- 硫酸铍诱导人胚肺成纤维细胞凋亡机制研究被引量：1
- 2016年
- 目的观察硫酸铍对人胚肺成纤维细胞(MRC-5细胞)凋亡的影响。方法取离体培养MRC-5细胞,随机分为对照组,硫酸铍低、中、高剂量染毒组,拮抗剂组和激活剂组。前4组硫酸铍染毒终浓度分别为0、1、10、100μmol/L;拮抗剂组先后分别予终浓度均为10μmol/L的硫酸铍和2-氨基乙酯二苯基硼酸联合处理;激活剂组先后分别予终浓度均为10μmol/L的硫酸铍和肌醇三磷酸(IP3)联合处理。各组染毒后分别于培养24和48 h时间点收获细胞,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,激光共聚焦法检测细胞内钙离子(Ca^(2+))浓度,实时荧光定量聚合酶链式反应法检测三磷酸肌醇受体Ⅲ型(IP_3RⅢ)和B细胞淋巴瘤-2(BCL-2)的mRNA相对表达水平,酶联免疫吸附法测定IP_3RⅢ和IP3蛋白表达水平。结果在24和48 h时间点的细胞凋亡率,硫酸铍3个剂量组均低于同时间点对照组(P<0.05),拮抗剂组分别低于同时间点对照组和硫酸铍中剂量组(P<0.05);激活剂组48 h时间点细胞凋亡率低于同时间点的对照组(P<0.05),高于同时间点硫酸铍中剂量组(P<0.05)。24 h时间点细胞内Ca^(2+)浓度,在硫酸铍低剂量组低于对照组(P<0.05),硫酸铍高剂量组高于对照组(P<0.05);48 h时间点硫酸铍中和高剂量组细胞内Ca^(2+)浓度均低于对照组(P<0.05);分别与24、48 h时间点对照组和硫酸铍中剂量组比较,拮抗剂组细胞内Ca^(2+)浓度均下降(P<0.05),激活剂组细胞Ca^(2+)浓度均升高(P<0.05)。24和48 h时间点BCL-2 mRNA表达水平在硫酸铍3个剂量组、拮抗剂和激活剂组均高于同时间点对照组(P<0.05)。细胞IP_3RⅢmRNA表达水平在硫酸铍3个剂量组、拮抗剂和激活剂组均高于对照组(P<0.05)。24 h时间点IP_3RⅢ蛋白表达水平在硫酸铍中剂量组、拮抗剂组和激活剂组均低于对照组(P<0.05);48 h时间点IP_3RⅢ蛋白表达水平,在硫酸铍高剂量组低于对照组(P<0.05),拮抗剂和激活剂组均高于硫酸铍中剂量组
- 严青周丽娜张娜周慈刘志宏
- 关键词：人胚肺成纤维细胞钙离子
- 尘肺患者外周血胸腺细胞分化抗原1-DNA甲基化的改变
- 目的: 本研究从表观遗传学角度出发，观察尘肺患者外周血胸腺细胞分化抗原-1DN A甲基化的水平，以及甲基转移酶和甲基结合蛋白2的表达水平，从而分析DNA 甲基化与粉尘所致肺部纤维化病变之间的关系，并观察纤维化相关基因C...
- 周慈
- 关键词：尘肺矽肺DNA甲基化肺纤维化
- 文献传递
- 氧化铍致大鼠肺纤维化及相关指标的动态变化被引量：3
- 2016年
- [目的]探讨氧化铍(Be O)致SD大鼠肺纤维化过程中肺组织的病理变化及纤维化相关指标的动态变化。[方法]无特定病原体(SPF)级SD雄性大鼠64只,随机分为阴性对照组、Be O染毒组。染毒方法采用一次性非暴露式气管内灌注法,Be O染毒组灌注0.5 m L浓度为10 g/L的Be O悬浮液,阴性对照组灌注相同体积的质量分数为0.9%的生理盐水溶液。两组大鼠分别于染毒后的第20、40、60和80天4个时间点处死,每时间点每组各8只。取肺组织制作病理标本通过光学显微镜观察其肺组织病理变化并检测血清和肺组织匀浆中的胶原蛋白Ⅰ(COL-Ⅰ)、胶原蛋白Ⅲ(COL-Ⅲ)、平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)的表达。[结果]Be O染毒组肺组织病理观察染毒早期主要病理改变为支气管、肺间质炎性细胞浸润,并以单核/巨噬细胞为主,肺泡隔增厚,染毒后期肺泡间隔明显增厚,肺泡腔缩小,部分肺泡结构消失,肺泡结构紊乱,局部可见纤维化结节,结节中央可见Be O粉尘,肺组织局部发生实变。肺组织匀浆中:染毒组中COL-Ⅰ表达高于同时间点的阴性对照组(P<0.05),染毒后60、80天COL-Ⅲ表达高于同时间点阴性对照组(P<0.05),染毒后80天α-SMA表达高于同时间点阴性对照组(P<0.05),染毒后60、80天TGF-β1表达高于同时间点阴性对照组(P<0.05);与染毒后20天时比较,阴性对照组中各指标其他所有时间点与之差异均无统计学意义,染毒后40、60、80天COL-Ⅰ表达高于20天的(P<0.05),染毒后80天α-SMA、COL-Ⅲ、TGF-β1表达高于20天的(P<0.05)。血清中:染毒后60、80天COL-Ⅲ和TGF-β1表达高于同时间点阴性对照组(P<0.05),染毒后80天COL-Ⅰ表达高于同时间点的阴性对照组(P<0.05),染毒组中α-SMA表达均高于同时间点阴性对照组(P<0.05);与20天时比较,阴性对照组中各指标其他所有时间点与之差异均无统计学意义;染毒后60、80天COL-Ⅲ及染毒后80天CO
- 王凯刘志宏王和静王瑶魏丛慧张娜周慈
- 关键词：氧化铍肺纤维化Α-平滑肌肌动蛋白转化生长因子Β1
- 枸杞多糖对硫酸铍致人胚肺成纤维细胞bcl-2、bax及c-fos表达的影响被引量：1
- 2017年
- 目的探讨硫酸铍(BeSO_4)对体外培养人胚肺成纤维细胞凋亡相关蛋白bcl-2、bax及原癌基因c-fos蛋白表达的影响,以及枸杞多糖(LBP)的干预作用。方法体外培养人胚肺成纤维细胞(MRC-5)细胞系,分为空白对照组,低、中、高剂量BeSO_4染毒组(1、10、100μmol·L^(-1)),均分别体外培养24h、48h、72h;LBP干预组(0.2 mg·mL^(-1) LBP+10μmol·L^(-1) BeSO_4)及LBP对照组(0.2 mg·mL^(-1) LBP),分别培养48h。采用Western blot检测MRC-5细胞bcl-2、bax、c-fos蛋白表达水平。结果染毒48、72h时,各剂量组bcl-2蛋白的表达及中、高剂量组bcl-2/bax比值与对照组相比增高(P<0.05或P<0.01),染毒48h时,中、高剂量组c-fos蛋白的表达与对照组相比增高(P<0.01),染毒72h时,bax各剂量组的表达与对照组相比降低(P<0.05或<0.01),且存在剂量效应关系(P<0.01);同一剂量组,bcl-2蛋白的表达在48h之内随染毒时间的延长而增加,bcl-2/bax比值与c-fos蛋白的表达在72h之内随染毒时间的延长而升高,同一中、高剂量组,染毒24h之后,bax表达量随染毒时间的延长而降低,且存在时间效应关系(P<0.01)。LBP干预48h,bcl-2、c-fos、bcl-2/bax的表达与BeSO_4染毒组相比降低(P<0.05或<0.01),但bax的表达上调无统计学意义。结论 bcl-2和bax参与BeSO_4致MRC-5细胞凋亡的调控,原癌基因c-fos被激活,LBP可调节BeSO_4对细胞凋亡相关蛋白及原癌基因表达的影响。
- 王和静周慈张娜严青王凯刘志宏
- 关键词：细胞凋亡枸杞多糖
