李斌
- 作品数：4 被引量：4H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院麻类研究所农业部茎纤维生物质与工程微生物重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- β-甘露聚糖酶基因高效表达体系的构建被引量：2
- 2009年
- 为构建β-甘露聚糖酶基因高效表达体系,采用重叠区扩增基因拼接法将苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)CTC S-层蛋白启动子和欧文氏杆菌(Erwinia carotovora)CXJZ95-198 β-甘露聚糖酶基因完整开放阅读框定向连接,得到基因拼接体slp-man。将slp-man克隆到高效表达载体pET-28a+上,并转化到大肠杆菌(Escherichia coli)JM109中。结果表明,β-甘露聚糖酶基因高效表达体系构建成功,重组菌发酵11h酶活达到671.3U·mL-1,是欧文氏杆菌CXJZ95-198的1.48倍。
- 李斌刘正初王溪森石岩
- 关键词：Β-甘露聚糖酶基因重叠区扩增基因拼接法
- 草本纤维提取专用复合酶工程菌株的构建
- 2009年
- [目的]研究如何构建草本纤维提取工程菌株。[方法]用PCR扩增的方法获得甘露聚糖酶、果胶酶和木聚糖酶DNA片段,连到载体上,获得单质酶表达载体,依次将单质酶载体转入大肠杆菌JM109中,使其共存于同一宿主细胞。[结果]获得了一个果胶酶新基因(EU597234);得到了能同时产甘露聚糖酶、果胶酶、木聚糖酶3种酶的复合酶工程菌株。[结论]草本纤维生物提取是一个复杂的生物反应过程,构建草本纤维提取菌株既要考虑菌株所产的酶又要考虑菌株本身的生物学特性。
- 王溪森刘正初李斌冯湘沅段盛文郑科成莉凤
- 关键词：菌株果胶酶
- 甘露聚糖酶3′序列缺失与酶功能间的关系初探
- 2009年
- 初步研究了3′端对甘露聚糖酶的功能重要性,即以甘露聚糖酶的二级结构为基础,用PCR扩增的方法获得3′端特异性缺失的甘露聚糖酶DNA片段,连接到载体上,表达并鉴定酶的活性。结果表明,删除390bp依然具有酶活性,3′端的部分序列不是酶具有功能所必需的。
- 王溪森刘正初李斌冯湘沅段盛文郑科成莉凤
- 关键词：甘露聚糖酶删除
- 甘露聚糖酶基因3′端缺失研究被引量：2
- 2009年
- [目的]初步研究甘露聚糖酶基因3′端对甘露聚糖酶功能的重要性。[方法]以甘露聚糖酶的二级结构为基础,用PCR扩增的方法获得3′端特异性缺失的甘露聚糖酶DNA片段,连接到载体上,表达并鉴定酶的活性。[结果]删除甘露聚糖酶基因3′端246 bp后甘露聚糖酶依然具有酶活性。[结论]甘露聚糖酶基因3′端的部分序列不是酶具有功能所必需的。
- 王溪森刘正初李斌冯湘沅段盛文郑科成莉凤
- 关键词：甘露聚糖酶删除
