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文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇登革病毒
  • 1篇荧光
  • 1篇原核表达
  • 1篇免疫
  • 1篇免疫血清
  • 1篇免疫荧光
  • 1篇NS1
  • 1篇NS1蛋白
  • 1篇病毒

机构

  • 1篇成都生物制品...

作者

  • 1篇康庄
  • 1篇李立
  • 1篇张勇侠
  • 1篇丛聪
  • 1篇代云见
  • 1篇刘兰军
  • 1篇李桂华
  • 1篇陈宗香

传媒

  • 1篇微生物学免疫...

年份

  • 1篇2018
2 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
Ⅱ型登革病毒NS1蛋白的表达及其免疫血清的制备
2018年
目的原核表达、纯化II型登革病毒NS1A蛋白(NS1蛋白1~180氨基酸即DENV2 NS1A),将其免疫动物制备免疫血清并鉴定。方法构建重组融合质粒p ET22b-p64K-L-DENV2 NS1A,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG低温诱导表达。表达的融合蛋白经Hitrap Talon crude柱亲和层析纯化后,免疫雌性日本长耳兔获得抗DENV2 NS1A兔抗血清,用Western blot和免疫荧光检测免疫血清对重组麻疹病毒MV_(S191)-DENV2 NS1 6Xhis的识别和结合特性。结果重组融合质粒p ET22b-p64K-L-DENV2 NS1A经双酶切和测序证明构建正确。表达的重组融合蛋白相对分子质量为100 000,纯化后蛋白纯度在85%以上,免疫获得的抗DENV2 NS1A兔抗血清可识别重组病毒MV_(S191)-DENV2 NS1 6XHis表达的DENV2 NS1蛋白。结论原核表达并纯化了DENV2 NS1A蛋白,建立了基于NS1蛋白的重组病毒MV_(S191)-DENV2 NS1 6XHis的Western blot和免疫荧光检测方法,为登革热疫苗研制中重组病毒MV_(S191)-DENV2 NS1 6XHis的质检奠定了基础。
张勇侠高雅丽康庄丛聪罗心梅代云见陈宗香李立李桂华刘兰军
关键词:登革病毒NS1蛋白原核表达免疫荧光
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