张文凯
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- MiR-31下调对骨自然衰老过程中骨髓间充质干细胞生物学功能的影响
- 何小宁张文凯廖立付欣张磊磊金岩
- 关键词：自然衰老骨质疏松骨髓间充质干细胞
- 都江堰市地震灾区人群应激口腔黏膜病损状况调查
- 李刚郭静戴娟芦帅张文凯刘
- 关键词：口腔黏膜损伤口腔健康调查地震灾区应激
- 人ALPL基因慢病毒载体的构建及鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的:构建肝/骨/肾型碱性磷酸酯酶(alkaline phosphatase,liver/bone/kidney,ALPL)基因慢病毒表达载体并观察其在骨髓间充质干细胞(BMMSC)中的表达情况,为进一步研究ALPL基因功能提供基础工具。方法:将PCR扩增的人ALPL基因片段和pENTR-2B入门质粒载体的双酶切产物进行连接后,转化感受态细胞;再将所得的pENTR-2B-ALPL入门质粒与Plenti6.3/V5-DEST载体进行重组,并经DNA测序鉴定后,转染GP2-293T细胞,制备慢病毒颗粒;最后用含Plenti6.3-ALPL表达载体的病毒感染BMMSC,并通过ALP染色、RT-PCR、Western blot检测ALPL基因和组织非特异性碱性磷酸酶(tissue-nonspecific alkaline phosphatase,TNAP)的表达。结果:PCR和测序证实人ALPL基因正确插入慢病毒载体;ALP染色、RT-PCR、Western blot检测结果显示,人ALPL慢病毒过表达质粒及相应病毒颗粒能在BMMSC中有效过表达ALPL基因。结论:成功建立ALPL慢病毒表达系统,并为后期深入了解TNAP功能打下了基础。
- 陈哲张立强张文凯付欣轩昆金岩
- 关键词：慢病毒表达载体骨髓间充质干细胞
