袁亮
- 作品数：27 被引量：41H指数：3
- 供职机构：商丘职业技术学院更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学冶金工程更多>>
- T_(1083)替换融合质粒载体pGBKT7-T_S转入酵母的自激活实验被引量：1
- 2010年
- [目的]研究T1083替换融合质粒载体pGBKT7-TS转入酵母的自激活实验,探讨其表达产物是否可作为诱饵进行酵母双杂交筛选。[方法]将T1083替换突变BD融合质粒载体pGBKT7-TS转入酵母后,进行自激活和蛋白表达毒性检测试验。[结果]该片段表达产物无自激活特性且对酵母细胞无毒性,可以作为诱饵进行酵母双杂交筛选。[结论]为进一步研究NtKRP尾部T1083替换对NtKRP与靶物质结合的影响奠定了实验基础。
- 袁亮纪耀坤张伟彬
- 关键词：酵母双杂交诱饵载体自激活作用
- T_(1083)替换NtKRP尾部BD融合载体pGBKT7-Ts的构建
- 2010年
- [目的]构建T1083替换NtKRP尾部BD融合载体pGBKT7-Ts。[方法]以pBI121KE质粒为模板,通过重叠PCR扩增烟草NtKRP基因尾部含T1083替换的片段,将其克隆入pGBKT7载体。[结果]成功构建了T1083替换突变BD融合质粒载体pGBKT7-Ts。[结论]为进一步研究NtKRP尾部T1083替换对NtKRP与靶物质结合的影响奠定了实验基础。
- 纪耀坤张伟彬袁亮
- T_(1083)替换NtKRP尾部BD融合载体pGBKT7-TS的构建(摘要)(英文)被引量：2
- 2010年
- [目的]扩增烟草NtKRP基因尾部含T1083替换的片段,将其克隆入pGBKT7载体中。[方法]以pBI121KE质粒为模板进行PCR反应,将得到的PCR产物凝胶回收后等摩尔混合,取适量作为模板,得到含定点突变的尾部片段。将该PCR产物克隆入SmaI线性化的pUC19载体,构建含T1083替换的重组子pUC19Ts。通过蓝白斑筛选得到的重组子进行BamHI -SmaI双酶切鉴定,将筛选出的正确重组子送交联合基因测序。将pGBKT7和测序正确的pUC19Ts质粒均用BamHI -SmaI双酶切,分别回收1 320 bp的融合片段和7.3 kb的载体片段进行连接,转化并筛选得到重组子,任意挑取2个单菌培养后提取质粒进行BamHI -SmaI双酶切鉴定。[结果]成功构建了NtKRP尾部含T1083替换的BD融合质粒载体pGBKT7-TS。[结论]为进一步研究NtKRP尾部T替换对NtKRP与靶物质结合的影响奠定了实验基础。
- 纪耀坤张伟彬袁亮
- T_(1083)替换融合质粒载体pGBKT7-T_S转入酵母的自激活试验(摘要)(英文)被引量：3
- 2010年
- [目的]研究T1083替换融合质粒载体pGBKT7-Ts转入酵母的自激活实验,探讨其表达产物是否可作为诱饵进行酵母双杂交筛选。[方法]将T1083替换突变BD融合质粒载体pGBKT7-TS转入酵母后,进行自激活和蛋白表达毒性检测试验。pGBKT7-TS对报告基因自主激活的检测。将pGBKT7-TS质粒转染S.cerevisiae strainAH109和S.cerevisiaeY187菌株,同时分别转入pGBKT7作为对照,在SD-Trp平板上挑取转化菌落,悬于适量无菌水中,再分别接种于SD-Trp +X-α-gal、SD-Trp-His +X-α-gal、SD-Trp-Ade +X-α-gal和SD-Trp-Ade-His +X-α-gal平板。30℃培养2 ～3 d,观察各平板菌落颜色。确定含有pGBKT7-TS质粒的AH109和Y187酵母细胞内HIS、ADE、Mel1、LacZ报告基因的表达情况。pGBKT7-TS对酵母AH109和Y187的毒性检测、挑取大于2 mm的pGBKT7-TS转化的AH109克隆和pGBKT7-TS转化的Y187克隆各1个,分别接种于50 ml SD/-Trp+Kan(20μg/ml)培养基中,30℃、250 r/min培养16 h,检测OD600,若OD600<0.8,则DNA-BD可能有毒性;若OD600≥0.8,说明DNA-BD无毒性。[结果]转化pGBKT7-TS的酵母菌AH109在SD-Trp +X-α-gal平板和SD-Trp-His +X-α-gal平板上均可长出菌落,但在SD-Trp-Ade +X-α-gal平板和SD-Trp-Ade-His+X-α-gal平板上均无菌落生长,表明转入pGBKT7-TS后His报告基因有泄漏表达,但不能激活ADE和MELI报告基因。毒性检测试验中,重复2次,其OD600均大于0.8,说明DNA-BD融合蛋白对酵母AH109和Y187的生长无毒性,可以作为诱饵进行酵母双杂交筛选。[结论]为进一步研究NtKRP尾部T1083替换对NtKRP与靶物质结合的影响奠定了试验基础。
- 袁亮纪耀坤张伟彬
- 关键词：酵母双杂交诱饵载体自激活作用
- 一种微生物菌落接种装置
- 本发明一种微生物菌落接种装置，包括机架，机架上设有接种机构、菌液放置机构、灭菌机构、降温装置、开关盖机构，上料机构、转移机构、翻转机构和培养放置机构，接种机构包括第一驱动机构、XYZ模组和接种工具，菌液放置机构包括第二驱...
- 袁亮王晓青张伟彬赵耀东乔梅袁晨翔董红霞
- 分子蒸馏技术及其在植物药用有效成分研究中的应用被引量：3
- 2010年
- 介绍了分子蒸馏技术的概念、工作原理与特点,就该技术在植物药用有效成分研究中的应用进行了探讨。
- 袁亮张伟彬
- 关键词：分子蒸馏技术
- 一种微生物复合菌剂及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种微生物复合菌剂，其制备原料由以下重量份数的组分组成：枯草芽孢杆菌发酵菌液30‑50份、蕈状芽孢杆菌发酵菌液20‑30份、珊瑚色诺卡式菌发酵菌液10‑20份、功能菌剂10‑20份、载体60‑80份。此外，本...
- 袁亮张伟彬乔梅梁娜纪耀坤刘传奇郭秀英董红霞刘素环赵耀东
- 文献传递
- 农药药害的预防与补救技术被引量：3
- 2012年
- 阐述了农药药害的症状、发生原因及致症机理,介绍了发生农药药害的补救方法及防止农药药害的措施。
- 杨铭袁亮
- 关键词：农药药害
- 不同轮耕模式对豫东地区小麦—花生轮作田土壤质量、团聚体组成及稳定性的影响
- 2023年
- 为探明不同轮耕模式对豫东地区小麦→花生轮作田土壤质量、团聚体组成及稳定性的影响。于2018—2022年,通过田间定位试验,以连续旋耕(RT)处理为对照,设置旋耕-深翻-旋耕-深翻(RDRD)处理、旋耕-免耕-旋耕-免耕(RNRN)处理、深翻-免耕-深翻-免耕(DNDN)处理、旋耕-免耕-深翻-免耕(RDN)处理共4种轮耕模式,研究不同轮耕模式对土壤养分含量、酶活性、容重、孔隙度、团聚体组成及稳定性的影响。结果表明,与RT处理相比,不同轮耕模式均能提高土壤碱解氮、速效磷、速效钾、有机质的含量及土壤脲酶、碱性磷酸酶的活性;不同轮耕模式能够降低土壤容重,提高孔隙度,促进>0.25 mm粒级团聚体形成,提高团聚体平均质量直径(MWD)、几何平均直径(GMD)和>0.25 mm粒级团聚体含量(R0.25),降低团聚体分形维数(D)。其中,0~20 cm土层中,与RT处理相比,RDN处理容重显著降低6.25%(P<0.05),孔隙度、MWD、GMD、R0.25分别显著提高13.66%、15.22%、17.80%、10.90%。RDN处理>2 mm粒径团聚体比例最高,较RDRD、RNRN、DNDN处理分别显著提高16.50%、29.19%、7.16%。20~40 cm土层中,与RT处理相比,RDN处理容重显著降低7.75%,孔隙度、MWD、GMD值分别显著提高14.97%、9.80%、8.33%。DNDN处理>2 mm粒径团聚体比例最高,较RNRN处理显著增加8.18%,与RDRD、RDN处理相比均无显著性差异。相关性分析表明,土壤养分含量及酶活性的变化与土壤物理结构密切相关。综上所述,旋耕-免耕-深翻-免耕处理表现最优。
- 袁亮
- 关键词：轮耕容重团聚体
- 一种用于农业微生物肥料生产的混合装置
- 本发明涉及肥料混合设备技术领域，具体是一种用于农业微生物肥料生产的混合装置，包括防护箱以及用于固定防护箱的支撑架，还包括：动力箱，所述动力箱通过连接筒与所述防护箱相连接；进料管，所述进料管贯穿安装在所述连接筒和动力箱上，...
- 张伟彬袁亮乔梅梁娜任鹏飞袁晨翔董红霞
- 文献传递
