王一帆 作品数:8 被引量:16 H指数:3 供职机构: 山东省农业科学院 更多>> 发文基金: 作物遗传与种质创新国家重点实验室开放课题 山东省科技攻关计划重大科技专项 山东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
谷子抗逆基因SiRLK35及编码蛋白与应用 本发明公开了一种谷子抗逆基因SiRLK35及编码蛋白与应用。本发明在谷子中分离获得类受体蛋白激酶SiRLK35,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,该基因编码蛋白产物属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。本发明对该基因在逆境... 刘炜 王一帆 潘教文 王庆国 李臻文献传递 谷子类受体蛋白激酶基因SiRLK35的克隆及原核表达 被引量:5 2016年 本研究以"豫谷1号"c DNA为模板,通过PCR技术获得类受体蛋白激酶基因SiRLK35(NCBI登录号:XM_004956247.2)的全长序列。生物信息学分析显示,该基因编码蛋白由392个氨基酸残基构成,包含一个S_TKc保守结构域以及一个TFS2N结构域,含3个跨膜结构域,N端有信号肽。SiRLK35基因经Bam HⅠ、SalⅠ双酶切后,利用p ET-28a构建原核表达载体,转化大肠杆菌菌株BL21(DE3),经0.5 mmol/L IPTG于25℃诱导12 h后,在44.6 k D处得到一明显诱导表达蛋白条带,表达产物与预期相符,证明SiRLK35基因可在大肠杆菌中诱导表达。该结果为进一步研究SiRLK35基因功能奠定基础。 王一帆 李臻 潘教文 王庆国 刘炜关键词:谷子 类受体蛋白激酶 原核表达 手动水稻单株脱粒机 本实用新型公开了手动水稻单株脱粒机,其结构包括机体和支架,所述机体设置在支架上,所述机体为内部空腔的壳体,机体的上部设有脱粒口,下部设有出粒口,机体内腔上部设有脱粒齿,所述脱粒齿两端通过轴承组件与机体侧部连接,所述机体的... 潘教文 刘炜 王庆国 李臻 姚方印 王一帆 李颖秀文献传递 谷子胁迫诱导型启动子SiRLK35P的分离及生物信息学分析 被引量:3 2017年 本研究以谷子"豫谷1号"为材料,结合相关数据库检索,以谷子幼苗提取的基因组DNA为模板,经PCR特异扩增SiRLK35上游1 893 bp调控序列,命名为SiRLK35P。结合PLACE数据库,对SiRLK35P进行生物信息学分析,并对其诱导表达情况进行了预测。结果显示,SiRLK35P中含有ABRELATERD1(ACGT)、GCCCORE(GCCGCC)等多种顺式作用元件,部分元件已知与不同逆境胁迫及应答相关,预测该启动子可能参与谷子胁迫响应,调控下游基因在胁迫等逆境条件下的表达水平,从而对谷子在胁迫下的应答进行调控。该研究为定向改良谷子抗逆特性、培育谷子抗逆新品种提供了候选材料。 王一帆 潘教文 李臻 王庆国 李颖秀 管延安 刘炜关键词:谷子 启动子 顺式作用元件 抗逆 水稻蛋白激酶基因启动子OsSRLp的分离及特性分析 被引量:2 2018年 【目的】为研究水稻中I型酪蛋白激酶基因Os SRL启动子的结构及功能,【方法】以水稻中花11基因组DNA为模板,经PCR扩增获得基因上游约1600 bp序列,命名为启动子Os SRLp。应用PLACE在线软件,分析序列中的顺式作用元件,同时构建含有GUS报告基因的植物表达载体,转化水稻。【结果】Os SRL为组成型表达,Os SRLp含有调控生殖发育、激素应答及逆境响应等多种顺式作用元件。Os SRLp驱动的GUS报告基因在根、茎中均有所表达,在小穗中表达丰度较高,而在其他组织中表达丰度较低。【结论】Os SRLp为组成型启动子,其下游调控基因Os SRL可能参与水稻发育及生殖过程。 王庆国 王莹莹 李臻 潘教文 王一帆 李颖秀 刘炜关键词:GUS活性 谷子抗逆基因SiRLK35及编码蛋白与应用 本发明公开了一种谷子抗逆基因SiRLK35及编码蛋白与应用。本发明在谷子中分离获得类受体蛋白激酶SiRLK35,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,该基因编码蛋白产物属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。本发明对该基因在逆境... 刘炜 王一帆 潘教文 王庆国 李臻文献传递 AhSOS2转基因水稻基因表达及抗逆性分析 被引量:2 2017年 SOS2(salt overly sensitive 2)作为植物中一类重要的耐盐相关基因,在调控细胞内离子平衡、参与植物对盐害的响应及适应过程中具有重要作用。前期已从花生叶片中分离到基因AhSOS2(Gen Bank登录号为HG797656),其属于SOS2类基因,编码446个氨基酸,为丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。本研究以该基因的转基因水稻株系SOS2-1、SOS2-2、SOS2-3、SOS2-7为材料进行荧光定量PCR,分析基因转录表达情况。结果发现,AhSOS2基因在四个转基因株系中均有表达,且在株系SOS2-3中的表达量高于其它株系。对转基因水稻株系进行250 mmol/L Na Cl处理后,检测其相对电导率和脯氨酸、MDA含量,以及抗氧化酶SOD、POD、CAT、APX酶活等胁迫相关的生理指标。结果显示,胁迫条件下,转基因水稻株系相对电导率低于对照,参与胁迫响应的酶活高于对照,说明AhSOS2对提高受体材料的抗盐及抗胁迫能力具有一定作用。该结果为进一步研究AhSOS2及SOS2基因家族功能、解析其对盐害等逆境的适应机制奠定基础。 李颖秀 张国嘉 王莹莹 王庆国 王一帆 李臻 潘教文 刘炜关键词:水稻 生理指标 逆境 谷子SiRLK35基因克隆及功能分析 被引量:7 2017年 为探讨谷子(Setaria italica L.)耐旱抗逆机制,解析类受体蛋白激酶(receptor like protein kinase,RLKs)基因功能,进而为培育谷子抗逆新品种提供依据,本文以干旱处理的谷子"豫谷1号"为材料,通过i TRAQ技术筛选到1个干旱响应的类受体蛋白激酶基因,命名为SiRLK35。以谷子RNA反转录的单链cDNA为模板,经PCR扩增获取SiRLK35基因全长序列。应用qRT-PCR方法,对SiRLK35在NaCl、PEG、ABA、GA、Me JA等不同处理下的表达模式进行分析。进一步构建基因原核表达载体pET28a-SiRLK35,结合斑点法对SiRLK35的抗盐能力进行初步评价。同时构建过表达载体p CAMBIA1301P-SiRLK35转化水稻,并对转基因植株抗盐能力进行检测。结果显示:胁迫及激素处理均可不同程度诱导SiRLK35基因的表达;斑点法研究结果显示,在相同NaCl浓度的LB平板上,含有SiRLK35基因的原核表达载体的大肠杆菌菌株生长状态较阴性对照好,SiRLK35具有一定的抗盐能力;获得的转SiRLK35基因水稻植株对盐胁迫的耐受性高于对照。SiRLK35基因对不同胁迫均可以产生响应,但对盐胁迫的响应较为明显,推测该基因可能在谷子的抗盐及抗逆过程中发挥作用。 王一帆 李臻 潘教文 李颖秀 王庆国 管延安 刘炜关键词:谷子 类受体蛋白激酶