胡水清
- 作品数：2 被引量：38H指数：2
- 供职机构：上海交通大学医学院上海市免疫学研究所更多>>
- 发文基金：上海市教育委员会重点学科基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ConA诱导小鼠肝损伤模型的发病机制被引量：36
- 2007年
- 刀豆蛋白A(Con A)诱发的小鼠急性肝损伤是T淋巴细胞介导的肝损害模型之一,很好地模拟了人类病毒性肝炎、自身免疫性肝病等疾病。其特征是在很短时间内小鼠肝脏有大量中性粒细胞、巨噬细胞、T细胞等炎症性细胞浸润,同时血液中转氨酶水平大量升高。大量的促炎细胞因子(白介素4,肿瘤坏死因子α和γ-干扰素等)、趋化性因子(骨桥蛋白)、趋化因子受体(趋化因子受体5)参与了该模型的发病过程。此外,凋亡机制在该模型的肝脏损伤中也发挥了非常重要的作用。该文就这一肝损害模型的特点和发病机制的研究进展作综述。
- 胡水清黄依雯秦伟柳娟徐辰迪孔方圆张雁云
- 关键词：刀豆蛋白A转氨酶淋巴细胞肝炎
- 小鼠Foxp3融合蛋白的原核表达及纯化被引量：2
- 2007年
- 目的克隆小鼠Foxp3(MFoxp3)基因,构建含该基因的原核表达载体,并表达、纯化出小鼠的Foxp3融合蛋白。方法RT-PCR方法从小鼠淋巴细胞扩增出小鼠Foxp3基因,连入T Easy Vector进行测序,然后将序列正确的小鼠Foxp3基因用酶切的方法从T Easy vector切下,并将其连接到用相同酶切,含有硫氧还蛋白(含6个组氨酸“标签”)的pET 32a(+)原核表达载体中构建pET 32a(+)-MFoxp3表达载体。用IPTG诱导转化pET 32a(+)-MFoxp3表达载体的大肠杆菌BL21(DE3),并以镍螯合层析法纯化MFoxp3融合蛋白。结果经RT-PCR成功地克隆了1,290 bp的小鼠Foxp3基因,测序正确后转化大肠杆菌原核表达载体pET 32a(+),重组质粒在BL21(DE3)中成功表达出分子质量约为63 kD的融合蛋白,运用Ni-NTA方法纯化出目的蛋白,纯化后的蛋白纯度达80%,并用Western Blotting检测蛋白的灵敏度和特异性。结论构建了小鼠Foxp3的融合蛋白原核表达载体并成功表达与纯化出小鼠Foxp3的融合蛋白。
- 胡水清危华峰张大鹏史菊鲜樊克兴王皓戴建新郭亚军张雁云
- 关键词：原核表达蛋白纯化
