顾霞
- 作品数：3 被引量：8H指数：1
- 供职机构：同济大学附属东方医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氢气联合自然杀伤细胞对肺癌细胞生长的影响被引量：1
- 2019年
- 目的研究不同浓度氢气联合自然杀伤(NK)细胞是否有助于抑制肺癌细胞生长。方法从非小细胞肺癌患者外周血中分离和培养NK细胞,用20%、40%、60%不同浓度氢气分别处理NK细胞。通过四甲基偶氮唑蓝法检测NK细胞生长曲线、流式细胞仪分析NK细胞周期、酶联免疫吸附试验分析NK细胞分泌炎症因子的变化来评估氢气对NK细胞的增殖能力影响。将NK细胞和A549细胞(肺癌细胞)1∶1加入共培养体系,用20%、40%、60%不同浓度氢气分别处理,通过观察A549细胞单克隆形成能力、划痕分析A549细胞迁移能力、Transwell分析A549细胞侵袭能力来评估氢气联合NK细胞杀瘤能力。结果20%、40%、60%不同浓度的氢气对NK细胞的增殖能力影响有限。在A549细胞单克隆生长能力和细胞迁移能力方面,60%的氢气联合NK细胞有轻度抑制作用,20%、40%浓度的氢气和单独NK细胞作用无差别;Transwell分析细胞侵袭能力提示20%、40%、60%不同浓度氢气联合NK细胞与单独NK细胞对A549细胞侵袭能力无差别。结论60%高浓度氢气联合NK细胞有助于抑制A549细胞单克隆生长和细胞迁移能力,从而抑制肿瘤生长,为今后进一步科学研究和氢气联合NK细胞免疫治疗肺癌奠定了基础。
- 夏盛全任涛王凯玲顾霞
- 关键词：氢气自然杀伤细胞细胞增殖
- 自体NK细胞过继输注对Ⅲ-Ⅳ期NSCLC患者天然免疫与体力状态的影响被引量：1
- 2016年
- 目的研究自体NK细胞过继输注对晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者天然免疫及体力状况(performance status,PS)评分的影响。方法应用流式细胞仪检测20例晚期NSCLC患者(肺癌组)和20例健康人(健康对照组)外周血NK(CD16^+CD56^+)细胞的表达水平;检测晚期NSCLC患者应用自体NK细胞过继输注后外周血NK(CD16^+CD56^+)细胞的表达水平。根据美国东部肿瘤协作组(Eastern Cooperative Oncology Group,ECOG)体力状况评分标准,比较肺癌组患者应用自体NK细胞过继输注前后PS评分的变化情况。结果外周血NK(CD16^+CD56^+)细胞的表达明显降低[(8.980±1.942)%],与健康对照组[(15.290±1.869)%]比较差异均有统计学意义(P<0.05)。肺癌组治疗前PS评分为(1.50±1.080),应用自体NK细胞过继输注后PS评分显著降低(1.00±0.816),外周血NK(CD16^+CD56^+)细胞的表达显著升高[(24.660±10.049)%],与治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论自体NK细胞过继免疫治疗有助于提高晚期NSCLC患者的免疫功能状态及体力状况。
- 顾霞王凯玲芮庄华龙海虎陈国君任涛
- 关键词：NK细胞
- miR-155反义寡核苷酸对内毒素诱导急性肺损伤小鼠的保护作用被引量：6
- 2018年
- 目的 通过建立微小RNA（miRNA）反义寡核苷酸（ASO）慢病毒表达载体,探讨miR-155 ASO对急性肺损伤（ALI）小鼠的保护作用.方法 设计并合成miR-155 ASO,使用BamHⅠ和NheⅠ双酶切后连接产生慢病毒表达载体,聚合酶链反应（PCR）筛选阳性克隆,测序并测定病毒滴度.按随机数字表法将54只4～6周龄的雄性BALB/c小鼠平均分为3组,均经腹腔注射脂多糖（LPS）10 mg/kg制备ALI动物模型.3组分别于制模前24 h经尾静脉注射含1×108/mL pmiR-155-ASO病毒的磷酸盐缓冲液（PBS）200μL（pmiR-155-ASO组）,或含1×108/mL pSMPUW-miR-GFP空载体病毒的PBS 200μL（pmiR-cont组）,或等量PBS（PBS组）.每组中10只小鼠用于观察7 d存活率;剩余8只小鼠于制模后取血标本及肺组织,用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清炎性因子水平;用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肺组织miR-155表达;镜下观察肺组织病理学改变及巨噬细胞分布.结果 pmiR-cont组与PBS组各指标比较差异均无统计学意义.pmiR-155-ASO组肺组织中miR-155成熟体的表达水平较pmiR-cont组明显降低（2-ΔΔCt：4.92±0.72比15.38±0.60,P〈0.05）.与pmiR-cont组比较：给予miR-155ASO预处理后ALI小鼠损伤程度明显改善,7 d存活率显著提高（72.1％比61.9％,P〈0.05）;肺大体观察显示肺组织充血明显减轻,肺湿/干重（W/D）比值明显下降（4.50±0.13比5.64±0.61,P〈0.05）;苏木素-伊红（HE）染色显示肺组织炎性细胞浸润减少,免疫荧光法检测显示肺组织巨噬细胞浸润数量明显减少;血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）水平明显降低〔TNF-α（ng/L）：379.8±48.9比495.9±33.3,IL-6（ng/L）：262.3±61.8比355.4±22.6,均P〈0.05〕,而IL-10水平无明显改变（ng/L：143.6±32.5比140.4±22.3,P〉0.05）.结论 miR-155 ASO具有抑制LPS诱导ALI小鼠炎症反应、改善预后的作用.
- 唐瑾谢旺程婷婷王凯玲顾霞张倩郭忠良
- 关键词：急性肺损伤炎症反应反义寡核苷酸
