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李丹

作品数：1 被引量：0H指数：0
供职机构：哈尔滨医科大学附属第一医院更多>>
发文基金：哈尔滨医科大学附属第一医院科研基金黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇在体
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇真核表达质粒
  • 1篇质粒
  • 1篇细胞
  • 1篇核表达
  • 1篇PCDNA3...
  • 1篇VASOST...
  • 1篇293T细胞
  • 1篇表达质粒

机构

  • 1篇大庆油田总医...
  • 1篇哈尔滨医科大...

作者

  • 1篇关继奎
  • 1篇刘建巨
  • 1篇郑建秋
  • 1篇闫庆慧
  • 1篇王琳
  • 1篇赵秀梅
  • 1篇李丹

传媒

  • 1篇中国实验诊断...

年份

  • 1篇2011
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
真核表达质粒PcDNA3.1(+)-带有白蛋白信号肽的Vasostatin(120-180aa)的构建及其在体内外细胞中的表达
2011年
目的构建真核表达质粒PcDNA3.1(+)-带有白蛋白信号肽的Vasostatin(120-180aa)并了解其在体内外真核细胞中的表达。方法将带有白蛋白信号肽的Vasostatin(120-180aa)的逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)产物克隆至pcDNA3.1(+)真核表达载体上,经酶切鉴定及测序分析证明构建成功后,以脂质体介导法转染体外培养的真核293T细胞及注射入鼠骨骼肌细胞中,了解其在体内外真核细胞中的表达情况。结果我们获取了包含带有白蛋白信号肽的Vasostatin(120-180aa)成熟肽及HA抗原在内的一段cDNA片段,并成功地与真核表达载体PcDNA3.1(+)连接,经测序表明,其中含有的带有白蛋白信号肽的Vasostatin(120-180aa)成熟肽的序列与Genebank上报道的序列完全一致。即我们成功构建了真核表达质粒PcDNA3.1(+)-带有白蛋白信号肽的Vasostatin(120-180aa)。之后,在转染了该质粒的体外真核293T细胞的上清液中及骨骼肌注射了该质粒的鼠血液中,利用Western-blot法检测到了目的基因的蛋白质。结论带有白蛋白信号肽的真核表达质粒PcDNA3.1(+)-Vasostatin(120-180aa)增强了蛋白分泌表达能力,这为进一步应用该质粒治疗全身新生血管类病奠定了一定基础.
刘建巨关继奎王琳赵秀梅郑建秋李丹闫庆慧
关键词：293T细胞真核表达
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