安邦 作品数:11 被引量:15 H指数:3 供职机构: 海南大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 海南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 文化科学 生物学 更多>>
橡胶树胶孢炭疽菌组蛋白乙酰转移酶CgGCN5调控致病力功能研究 2021年 胶孢炭疽菌引起的炭疽病害是造成海南省橡胶减产的主要原因之一。研究该病原菌致病力的分子机制能够为新型防控策略的研发提供理论依据。在橡胶树胶孢炭疽菌中,存在1个编码组蛋白乙酰转移酶的基因CgGCN5。在本研究中,通过同源重组原理及原生质体转化法构建了橡胶树胶孢炭疽菌CgGCN5的敲除突变株和互补菌株,并对其生长、产孢及致病力等表型进行了初步分析。结果表明,与野生型菌株相比,CgGCN5敲除突变株的生长速率、产孢能力均显著下降;并且突变株对橡胶树叶片的致病力也显著下降;进一步分析表明,突变株丧失了对玻璃纸的穿透力。与此同时,互补菌株能够恢复突变株的相应表型。以上结果表明,CgGCN5在调控胶孢炭疽菌的生长及致病力中起重要作用。 刘世科 安邦关键词:胶孢炭疽菌 组蛋白乙酰转移酶 减数分裂疑难点的教学 2019年 本文就遗传学教学中减数分裂过程中染色体数目变化、减数分裂与配子形成、减数分裂与三大遗传规律、减数分裂与染色体畸变等四个疑难点的教学进行讨论,并给出相应的例题解析,以供遗传学教学工作者参考。 刘进平 夏志辉 安邦 王倩男 牛晓磊 袁红梅 陶均 汤华关键词:遗传学教学 减数分裂 染色体数目 胶孢炭疽菌特有效应蛋白基因CgE23对产孢能力的影响 被引量:1 2020年 天然橡胶作为中国重要的工业原料和战略资源,其产量一直受到病害的影响,其中包括橡胶树炭疽病。胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)和尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum)作为橡胶树炭疽病的致病因子,均可以引起橡胶树炭疽病,但胶孢炭疽菌的致病性远强于尖孢炭疽菌的致病性。本研究通过比较胶孢炭疽菌和尖孢炭疽菌的基因组测序结果,利用RT-PCR技术扩增了一个胶孢炭疽菌特有效应蛋白基因,命名为CgE23。生物信息学分析表明,CgE23编码一条212个氨基酸的多肽,分子质量为22.7 kD,其中第1~第16位氨基酸是典型的信号肽序列,第106~第208位的氨基酸编码一个HNH保守结构域。依据同源重组和基因回补原理,构建了CgE23基因的敲除载体pCB1532-CgE23-Sur和互补载体Cgniad-CgE23-Flag-HPH,并通过PEG介导转化法将其转入到胶孢炭疽菌原生质体细胞,分别经过氯嘧磺隆(Sur)和潮霉素(HPH)抗性筛选和分子鉴定后,成功获得CgE23基因的敲除突变体ΔCgE23和基因互补突变株Res-ΔCgE23。进一步研究发现,ΔCgE23的孢子产量显著低于野生型和互补株Res-ΔCgE23,基因互补株Res-ΔCgE23的孢子产量与野生型并无明显差异。以上结果表明CgE23与胶孢炭疽菌的产孢能力有关。本研究结果可为进一步研究胶孢炭疽菌特有效应蛋白基因CgE23的功能和致病机制提供帮助。 梁晨 周芸 安邦 罗红丽关键词:基因敲除 一种农业种植用喷洒装置 本实用新型公开了一种农业种植用喷洒装置,包括箱体和水位观察窗,所述箱体的上方设置有进水口,且箱体的左右两侧下方均设置有车轮,所述箱体的内部设置有水箱,且水箱的内部左右两侧均设置有挡板,所述水箱的内部左侧下方设置有滤网,且... 赵彩悦 安邦 段郅臻 王文峰 闫浩东 唐榕锴 张泓欣 谭才统 叶蕊蕊 庞小钦文献传递 “遗传学”教学内容与科学前沿及社会热点的整合 被引量:1 2022年 遗传学是研究生物遗传和变异的科学,是生命科学中基础且重要的学科之一。“遗传学”是高等院校生物、医学及农林等相关专业的必修课之一,其教学效果如何对相关专业人才培养至关重要。为适应人才培养的需求和学科发展的特点,对“遗传学”课程进行教学改革势在必行。为了进一步激发学生的学习兴趣,增强学生的创造力,拓宽学生的知识面,提出通过将“遗传学”教学内容与科学前沿动态及社会热点有机整合,以提升课堂教学效果。 王倩男 安邦 刘进平 牛晓磊 殷红彦关键词:遗传学 教学改革 社会热点 橡胶树胶孢炭疽菌T-DNA插入突变体库的构建及插入位点分析 被引量:4 2018年 橡胶树炭疽病主要由胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)引起,是影响橡胶产量的重要病害之一。病原菌功能缺失突变体的构建是研究病菌致病分子机理的有效手段。为了获得充足的胶孢炭疽菌突变体用于解析其致病机理,本研究对根癌农杆菌介导的胶孢炭疽菌遗传转化体系进行优化。结果表明,当AGL-1农杆菌OD_(600)=0.8、胶孢炭疽菌孢子浓度为10~6个/mL、乙酰丁香酮(AS)浓度为100μmol/L时,共转化48 h,可使转化效率达到480个转化子/106个孢子。基于这个体系,构建了一个库容量为861的T-DNA突变体库。随机挑选8个转化子进行PCR验证,结果均为阳性。从突变体库中筛选出1株致病力下降的突变体,对其进行TAIL-PCR扩增插入位点侧翼序列,得到一个750 bp序列进行序列测定。通过与野生型菌株基因组进行序列比对,确定了T-DNA的插入位置。为进一步研究橡胶树胶孢炭疽菌致病分子机理提供理论参考。 张贝 安邦 罗红丽关键词:胶孢炭疽菌 T-DNA插入 侧翼序列 芒果胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)CgFAE基因对孢子产量及菌丝生长的影响 2020年 炭疽病是芒果的重要病害之一,由胶孢炭疽菌引起。阿魏酸酯酶为细胞壁降解酶,在致病机理中起着越来越重要的作用。本研究克隆了芒果胶孢炭疽菌的一个阿魏酸酯酶基因FAE,命名为CgFAE,该基因编码一个含有539个氨基酸的蛋白,分子质量约为58.3 k D。为了进一步研究该基因的功能,根据同源重组原理,构建了CgFAE基因的敲除载体pCB1532-CgFAE,通过PEG介导的原生质体转化法将其转入到胶孢炭疽菌原生质体细胞中进行同源交换,经过对转化子进行抗性筛选和分子鉴定,获得CgFAE基因的敲除突变体ΔCgfae,并对其孢子产量和菌落生长情况进行分析,发现胶孢炭疽菌CgFAE基因的敲除突变体ΔCgfae的孢子产量低于野生型菌株,菌落生长慢于野生型菌株。以上结果表明,该基因与胶孢炭疽菌的产孢能力与菌丝生长有关。 卢梦瑶 徐祥彬 孟兰环 张贝 安邦 史学群关键词:细胞壁降解酶 基因敲除 提高学生遗传学解题能力的途径 2022年 提高学生解题能力对于学生深入掌握遗传学理论和培养实际应用能力至关重要。为了提高学生的遗传学解题能力,文章提出以下五点建议:正确掌握遗传学的基本概念和原理;化隐为显,与课本知识点准确关联;分析已知条件、未知条件与解题要求,确定解题关键点;借助图解法或图示法,可以形象直观地解题;分步解题可以保证结果准确和最大程度得分。 刘进平 王倩男 安邦 陈银华 唐燕琼关键词:遗传学 解题 基于CRISPR-Cas9技术构建橡胶树胶孢炭疽菌的基因敲除系统 被引量:3 2020年 [背景]CRISPR-Cas9基因组编辑技术为病原真菌的基因敲除、敲入及定点编辑提供了新的思路。[目的]建立适用于橡胶树胶孢炭疽菌的CRISPR-Cas9基因敲除系统。[方法]通过大肠杆菌原核表达系统合成含有细胞核定位信号的Cas9蛋白;以URA5为靶标基因,预测该基因中Cas9的切割位点,并在体外转录合成相应的SgRNA;体外构建Cas9-SgRNA复合体,并将该复合体转入橡胶树胶孢炭疽菌原生质体;通过表型筛选及测序鉴定,筛选URA5的敲除突变体菌株。[结果]体外表达的Cas9蛋白与SgRNA能够形成复合体,并在体外对目标基因URA5的DNA序列进行切割;Cas9-SgRNA复合体能够成功转入橡胶树胶孢炭疽菌原生质体,并完成对URA5的敲除;敲除突变株表现出尿嘧啶缺陷表现型。[结论]建立了适用于橡胶树胶孢炭疽菌的基因敲除系统。 郭燕华 安邦关键词:基因敲除 橡胶树胶孢炭疽菌CgCntA基因功能分析 2021年 胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)基因组中有一个编码含Rieske和SRPBCC结构域蛋白的基因CgCntA。为了研究CgCntA的功能,利用同源重组原理构建了该基因的敲除突变体菌株,并进一步对其表型进行了分析。结果发现,CgCntA的缺失不影响胶孢炭疽菌的营养生长。在预先刺伤的叶片上,CgCntA缺失突变体的发病率及病斑大小与野生型菌株没有明显差异;而在完整无伤口的叶片上,CgCntA缺失突变体的发病率及病斑大小明显低于野生型菌株,说明CgCntA与胶孢炭疽菌侵染结构的形成有关。进一步在洋葱表皮观测胶孢炭疽菌的侵染动态情况,发现CgCntA缺失突变体不能形成活体寄生初级菌丝,而这可能就是其调控胶孢炭疽菌致病力的关键机制。本研究为橡胶树炭疽菌病害防治提供了科学依据,为橡胶安全生产进一步提供保障。 刘世科 刘娜 安邦关键词:胶孢炭疽菌 致病力