- 非酒精性脂肪肝病小鼠模型的建立及评价
- 2016年
- 目的 运用饲料及药物进行三种不同的干预方式,造成非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠模型,比较三种模型的特点,为NAFLD药物筛选模型选择提供实验基础.方法 昆明鼠３５只分成正常对照组,高脂饲料组,高糖高脂饲料组,高糖高脂加氢化可的松组,实验４周,观察体重变化、活动情况、肝指数、检测血清生化指标、肝脏病理学检测等.结果 相比正常对照组,高脂组体重增高最明显,高脂高糖组次之,高糖高脂氢化可的松体重低于正常对照组;三种模型肝指数均高于正常组;血清血糖、血甘油三酯水平增高,肝脏甘油三酯明显高于正常对照组,三组模型小鼠肝脏病理切片染色均出现肝脏脂肪变性,以高糖高脂氢化可的松组最严重.结论 不同处理方式都可以制备NAFLD模型,但其对肝脏损伤程度不同,为NAFLD分子机制研究及药物筛选奠定了实验基础.
- 吴利春涂浩段丽熊海容石辰吴雪婷刘朝奇
- 关键词：非酒精性脂肪肝病高脂饮食果糖动物模型
- miR-350-3p/IL-6/STAT3信号通路在脂肪性肝纤维化进展中的作用被引量：5
- 2020年
- 目的探讨miR-350-3p/IL-6介导的STAT3/c-myc信号通路在脂肪性肝纤维化进展中的作用及相关机制。方法20只Balb/c雄性小鼠随机分为正常对照组和HFD+CCl4组,正常对照组予以普通饮食,HFD+CCl4组予以高脂高糖饮食并采用腹腔注射2%CCl4油溶液,每周2次,持续5周后处死小鼠,检测血清相关指标,HE及Masson染色观察肝组织形态及纤维化改变,免疫组化检测ki-67表达情况,qRT-PCR检测miR-350-3p、IL-6及肝细胞异常增生相关指标,Western blot检测STAT3/cmyc表达情况。结果与正常对照组比较,HFD+CCl4组小鼠肝指数增加,血清中ALT与TG含量显著增加;HE及Masson染色显示HFD+CCl4组小鼠肝脏脂质变性明显,并出现纤维沉积;在m RNA水平上,HFD+CCl4组中miR-350-3p、IL-6显示良好的负调控关系;肝细胞异常增生相关基因PDGFRb、c-myc、TGF-β、Epcam、CD133、CD44、CD105的表达量明显高于正常对照组;Western blot结果显示,HFD+CCl4组中p-STAT3及c-myc表达水平较正常对照组明显增加。结论高脂饮食联合CCl4能够诱导肝脏发生纤维化病变且有肝细胞异常增生,其可能是通过miR-350-3p/IL-6介导的STAT3/c-myc信号通路发挥作用。
- 李聪刘小慧李道俊段丽熊海容伍学翠何毓敏张长城袁丁刘朝奇
- 关键词：脂肪性肝纤维化
- 原花青素B2通过Akt/FoxO4通路拮抗内皮细胞衰老的实验研究被引量：5
- 2018年
- 研究原花青素B2(PCB2)对内皮细胞衰老的调控作用,探讨其可能的分子机制。以棕榈酸(PA)50μmol/L处理胰岛内皮细胞MS-1建立细胞衰老模型,根据细胞活力、β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色以及细胞周期相关基因的表达来评估内皮细胞衰老;同时加入PCB2干预,检测衰老相关指标及Akt/FoxO4通路的蛋白表达水平的变化情况。MS-1细胞经PA处理后SA-β-Gal阳性细胞增加,细胞周期相关基因p53和p21上调显示细胞周期阻滞在G0/G1期,表明PA处理后能诱导内皮细胞衰老发生;经PCB2(50μg/mL)干预后能够有效改善PA诱导的细胞衰老。相比于正常组,经PA处理后抑制Akt活化,其表达由胞核转至胞浆,在胞核中表达明显减少;导致Akt下游信号FoxO4的磷酸化降低,使其在细胞核中明显增加;而应用PCB2(50μg/mL)处理后能有效逆转这一现象;PCB2对棕榈酸诱导的内皮细胞衰老有明显的保护作用,其可能通过Akt/FoxO4信号通路发挥调控作用。
- 熊海容段丽李聪魏承亮韩美文张长城袁丁刘朝奇
- 关键词：细胞衰老内皮细胞AKT
- 原花青素B2经Akt/FoxO4通路干预内皮细胞衰老的实验研究
- 原花青素B2(procyanidin B2,PCB2)是一种纯天然的多酚化合物,其具有显著的抗氧化活性,参与多种代谢性相关疾病如糖尿病、脂质代谢、炎性疾病、癌症、氧化应激及衰老等的调控,具有多种药理学活性。本实验拟应用高...
- 熊海容李聪伍学翠刘朝奇
- 关键词：内皮细胞AKT细胞衰老
- 非酒精性脂肪肝病小鼠模型的建立及评价被引量：2
- 2017年
- 目的运用饲料及药物进行3种不同的建模方式,造非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠模型,比较3种模型的特点,为NAFLD药物筛选提供实验基础。方法昆明鼠35只随机分成正常对照组(8只)、高脂饲料组(9只)、高糖高脂饲料组(9只)、高糖高脂饲料加氢化可的松组(9只)。实验4周后,观察各组小鼠体质量、活动情况、肝指数、血清生化指标、肝脏病理学等变化情况。结果相比正常对照组,高脂饲料组体质量增高最显著,高糖高脂饲料组次之,高糖高脂饲料加氢化可的松组体质量低于正常对照组(P<0.05);3种模型肝指数均高于正常组(P<0.05);血糖、血三酰甘油水平增高,肝脏三酰甘油显著高于正常对照组(P<0.05)。3组模型小鼠肝脏病理切片染色均出现肝脏脂肪变性,其中高糖高脂饲料加氢化可的松组肝脏脂肪变性最严重,为最优建模方法。结论不同处理方式都可制备NAFLD模型,但肝脏损伤程度不同。
- 吴利春涂浩段丽熊海容石辰吴雪婷刘朝奇
- 关键词：非酒精性脂肪肝病高脂饮食动物模型
- 基于CD36-NLRP3信号通路研究竹节参皂苷Ⅳa改善脂肪性肝病的实验研究
- 目的：非酒精性脂肪肝病的发病率逐年上升，其临床病理表现为单纯性脂肪肝及由此进展演变的脂肪性肝炎、肝纤维化及肝硬化的综合征，其中最关键的发展环节是脂肪性肝炎。对于该病理阶段的机制与防治的研究显得尤为重要。基于此病理阶段，本...
- 熊海容
- 关键词：非酒精性脂肪性肝炎
- 竹节参皂苷Ⅳa调节miR-17-5p/MFN2信号通路改善非酒精性脂肪性肝炎被引量：10
- 2020年
- 该文研究了竹节参皂苷Ⅳa(Panax japonicus saponinⅣa,SPJ-Ⅳa)通过miR-17-5p/mitofusin 2(MFN2)信号通路改善非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)的作用。采用高脂饮食(high-fat diet,HFD)联合CCl4诱导Balb/c雄性小鼠NASH模型,并采用不同剂量SPJ-Ⅳa进行干预,处理5周后留取血清及肝脏,称量体质量及肝重,计算肝指数,检测血清生化指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、甘油三酯(TG)及葡萄糖(Glu)的含量,HE及Masson染色法观察肝脏形态学变化及纤维化病变情况,Real-time PCR法检测脂代谢相关基因[脂肪酸合成基因(fatty acid synthase gene,FASN)、碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate response element binding protein,chREBP)、乙酰辅酶A羧化酶1(acetyl CoA carboxylase 1,ACC1)、肝X受体(liver X receptor,LXR)]、炎症因子白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)、miR-17-5p及MFN2的表达情况,Wes-tern blot法检测MFN2蛋白表达水平。结果显示,与正常组相比,HFD+CCl4组中肝指数明显增加,生化指标ALT,TG,Glu的含量明显增高;形态学结果显示有大量脂肪空泡出现,表现出明显的脂肪变性,并可见明显的胶原纤维沉积;脂代谢相关基因、炎症因子IL-6和IL-1β及miR-17-5p mRNA表达水平明显增加,MFN2 mRNA表达水平明显降低;MFN2蛋白水平降低。经SPJ-Ⅳa干预后,生化指标ALT,TG,Glu的含量有所下降,脂肪变性有所减轻,胶原纤维沉积有所减少,脂代谢相关基因、炎症因子IL-6和IL-1β及miR-17-5p mRNA表达水平有所下降,MFN2 mRNA表达水平有所升高;MFN2蛋白水平也升高。该研究结果表明,miR-17-5p/MFN2信号通路可能参与了NASH的发生发展,且SPJ-Ⅳa对NASH有保护作用,其机制可能与调控miR-17-5p/MFN2信号通路有关。
- 李聪刘小慧熊海容李晓晓罗悦刘朝奇
- 关键词：非酒精性脂肪性肝炎CCL4MFN2
- 肿瘤标志物细胞外microRNA研究进展被引量：2
- 2017年
- 细胞外microRNA(extracellular microRNA)是由细胞释放或分泌的一类microRNA,它能通过多种方式进入体液。随着对microRNA生物学活性研究的深入,体液中的细胞外microRNA有望作为肿瘤早期诊断、预后及治疗效果的新标志物受到关注。本文对细胞外microRNA近期的研究进展进行综述。
- 张娟侯露熊海容杨凡刘朝奇
- 关键词：生物标志物肿瘤
- 原花青素B2通过AKT-FoxO3拮抗脂质诱导的小鼠肝细胞衰老研究被引量：2
- 2019年
- 目的研究原花青素B2(PCB2)对小鼠肝细胞衰老的调控作用,探讨其可能的分子机制。方法将小鼠胚胎肝细胞株BNL CL.2以梯度浓度棕榈酸(PA)及PCB2处理后,采用噻唑蓝(MTT)检测肝细胞活力,确定PA及PCB2最适浓度。将BNL CL.2细胞分为对照组、PA组和PCB2组,其中PA组用于建立肝细胞衰老模型,PCB2组用最适浓度的PCB2和PA共同作用于细胞。以β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测细胞衰老情况,反转录实时定量PCR(RT-qPCR)检测细胞周期相关基因表达情况,免疫荧光检测细胞丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-叉头转录因子3(AKT/FoxO3)通路的蛋白表达情况。结果MTT筛选得到PA最适浓度为100μmol/L,PCB2为12.5μg/ml,并用于后续实验。SA-β-Gal染色结果显示,PA组染色阳性细胞数较对照组明显增加;经PCB2处理后,染色阳性细胞数较PA组减少,差异有统计学意义(P<0.001)。RTqPCR结果提示,与对照组比较,PA处理后细胞周期相关基因CDK2表达下调,p21表达上调;经PCB2干预后,CDK2表达较PA组增加,p21表达较PA组下降,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光检测结果显示,与对照组比较,PA处理后AKT表达在胞核中减少,在胞质中增加,FoxO3在胞核中明显增加;与PA组比较,PCB2处理后AKT表达在胞核中增加,在胞质中减少,FoxO3在胞核中明显减少。结论PCB2对PA诱导的小鼠肝细胞衰老具有明显保护作用,其机制可能是通过AKT/FoxO3信号通路发挥调控作用。
- 李聪段丽熊海容周永芹袁成福刘朝奇
- 关键词：细胞衰老AKT
- 竹节参总皂苷通过调节miR-199-5p改善小鼠脂肪性肝病的实验研究被引量：12
- 2018年
- 研究竹节参总皂苷（total saponins of Panax japonicas,TPSJ）对高脂高糖诱导小鼠脂肪性肝病的作用,并探究其可能的调控机制。将40只昆明小鼠（雄性）随机分为正常组,模型组,TPSJ低剂量组,TPSJ高剂量组。采用高脂高糖饲料模拟脂肪肝模型,同时采用竹节参药物低剂量100 mg·kg-1,高剂量200 mg·kg-1进行干预,喂养4周后处理动物收集血清和肝脏并检测相关生化指标。HE染色观察小鼠肝脏组织病理学变化;RT-PCR与RT-q PCR法检测肝组织中miR-199-5p,VEGFa,HGF,c-Met的转录水平;激光共聚焦显微镜法检测c-Met蛋白的表达情况。结果显示,模型组的小鼠血清ALT,TC的水平明显高于正常组,HE染色发现模型组肝组织表现出脂肪样变,脂质空泡较多,脂质明显沉积,以上现象提示脂肪肝模型成立。经过TPSJ不同剂量的干预后肝脏组织病理学变化明显改善,脂质沉积减少,肝细胞排列较为紧密;同时TPSJ能明显降低miR-199-5p的表达以及促进c-Met,HGF的表达。TPSJ可能通过调节miR-199-5p/HGF-c-Met的信号通路发挥对小鼠脂肪肝的干预作用。
- 熊海容李聪何春喜何毓敏袁成福王婷张长城袁丁刘朝奇
- 关键词：竹节参总皂苷非酒精性脂肪性肝病HGFC-MET
