孙红波
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 缺氧诱导因子-1α过表达对骨髓间充质干细胞缺氧时生存能力的影响被引量：3
- 2011年
- 目的探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia induced factor-1α,HIF-1α)基因转染是否提高缺氧间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的耐缺氧能力以及这种能力是否与增加葡萄糖摄取有关。方法将MSCs分为常氧非转染组(即对照组)、常氧转染组、缺氧非转染组和缺氧转染组,分别于常氧(5%CO2,37℃)和缺氧(94%N2、1%O2和5%CO2,37℃)条件下孵育8 h。免疫细胞化学、RT-PCR和Western blot法检测HIF-1α表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率(AR)、死亡率(DR),MTT法检测细胞增殖,放射同位素法检测氚标葡萄糖(3H-G)摄取量。结果①与常氧非转染组相比,常氧转染组HIF-1αmRNA表达明显增高(P<0.01),但其蛋白表达2组间差异无统计学意义(P=0.187);与缺氧非转染组相比,缺氧转染组的HIF-1αmRNA和蛋白表达均明显增高(P<0.01)。②缺氧转染组MSCs的AR(P=0.001)和DR(P=0.003)均明显低于缺氧非转染组,但均明显高于常氧非转染组(P<0.01)。③与缺氧非转染组相比,缺氧转染组MSCs增殖(P=0.004)明显提高,但明显低于常氧非转染组(P=0.001)。④与缺氧非转染组相比,缺氧转染组MSCs对3H-G的摄取量明显提高(P=0.004),但明显低于常氧非转染组(P=0.001)。⑤AR与HIF-1α蛋白表达(r=-0.71,P=0.005)3、H-G摄取量(r=-0.65,P=0.004)均呈明显负相关,HIF-1α蛋白表达与3H-G摄取量呈明显正相关(r=0.77,P=0.003)。结论 HIF-1α基因可显著提高MSCs的耐缺氧能力,其机理可能与HIF-1α基因提高MSCs对葡萄糖的摄取有关。
- 孔宏亮孙红波宋丽杰齐国先
- 关键词：骨髓间充质干细胞转染缺氧葡萄糖摄取
- 缺氧诱导因子-1α过表达通过葡萄糖转运载体-4介导缺氧大鼠骨髓间充质干细胞对葡萄糖的摄取被引量：1
- 2011年
- 目的探列缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）基因转染是否提高骨髓间充质干细胞（MSC）缺氧状态下的葡萄糖摄取能力以及这种能力是否与葡萄糖转运载体-4（GLUT-4）的表达和易位有关。方法将MSCs分为常氧非转染组（即对照组）、常氧转染组、缺氧非转染组和缺氧转染组，分别于常氧（5％CO2，37℃）和缺氧（94％N2、1％0z和5％CO2，37℃）条件下孵育8h。放射同位素法检测。H—G摄取量，免疫细胞化学和Western-blot检测GLUT-4的表达。结果①与缺氧非转染组相比，缺氧转染组显著提高细胞摄取。H—G量（P〈0．01），但二者均显著低于对照组和常氧转染组对。H—G的摄取（P〈0．01）；②与缺氧非转染组相比，缺氧转染组显著提高细胞和细胞膜GLUT-4蛋白的表达（P〈0．01），2组均显著低于对照组GLUT-4蛋白的表达和移位（P〈0．01）；③。H—G摄取量与细胞膜中GLUT-4表达呈正相关（r=0．437，P=0．001）。结论HIF-1a基因提高MSCs的葡萄糖摄取能力，此机制与HIF-1α基因提高GLUT-4的表达和易位相关。
- 孔宏亮孙红波宋丽杰徐桂萍齐国先
- 关键词：间质干细胞缺氧
