何志敏
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
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- 与CRY1相互作用的转录因子蛋白的筛选
- 2016年
- 拟南芥CRY1(cryptochrome1)通过蛋白相互作用启动蓝光信号的传导,从而促进植物光形态建成。为深入研究CRY1介导蓝光信号传导的机制,以CRY1为诱饵蛋白,通过酵母双杂交系统的营养缺陷型试验、液体显色试验、分段相互作用试验方法,从拟南芥转录因子酵母库中筛选与其相互作用的转录因子蛋白。结果表明,通过营养缺陷型筛选试验以及以ONPG为底物的液体显色试验初步获得与CRY1相互作用的41个转录因子蛋白;选取与CRY1相互作用蓝光依赖程度较高或酶活性高的转录因子以CPRG为底物的液体显色试验进行进一步验证,发现选取的转录因子蛋白与CRY1的相互作用具有蓝光依赖性且随蓝光处理时间的延长相互作用强度增强;CRY1各分段与转录因子蛋白相互作用试验结果表明转录因子SPL3和IDD4主要与CRY1的N端相互作用,与C端的相互作用比较微弱,但是SPL3与CRY1 C端的相互作用具有蓝光特异性而IDD4与CRY1 C端的蓝光特异性相互作用不明显。
- 何志敏冯盼盼荣朵艳赵小英刘选明
- 关键词：CRY1酵母双杂交转录因子拟南芥
- 双基因表达载体及其应用
- 本发明公开了三个双基因植物表达载体，编号为pDT1、pDT7和pDT7G，该系列载体从pCAMBIA3301-<i>ACTIN2</i>::3xHA-LUC改造而来，能通过一次植物转化简单、可靠、...
- 刘选明何志敏赵小英阎晋东钟鸣李新梅林辰涛
- 文献传递
- 拟南芥转录因子HB22与CRY1相互作用研究被引量：7
- 2013年
- 通过酵母双杂交的方法,从拟南芥转录因子库中筛选出了6个与CRY1相互作用的转录因子.为了测定其中的HB22与CRY1相互作用的强度,采用了ONPG与CPRG两种方法对其β-半乳糖苷酶活性进行了分析.结果显示在蓝光光强为50μmol/m2s,孵育时间为4 h的情况下,蓝光与暗处理情况下的β-半乳糖苷酶活性比值分别为1.668和2.18.进一步设置蓝光处理时间及光强梯度实验数据显示,在蓝光光强为50μmol/m2s孵育时间为3 h时,二者相互作用强度达到最高.说明HB22与CRY1的相互作用具有蓝光响应.对蓝光处理不同时间的野生型col-4与cry1缺失突变体的材料进行HB22基因的定量PCR分析,发现拟南芥cry1缺失突变体中该基因的表达量比野生型中高,在蓝光处理2 h时,缺失突变体中表达量为野生型中的6倍左右.说明CRY1可能介导蓝光抑制HB22基因表达.
- 曾婷何志敏段桂芳赵小英唐冬英刘选明
- 关键词：酵母双杂交CRY1转录因子蛋白质相互作用
- 拟南芥转录因子TCP2与CRY1相互作用的遗传学与生化分析
- 光通过多种光受体调节植物的生长发育，这些光受体包含光敏色素与隐花色素。拟南芥隐花色素CRY1(CRYPTOCHROME1)作为蓝光信号受体蛋白，已有许多的研究报道了其在植物蓝光信号转导途径方面的功能，如抑制下胚轴的伸长，...
- 何志敏
- 关键词：植物遗传学转导机制
- 双基因表达载体及其应用
- 本发明公开了三个双基因植物表达载体，编号为pDT1、pDT7和pDT7G，该系列载体从pCAMBIA3301‑<I>ACTIN2</I>::3xHA‑LUC改造而来，能通过一次植物转化简单、可靠、快速、高效地在植物中表达...
- 刘选明何志敏赵小英阎晋东钟鸣李新梅林辰涛
- 文献传递
