基于蛋白质组表达的差异性探讨二仙汤改善去卵巢大鼠学习记忆能力的作用机制。实验动物按体质量随机分为3组,即假手术组、模型组、二仙汤组,其中假手术组和模型组灌服生理盐水,二仙汤组则按生药量12 g·kg^-1灌服二仙汤,连续给药90 d后,采用Morris水迷宫考察大鼠的学习记忆能力,以Nano-LC-LTQ-Orbitrap系统检测海马蛋白,Protein Discovery软件进行蛋白质鉴定,SIEVE软件对蛋白进行相对定量分析,DIVAD数据库对差异蛋白进行生物学功能分析。结果显示,与模型组相比,二仙汤组逃避潜伏期明显缩短,穿越平台次数、平台象限的停留时间(TP)和TP与总游泳时间(T)的百分比(TP/T)均增加。与模型组相比,二仙汤组共发现216个与假手术组趋势一致的差异蛋白,主要富集于Ca^2+信号通路,Rab3A与Rab14为functional classification富集分值最高的基因组中的关键基因。结果表明,二仙汤能提高去卵巢大鼠的学习记忆能力,Ca^2+信号通路以及Ras-related protein Rab-3A,Ras-related protein Rab-14等相关差异蛋白质可能与二仙汤的干预效应有关。
目的筛选以二仙汤干预去卵巢骨质疏松大鼠后的差异表达蛋白质,探讨二仙汤防治骨质疏松的分子作用机制。方法雌性SD大鼠,按体质量随机分为3组,即假手术组、模型组、二仙汤组,其中假手术组和模型组灌胃生理盐水,二仙汤组按生药量12 g·kg^(-1)灌胃,每日1次,连续给药90 d。取大鼠股骨,运用同位素相对和绝对定量(Isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)联合纳升高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱(NanoLC-LTQ-Orbitrap)高分辨质谱技术的定量蛋白质组学方法检测骨蛋白,采用ProteinDiscovery软件进行分析和鉴定差异蛋白质,通过生物信息学分析差异表达的蛋白质功能。结果质谱分析共鉴定出862个差异蛋白,其中二仙汤组与模型组相比较,共发现82个与假手术组趋势一致的差异蛋白,上调蛋白45个,下调蛋白37个。生物信息学分析发现,差异表达的蛋白大多数属于水解酶、核酸结合类蛋白、受体类蛋白等。结论细胞色素b-245轻链、促分裂原活化蛋白激酶-1、Ras相关C3肉毒杆菌毒素底物-1等相关差异蛋白质可能是二仙汤防治骨质疏松症的作用靶点。