于瑶
- 作品数:1 被引量:3H指数:1
- 供职机构:哈尔滨医科大学附属第二医院更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- MicroRNA-575靶向抑制BLID促进非小细胞肺癌细胞的增殖和侵袭被引量:3
- 2017年
- 目的:通过体外实验探讨miR-575对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖与侵袭能力的影响及相关机制。方法:采用实时定量PCR法检测不同非小细胞肺癌细胞系中miR-575、BLID的表达;CCK-8法检测转染miR-575模拟物、抑制因子后不同时间A549细胞增殖情况的变化;Transwell法检测A549细胞的侵袭情况;Targetcan法及双荧光素酶检测miR-575对BLID 3'UTR端的靶向作用;Western blot法检测BLID蛋白的表达。结果:A549、SPC-A1、H1299、H1650等人非小细胞肺癌细胞系中miR-575的表达均显著高于永生化的人支气管上皮细胞系16HBE(P<0.001)。MiR-575模拟物转染的A549细胞miR-575的表达明显高于对照组(P<0.001),同时细胞的增殖和侵袭力增强(P<0.05);反之,miR-575抑制因子转染的A549细胞miR-575的表达显著降低,且细胞的增殖和侵袭力明显降低(P<0.01)。Targetscan法预测BLID可能是miR-575的下游靶基因,荧光素酶结果显示miR-575不仅能够有效抑制野生型BLID 3'UTR端的荧光素酶反应(P<0.01),而且能够降低BLID的蛋白表达量(P<0.01)。实时定量PCR结果显示BLID在NSCLC细胞系中均呈现显著的低表达(P<0.001),且转染BLID后,NSCLC细胞的增殖和细胞侵袭被明显抑制(P<0.05),而当miR-575与BLID共转染时,miR-575能够逆转BLID所抑制的细胞增殖和侵袭(P<0.01)。结论:在NSCLC细胞系中,miR-575的表达上调,且能够通过直接作用于下游靶点抑癌基因BLID从而促非小细胞肺癌细胞增殖及侵袭。
- 焉春华史晓东于方飞王宏伟张晓飞刘雅欣于瑶杨原荻邵玉霞
- 关键词:非小细胞肺癌