组依据,单纯百日咳组57例,RSV感染组32例,单纯PIVⅢ感染组22例,单纯百日咳组、RSV感染组、单纯PIVⅢ感染组痉挛性咳嗽分别为35例（61.4％）、7例（21.9％）、8例（36.4％）,单纯百日咳组发生率高于其他2组（x2=12.850、4.013,P＜0.05）,3组吸气性吼声分别为11例（19.3％）、1例（3.1％）、0例,单纯百日咳组发生率高于其他2组（x2=4.596、4.932,P�
- 黄辉邓莉肖飞伏瑾邓洁王芳杨健
- 关键词：百日咳呼吸道病毒
