张华
- 作品数：10 被引量：26H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金清华-裕元医学科学研究基金中国医学科学院基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 纳米粒子载反义单核细胞趋化蛋白-1基因局部定位转染抑制兔颈动脉内膜损伤后内膜增生的研究被引量：11
- 2002年
- 目的 观察纳米粒子包载反义单核细胞趋化蛋白 1 (MCP 1 )基因局部腔内转染对兔颈动脉球囊损伤后内膜增生的影响。方法 采用球囊导管损伤动脉内膜的方法建立兔颈动脉球囊损伤模型。用纳米粒子包载反义MCP 1基因 ,采用保留灌注的方法进行局部腔内定位转染。结果 聚合酶联反应检测发现重组基因整合 ,RNANorthern杂交观察到转基因治疗组有反义MCP 1基因表达 ,内源性MCP 1基因的表达受抑制 ,转基因治疗组内膜 /中膜面积比降低 42 %。结论 纳米粒子可以作为转基因载体 ,反义MCP
- 曾勇朱文玲王宗立刘佩毛赵三妹张华杨菁王澎延宋存先
- 关键词：单核细胞趋化蛋白-1反义RNAPTCA内膜增生基因载体
- Efect of NF-κB on the induction of PDGF-B transcription by angiotensin Ⅱin the ECV304 cell line被引量：2
- 2002年
- 目的 研究血管紧张素Ⅱ对ECV30 4细胞中转录因子NF κB的作用和对PDGF B基因表达的影响。方法 采用电泳迁移率移动分析法 (EMSA)和免疫组化方法 ,包括共聚焦显微镜及金颗粒标记免疫电镜技术 ;荧光素酶报告基因与变异型激酶质粒共转染的方法及Northern印迹法研究血管紧张素Ⅱ激活NF κB的信号传递路径和检测了血管紧张素Ⅱ刺激前后PDGF BmRNA的表达水平。结果 血管紧张素Ⅱ刺激后 ,在ECV30 4细胞内有NF κB的激活及核易位过程 ,应用免疫荧光共聚焦显微镜 ,免疫电镜及Northern印迹等方法均可观察到PDGF B或其基因表达增高。变异型激酶质粒IKKα KM ,IKKβ KM及NIK KM可抑制经AngⅡ刺激的转染细胞内与NF κB启动相连的荧光素酶的表达。结论 AngⅡ可激活胞浆内NF κB并出现核易位 ,激酶NIK、IKKα 和IKKβ 参与了此信号传递路径。血管紧张素Ⅱ刺激后PDGF B链mRNA水平增高。
- 李皓尹鸿操张华曹心宜王宗立佘铭鹏
- 关键词：NF-ΚBPDGF-B
- 佛波酯通过抑制蛋白激酶B活性诱导血管平滑肌细胞凋亡被引量：1
- 2008年
- 目的探讨佛波酯对血管平滑肌细胞凋亡的影响及可能的作用机制。方法用佛波酯处理体外培养的大鼠动脉平滑肌细胞A10,原位缺口末端标记法检测佛波酯对平滑肌细胞凋亡的影响;用免疫印迹法检测蛋白激酶B及其下游底物的总蛋白和磷酸化水平。结果佛波酯可诱导平滑肌细胞的凋亡。过度表达持续活性的蛋白激酶B明显抑制佛波酯诱导的细胞凋亡;相反,显性负性蛋白激酶B加重佛波酯的促凋亡作用。进一步研究发现,佛波酯可降低蛋白激酶B的磷酸化水平,并随着剂量的增高或时间的延长而逐步降低,同时佛波酯也能抑制蛋白激酶B下游的靶蛋白如叉头转录因子3a和糖原合成酶激酶3β磷酸化水平。最后发现蛋白激酶C抑制剂可阻断佛波酯降低蛋白激酶B磷酸化水平的作用,但丝裂原活化蛋白激酶抑制剂无此作用。结论佛波酯通过蛋白激酶C信号途径抑制蛋白激酶B激酶活性而诱导平滑肌细胞凋亡。
- 范永娜谢平张华郭树彬李汇华
- 关键词：病理学与病理生理学血管平滑肌细胞凋亡佛波酯蛋白激酶B蛋白激酶C
- 雷帕霉素对离体培养人脐动脉平滑肌细胞增殖及细胞周期时相和p27蛋白表达的影响
- ＜正＞目的:通过观察雷帕霉素（RPM）对人脐动脉平滑肌细胞（HUASMCs）增殖、细胞周期时相和P27蛋白表达水平的影响,探讨RPM抑制HUASMCs增殖的作用机制和作用浓度（剂量）。方法:采用组织贴块法培养HUASMC...
- 苗立夫陈连凤朱文玲曾勇黄超联黄燕王以光刘佩毛张华赵三妹
- 文献传递
- 包载雷帕霉素的乳酸-乙醇酸共聚物纳米粒子对人脐动脉平滑肌细胞bcl-2、p27^(kip1)表达及细胞凋亡的影响
- 2015年
- 目的观察雷帕霉素(RPM)及其乳酸-乙醇酸共聚物(PLGA)形成的载药纳米粒子(RPM-PLGA-NPs)在不同浓度和作用时间下对离体培养人脐动脉平滑肌细胞(HUASMCs)细胞凋亡及调控基因bcl-2、p27kip1表达的影响。方法离体培养HUASMCs细胞并分别予不同浓度的RPM、RPM-PLGA-NPs作用12和24 h,设立生理盐水及空白PLGANPs对照组,免疫组织化学方法检测p27kip1与bcl-2表达阳性率和表达水平的差异,采用流式细胞仪、DNA片段琼脂糖凝胶电泳及末端原位标记法检测各组HUASMCs凋亡及细胞凋亡率,噻唑蓝比色法观察不同浓度RPM和RPM-PLGA-NPs对HUASMCs存活率的影响。结果 RPM及RPM-PLGA-NPs组抑制HUASMCs增殖并呈剂量依赖关系,HUASMCs DNA电泳呈梯度条带阳性。流式细胞仪检测RPM 100 ng/ml和RPM-PLGA-NPs 500 ng/ml组的细胞凋亡百分率分别为(45.45±2.36)%和(35.04±5.64)%,显著高于对照组的(2.60±0.95)%(P<0.01)。末端原位标记法检测高剂量干预组的24 h凋亡指数显著高于12 h组(P<0.05,P<0.01)。RPM 100 ng/ml组和RPM-PLGA-NPs 500 ng/ml组的p27kip1蛋白阳性表达指数(PEI)分别为(0.178±0.077)%和(0.192±0.052)%,显著高于对照组的(0.101±0.035)%(P<0.05)。Spearman秩相关检验显示RPM及RPM-PLGA-NPs组凋亡指数值与p27kip1的PEI无相关性。RPM-PLGA-NPs 50 ng/ml及RPM 10 ng/ml组bcl-2的PEI分别为(6.44±1.31)%和(5.49±1.06)%,显著高于对照组的(1.84±0.47)%和(2.06±0.53)%(P<0.05)。结论 RPM及RPM-PLGA-NPs上调离体培养的HUASMCs的p27kip1表达、促进细胞凋亡,并无下调抗细胞凋亡基因bcl-2表达的作用。相当载药量的RPM-PLGA-NPs较RPM促进血管平滑肌细胞凋亡的作用更明显,但与p27kip1表达水平无线性相关。
- 苗立夫崔永亮尹燕平陈莲凤张华刘佩毛朱文玲宋存先杨菁
- 关键词：雷帕霉素细胞凋亡人脐动脉平滑肌细胞
- 血浆高密度脂蛋白对内皮祖细胞生长特性的影响被引量：4
- 2006年
- 目的研究血浆高密度脂蛋白(HDL)对脐血内皮祖细胞(EPC)生物学特性的影响。方法应用密度梯度离心法从人脐带血中分离单个核细胞,接种于M200培养液。经血管内皮生长因子(VEGF)诱导后,进行细胞特异性标志物CD133、CD34、血管内皮细胞生长因子受体2和第八因子相关抗原检测,鉴定其分化为内皮祖细胞。在细胞分化的特定阶段,通过MTT、共聚焦显微镜检查和流式细胞术等方法,检测HDL对EPC增殖、抗原表达及细胞周期的影响。结果在细胞分化阶段,HDL明显促进内皮祖细胞增殖,促使细胞由G1期向S期的转化。细胞增殖指数增加15.3%。cyclinD1表达增加89.9%。结论脐带血中含有内皮祖细胞,在一定条件下可分化为内皮细胞。HDL对内皮祖细胞在体外的分化、增殖有重要的调节作用。这为动脉粥样硬化的发病机制研究和防治提供了一个新思路。
- 张秋华尹洪超张俊华刘佩毛张华佘铭鹏
- 关键词：脂蛋白类HDL内皮干细胞
- 饮酒和载脂蛋白AI基因启动子G/A置换多态性对凉山彝汉人血浆载脂蛋白AI水平的影响被引量：2
- 2000年
- 研究载脂蛋白ＡＩ启动子－７５ｂｐ处Ｇ／Ａ嘌呤置换以及饮酒对凉山彝族及汉族人群血浆载脂蛋白ＡＩ水平 的影响。经现场调查随机抽样７４２名凉山州彝汉健康居民，包括三个人群样本：彝族农民、彝族移民、汉族居 民。根据饮用酒精量将各人群分为四组：不饮酒者、 １～２５ｇ／ｄ饮酒者、 ２６～７５ｇ／ｄ以上饮酒者、 ７５ｇ／ｄ以上饮酒 者。采集清晨空腹血样１０ｍＬ／人。全项血脂和脂蛋白水平测定。从冷冻血凝块中抽提基因组ＤＮＡ，经ＰＣＲ扩 增，进行片段长度多态性分析。结果：随着饮酒量的增加，血浆ＨＤＬＣ和ａｐｏＡＩ水平逐渐升高，在彝族农民 样本和汉民样本中有非常显著的统计学意义。三人群样本间的Ａ等位基因频率相似。Ａ等位基因携带者与ＧＧ 基因型携带者之间的各项血脂水平无显著差异。但在不饮酒者中，Ａ等位基因携带者的ａｐｏＡＩ水平明显高于 ＧＧ基因型携带者；而饮酒者中，Ａ等位基因携带者的ａｐｏＡＩ和ＨＤＬＣ水平明显低于ＧＧ基因型携带者，上述 差异在城镇人群中显示出统计学意义（Ｐ＜０．０５）。不饮酒者中，Ｇ／Ａ置换可以解释１８％的个体间ａｐｏＡＩ水平变 异（Ｆ＝８．９４，Ｐ＜０．０１）。结论；适量饮酒和ａｐｏＡＩ基因－７５处Ｇ／Ａ置换多态性均可使?
- 赵庆伟赵庆伟申萍周梦玲张华
- 关键词：载脂蛋白AI多态性彝族汉族
- 高密度脂蛋白及载脂蛋白A_1防止实验性动脉粥样硬化斑块形成
- 1992年
- 根据临床流行病学调查和实验研究,已明确高密度脂蛋白（HDL）和缺血性心脏病（动脉粥样硬化）的发病率呈负相关。动脉粥样硬化的发生和血清HDL-胆固醇的量降低有密切关系,HDL是一保护因子,可防止动脉粥样斑块形成。HDL是一种脂质和蛋白的复合体,组成它的主要载脂蛋白有apoA1, A2,A4,apoB,apoC和apoE等,其中以apoA1所占的比例最大,约为65％。体外细胞实验表明,HDL抑制低密度脂蛋白（动脉粥样硬化的主要致病因子）穿过动脉内膜。
- 佘铭鹏夏人仪冉碧芳王宗立刘连生赵三妹谷素敏梁平刘佩毛吴时丽张华
- 关键词：载脂蛋白高密度脂蛋白主动脉内膜APOEAPOB过氧化酶
- mm-LDL对內皮细胞转录因子NF-kB活性的影响被引量：6
- 2001年
- 目的 研究轻微修饰低密度脂蛋白(mm-LDL)激活内皮细胞转录因子NF-kB的信号传导途径以及NF-kB对血小板源性生长因子B链(PDGFb)表达的调控作用。方法 以FeSO4修饰法制备mm-LDL，以正常LDL(n-LDL)作对照，作用于培养内皮细胞后提取核蛋白，用凝胶阻滞实验检测转录因子NF-kB核转位及结合活性的变化。观察自由基清除剂probucol及PDTC对mm-LDL激活内皮细胞转录因子NF-kB的影响。通过检测报告基因探讨核因子诱导激酶（NIK）和核因子-kB抑制亚基激酶(IKK)在激活内皮细胞转录因子NF-kB的信号传导途径中的作用以及mm-LDL激活的NF-kB对PDGFb基因启动子的作用。结果 mm-LDL能激活培养内皮细胞转录因子NF-kB, 自由基清除剂probucol和PDTC对mm-LDL激活内皮细胞转录因子NF-kB无明显抑制作用。变异型NIK及IKK能显著降低报告基因荧光素酶的活性，mm-LDL激活的NF-kB还能增加带有PDGFb基因上游调控序列（-189/＋43）的报告基因荧光素酶的活性。Slot blot结果显示变异型NIK能显著减少受mm-LDL刺激的内皮细胞 PDGFb mRNA含量。结论 mm-LDL可通过NIK-IKK途径激活内皮细胞转录因子NF-kB并促进PDGFb基因表达。
- 尹鸿操刘欣岩刘佩毛张华梁平王宗立佘铭鹏
- 关键词：动脉粥样硬化内皮细胞NF-KB
- 包载雷帕霉素的聚乳酸-聚乙醇酸纳米粒子对小型猪冠状动脉损伤后平滑肌细胞增殖的影响及机制
- 2016年
- 目的研究局部血管内灌注包载雷帕霉素（RPM）的聚乳酸-聚乙醇酸共聚物（PLGA）纳米粒子（NPs）对损伤-狭窄小型猪冠状动脉损伤后平滑肌增殖、基质金属蛋白酶（MMP）-2、基质金属蛋白酶抑制物（TIMP）-2及p27^kip1mRNA表达的影响。方法28头小型猪模型随机数字表法分为4组，每组7只，冠状动脉过大球囊损伤后经Dispatch^TM球囊局部分别灌注生理盐水、5．0mg／ml空白NPs、1．0mg／ml RPM和5．0mg／ml RPM—PLGA NPs。手术第30天复查造影并留取冠脉标本。评价干预前后各组冠脉造影血管狭窄程度，切片常规行苏木精-伊红、Weigert氏间苯二酚复红和苦味酸-天狼星红染色并行形态学比较。免疫组化染色法检测增殖细胞核抗原（PCNA）、MMP-2、TIMP-2，原位杂交法检测p27^kip1 mRNA表达水平。结果共21头小型猪完成实验：生理盐水组、空白PLGANPs组、RPM组及RPM—PLGANPs组分别6、4、5、6头。各组间损伤-狭窄模型造成的即刻损伤程度无统计学意义，RPM—PLGANPs组第30天造影血管狭窄程度明显低于生理盐水和空白NPs组（P〈0．01）和RPM组（P〈0．05）。RPM—PLGANPs组新生内膜面积NIA、内外弹力板围绕面积比值及增生指数显著小于其他三组（均P〈0．05），而最大内膜厚度MIT、内弹力板围绕面积IELA大于其他三组（均P〈0．05）。RPM—PLGANPs组阳性区域平均积分光密度值为0．35±0．06，显著高于空白NPs组（0．12±0．05，P〈0．01）及生理盐水、RPM组（0．16±0．03和0．15±0．03，P〈0．05），MMP-2／TIMP-2比值及PCNA组化染色阳性表达指数及均低于其余三组（均P〈0．05）。结论RPM-PLGA NPs结合Dispatch^TM球囊血管腔内给药抑制损伤后小型猪冠状动脉VSMC增殖和细胞外基质生成而抑制再狭窄发生，是用于治疗血管增殖性疾患有临床前景的手段之一。
- 苗立夫尹燕平崔永亮陈连凤曾勇黄超联朱文玲宋存先张华佘明鹏杨菁
- 关键词：雷帕霉素小型猪冠状动脉再狭窄局部给药
