宁杨
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
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- 10058-F4诱导宫颈癌CaSki细胞凋亡及其机制探索被引量：2
- 2017年
- 目的探讨10058-F4诱导宫颈癌CaSki细胞凋亡的现象及机制。方法用CCK8的方法检测不同浓度的10058-F4和10058-F4作用不同时间对CaSki细胞生长的影响;流式细胞术检测10058-F4对CaSki凋亡率的影响;Western blot方法检测10058-F4的药物有效性(c-MYC的表达下调)及对CaSki细胞的凋亡诱导作用;Western blot和RT-PCR的方法检测线粒体蛋白的表达情况,流式细胞术检测细胞ROS产生。结果通过CCK8实验检测出10058-F4对CaSki的增殖抑制具有时间依赖性和浓度依赖性,始于第48小时,IC50为122μmmol/L。用122μmmol/L的10058-F4处理CaSki细胞48h,通过流式细胞术检测凋亡发现处理组细胞出现明显凋亡(52%),同时Western blot检测发现剪切型PARP表达量上调。Western blot和RT-PCR检测发现122μmmol/L的10058-F4处理CaSki细胞48h可以明显降低线粒体氧化磷酸化蛋白(NDUFS1、SDHA、UQCRC2、COXIV、OSCP)的表达,引起线粒体活性氧(ROS)产生明显增高,从而诱导细胞凋亡。结论 10058-F4可以通过降低线粒体氧化磷酸化蛋白的表达引起ROS产生来诱导CaSki细胞凋亡。
- 陈瑛宁杨黄磊李莉王玉兰李瑞田训李贺梅张庆华
- 关键词：宫颈肿瘤细胞凋亡线粒体活性氧
- 转化生长因子-β对人卵巢癌细胞系SK-OV-3活性氧簇表达的影响及其机制被引量：2
- 2017年
- 目的观察转化生长因子-β(TGF-β)对人卵巢癌细胞系SK-OV-3活性氧簇(ROS)表达的影响,并探讨其可能机制。方法取对数生长期SK-OV-3细胞,随机分为两组,观察组用2 mL培养液+2μL无血清DMEM配制的5μg/mL TGF-β培养(最终浓度为5 ng/mL),对照组直接加2 mL培养液。流式细胞仪检测细胞内总的活性氧簇(ROS)产生及线粒体来源的ROS,实时荧光定量PCR检测细胞上皮细胞-间充质转化(EMT)变化各指标、线粒体呼吸链复合体Ⅲ组分mRNA。结果观察组及对照组总ROS产生量分别为3 159±42.92、1 062±24.41,两组比较,P<0.05。观察组及对照组细胞内线粒体来源ROS产生量分别为1 254±29.04、1 039±17.32,两组比较,P<0.05。观察组E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、ZEB1分别是对照组的0.200 0、6.739 8、4.487 9、1.639 5倍,P均<0.05。观察组CYC1、TTC19、UQCRC1、UQCRC2、UQCR10、UQCRB、UQCRFS1、UQCRH、UQCRQ mRNA表达水平较对照组改变倍数分别为0.89、1.04、1.09、0.87、1.17、1.18、0.92、1.09、1.07倍,P均>0.05。观察组CYC1、TTC19、UQCRC1、UQCRC2、UQCRFS1蛋白水平较对照组改变倍数分别为1.01、0.97、1.07、0.99、1.03倍,P均>0.05。结论TGF-β诱导细胞内总的ROS表达增加,但过量ROS并非来源于线粒体,机制可能是通过调控细胞内氧化-抗氧化平衡系统的关键酶从而改变细胞内的ROS水平。
- 李瑞宁杨田训李莉王玉兰曾珍龚丹妮黄磊李贺梅张庆华
- 关键词：转化生长因子-Β人卵巢癌细胞系活性氧簇
- HIF-1α和Rac1在宫颈鳞状细胞癌中的表达及意义被引量：3
- 2016年
- 目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和Ras相关C3肉毒杆菌毒素底物1（Rac1）在宫颈上皮内瘤变（CIN）和鳞状细胞癌中的表达以及临床意义。方法采用免疫组织化学法检测正常宫颈组织20例、宫颈CIN42例（CINI级12例，CINⅡ-Ⅲ级30例）、宫颈鳞状细胞癌58例（高分化15例，中分化24例，低分化19例）中HIF-1α和Rac1蛋白的表达情况，以分析其表达与临床病理特征的关系，并结合临床资料进行分析。结果HIF-1α蛋白在正常宫颈黏膜组织中的阳性表达率为0％（0／20），CINI级组织阳性表达率为16．7％（2／12），CINⅡ～Ⅲ级组织阳性表达率为56．7％（17／30），宫颈鳞状细胞癌组织阳性表达率为81．0％（47／58），其中高分化阳性表达率53．3％，中分化阳性表达率83．3％，低分化阳性表达率100％。HIF-1α蛋白在宫颈鳞状细胞癌发生发展中的表达依次升高，差异具有统计学意义（P〈0．05）。且宫颈鳞状细胞癌组织中HIF-1α蛋白表达与其组织学分级、TNM分期及淋巴结转移有关（P〈0．05）。Rac1蛋白表达在正常宫颈黏膜组织中的阳性表达率为0％（0／20），宫颈CINI级组织阳性表达率为8．3％（1／12），宫颈CINⅡ～Ⅲ级组织阳性表达率为53．3％（16／30），宫颈鳞状细胞癌组织阳性表达率为77．6％（45／58），其中高分化阳性表达率60．0％，中分化阳性表达率73．0％，低分化阳性表达率94．7％。Rac1蛋白在宫颈癌发生发展中的表达依次升高，差异具有统计学意义（P〈0．05）。且宫颈鳞状细胞癌组织Rac1蛋白表达与其组织学分级、TNM分期及淋巴结转移有关（P〈0．05）。HIF-1α蛋白的阳性表达率与Rac1蛋白的阳性表达率呈正相关（r=0．3，P〈0．05）。结论HIF-1α及Rac1联合检测蛋白表达有助于判断宫颈鳞状上皮肿瘤的病变程度及预后。
- 陈瑛敖启林黄磊宁杨李莉王玉兰李瑞田训李贺梅张庆华
- 关键词：宫颈鳞状细胞癌缺氧诱导因子-1Α
