温泉
- 作品数：9 被引量：30H指数：3
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- 小鼠高迁移率族蛋白B1启动子的构建与转录活性检测
- 2014年
- 【目的】构建小鼠高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1 protein,HMGB1)启动子全长序列的荧光素酶报告基因用于药物筛选。【方法】采用PCR技术扩增小鼠HMGB1基因启动子全长序列,用GV238载体构建报告质粒GV238-HMGB1-P-Luc,以pGL3-basic作为阴性对照质粒,与内参质粒pRL共转染Hela细胞,以内毒素(LPS,0.2μg/mL)作为激活剂,以正丁酸钠(SB,10 mmol/L)作为抑制剂,分组处理24 h后检测荧光素酶活性。【结果】经酶切、PCR及测序鉴定证实克隆的HMGB1基因启动子全长2 140 bp,DNA序列正确无突变。与pGL3-basic组比较,GV238-HMGB1-P-Luc组荧光素酶活性显著增强(P<0.05);与GV238-HMGB1-P-Luc组比较,LPS组荧光素酶活性显著增强(P<0.01);与LPS组比较,SB组荧光素酶活性显著降低(P<0.01)。【结论】HMGB1基因启动子报告基因构建成功,LPS可以增强其表达,SB则可以抑制LPS刺激下的HMGB1启动子表达增强,可为下一步筛选具有调控HMGB1启动子活性的药物奠定基础。
- 温泉杜少辉田瑞敏黎晖白晔李菲雷航陈东风李伊为周健洪张赛霞邓汝东余曜
- 关键词：高迁移率族蛋白B1启动子荧光素酶报告基因
- 不同盐浓度影响中药外洗方中小檗碱透皮吸收的体外实验研究被引量：4
- 2013年
- 目的不同盐浓度影响中药外洗方中小檗碱透皮吸收的体外实验研究。方法建立小檗碱皮肤渗透液的高效液相色谱检测法,利用昆明小鼠腹部皮肤,以Franz扩散池研究盐对小檗碱的透皮能力,研究含0%、0.1%、0.9%、2.7%、3.6%不同盐浓度外洗方中小檗碱的透皮吸收效果。结果小檗碱在体外可以通过透皮吸收,含0.9%和2.7%盐在3～8h的促渗作用明显优于含0%盐组。通过单位时间透皮量比较,2～3 h可能是药物的最佳透皮吸收时间。3.6%盐组在1～4 h有促渗作用,但是4～8 h则抑制小檗碱的透皮吸收。结论 0.1%、0.9%、2.7%盐均能够增加小檗碱的透皮吸收,其中0.9%盐能显著增加小檗碱的透皮量和透皮速率,2～3 h可能是药物的最佳吸收时间。
- 黄开远温泉黎晖杨开磊杨伟华秦红芳陈静曾玲
- 关键词：小檗碱透皮吸收外洗液
- α-糜蛋白酶联合盐酸氨溴索雾化吸入对AECOPD患者动脉血气指标改善及生活质量的影响被引量：12
- 2017年
- 目的探讨α-糜蛋白酶联合盐酸氨溴索注射液雾化吸入对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者动脉血气指标改善及生活质量的影响。方法 AECOPD患者80例,按治疗方法不同分成观察组和对照组,各40例。对照组采用盐酸氨溴索注射液雾化吸入治疗,观察组采用α-糜蛋白酶联合盐酸氨溴索注射液雾化吸入治疗。比较两组临床疗效、临床观察指标、治疗前后动脉血氧分压(PaO_2)、动脉血二氧化碳分压(Pa CO2)、p H改善情况及生活质量评分(SF-36)。结果治疗前两组PaO_2、Pa CO2、SF-36评分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组总有效率高于对照组(P<0.05);患者肺部X线改善时间、肺部啰音消失时间、喘憋消失时间、住院时间少于对照组(P<0.05);两组PaO_2、Pa CO2均有所改善,观察组PaO_2高于对照组,Pa CO2低于对照组,p H值高于对照组(P<0.05);SF-36评分高于对照组(P<0.05)。结论α-糜蛋白酶联合盐酸氨溴索注射液雾化吸入治疗AECOPD患者能提高总有效率,降低肺部X线改善时间、啰音消失时间、喘憋消失时间及住院时间,改善动脉血气指标,提高生活质量。
- 崔英海杜少辉李师常晓楚淑芳温泉
- 关键词：Α-糜蛋白酶盐酸氨溴索注射液慢性阻塞性肺病急性加重期生活质量
- 细胞之精被引量：3
- 2016年
- 细胞是最基本的、最微小的生命单位,是生命科学的基本研究模型。本文从精的理论角度探讨以细胞作为中医学基本模型的可行性。细胞之先天之精(生殖之精)是指细胞内的遗传物质(DNA)与能启动生殖或发育过程的必要物质(转录因子),细胞的后天之精(水谷之精)则指除先天之精外的细胞内液部分。以中医学的基本理论谨慎地认知细胞的生命规律,并且与现代生命科学的研究进展紧密结合起来,可能有助于中医基本理论的现代化进程。
- 雷航温泉田瑞敏黄慧娜许沁刘霞黎晖
- 关键词：细胞中医基础理论细胞生物学
- 大黄酸对LPS刺激下RAW264.7细胞HMGB1表达的影响被引量：3
- 2017年
- 目的:探究大黄酸对脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的影响。方法:将培养的RAW264.7细胞分为空白对照组、模型组(LPS)、正丁酸钠阳性对照组及大黄酸低(140μmol/L)、高(210μmol/L)浓度组共5组,给药24 h后收集培养液上清并提取细胞总RNA、总蛋白。采用ELISA法检测培养液上清中HMGB1的含量;RT-PCR法检测HMGB1 mRNA表达;Western Blot检测HMGB1、HDAC3蛋白表达;免疫细胞化学共聚焦显微镜观察HMGB1定位。结果:与LPS组比较,大黄酸低、高浓度组细胞培养液上清HMGB1含量和细胞HMGB1总蛋白及HMGB1 mRNA表达均显著降低(P<0.05或P<0.01);激光共聚焦显微镜结果表明,LPS组红色标记的HMGB1出现在细胞质内,大黄酸组胞质内的HMGB1显著减少,胞核增多。与LPS组比较,大黄酸低、高浓度组细胞HDAC3总蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:大黄酸能有效抑制LPS刺激下RAW264.7细胞HMGB1的表达和释放。
- 黄慧娜温泉雷航田瑞敏梅丽艳黎晖
- 关键词：高迁移率族蛋白B1大黄酸
- 丹皮酚对脂多糖刺激的RAW264.7细胞炎症与自噬的影响被引量：6
- 2020年
- 目的:以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的RAW264.7细胞,以自噬诱导剂雷帕霉素(rapamycin,Rap)促进自噬为主要模型,研究丹皮酚(paeonol,P)对RAW264.7自噬与免疫功能的影响。方法:使用LPS 1μg·ml-1刺激RAW264.7细胞6 h,丹皮酚200μmol/L处理12 h,Rap 100 ng·ml-1作用6 h,蛋白免疫印迹法(western blot,WB)检测自噬相关因子LC3B、Beclin、P62和炎症相关因子TN F-α、IL-1β的表达水平,激光共聚焦荧光共定位法(immunofluorescence,IF)检测LC3B、P62蛋白的荧光表达和定位;酶联免疫分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测RAW264.7细胞TNF-α的分泌。结果:在脂多糖诱导RAW264.7炎症反应的细胞模型中,添加丹皮酚药物后LC3B、Beclin表达增多,P62表达减少,LC3B-l向LC3B-ll的转换效率增强;雷帕霉素抑制IL-1β、TNF-α的表达,与丹皮酚联用进一步抑制IL-1β、TNF-α的表达和分泌。结论:丹皮酚通过促进细胞自噬来抑制炎症反应,丹皮酚与雷帕霉素联用加强了对炎症的抑制作用。
- 张超颖苗纪飞刘霞许沁叶森温泉梅丽艳叶芃李春黎晖
- 关键词：丹皮酚自噬脂多糖雷帕霉素炎症
- 大黄素调控HMGB1表达及PPARγ共阻遏机制防治内毒素休克
- 目的: 脓毒症(sepsis)的实质是致病菌急性感染所造成的严重急性全身性炎症反应(SIRS)，脓毒症也常见于创伤、烧伤造成的严重组织损伤后并发的无菌性SIRS，内毒素休克是脓毒症恶化后的病理进程之一。目前，内毒素休克...
- 温泉
- 关键词：内毒素休克大黄素
- SPAG9基因沉默对人非小细胞肺癌细胞生物学功能的影响
- 2018年
- 目的:研究精原相关抗原9(spermatogenic antigen 9,SPAG9)对非小细胞肺癌A549细胞增殖、细胞周期、凋亡、迁移等生物学功能的影响。方法:A549细胞转染SPAG9 siRNA后,qRT-PCR和Western blot检测转染前后SPAG9的表达变化;CCK-8检测SPAG9对A549细胞增殖的影响;流式细胞术检测SPAG9基因对A549细胞周期和凋亡的影响;Transwell实验检测SPAG9基因对A549细胞体外迁移能力的影响。结果:qRT-PCR检测结果表明:实验组的SPAG9的相对表达量为(0.28±0.12),明显低于对照组(1.04±0.06)(P<0.05);Western blot结果表明:对照组相对蛋白表达水平为(0.34±0.12),实验组为(0.11±0.08),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);CCK-8实验表明:SPAG9沉默可抑制细胞增殖;流式细胞术检测结果表明:沉默SPAG9可使A549细胞发生G0/G1期阻滞,凋亡增加;Transwell迁移实验表明:实验组细胞迁移能力明显低于对照组(P<0.05)。结论:SPAG9沉默可抑制非小细胞肺癌A549的增殖、迁移,促进凋亡发生,为探寻中药治疗非小细胞肺癌的靶点奠定了实验基础。
- 崔英海杜少辉常晓温泉楚淑芳李师
- 关键词：非小细胞肺癌细胞增殖细胞周期
- p53基因启动子转录活性检测细胞模型的建立被引量：2
- 2013年
- 【目的】构建p53基因启动子靶控报告基因细胞模型,为高通量筛选出以p53为靶标的中药提供新的细胞模型。【方法】采用瞬时转染报告基因测定法,确定最佳转染方案及p53基因启动子转录活性细胞模型的建立和验证,观察p53抑制剂PFT-a、血清饥饿、过氧化氢、自噬激活剂雷帕霉素对p53基因启动子转录活性PC12细胞模型的量效和时效关系。【结果】PFT-α诱导3 h,对p53基因启动子转录活性抑制率达50%左右;血清饥饿诱导12、24、36 h,p53基因启动子转录活性是对照组的1.6倍;过氧化氢300μmol/L诱导9 h,p53基因启动子转录活性是对照组的1.3倍;雷帕霉素在浓度为0.1、1 nmol/L可上调p53基因启动子转录活性,呈浓度依赖性,而5 nmol/L及更高浓度可下调p53基因启动子转录活性。【结论】成功建立采用p53基因启动子报告基因检测p53基因启动子转录活性的特异性细胞模型,血清饥饿、过氧化氢、雷帕霉素可诱导p53基因启动子的转录活性。
- 秦红芳曾玲陈静白晔李菲黄开远温泉赖宝玲陈东风黎晖邓汝东周健洪魏刚刘东辉赖英桃李伊为
- 关键词：转录活性细胞模型血清饥饿
