王可
- 作品数：3 被引量：37H指数：2
- 供职机构：宁波大学海洋学院食品科学工程系更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金宁波市农业科技攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程更多>>
- 桃果实PpAO基因的电子克隆及生物信息学分析被引量：2
- 2013年
- 研究克隆桃果实中的PpAO(Prunus persica ascorbate oxidase)基因,并对其序列进行了生物信息学分析。研究采用电子克隆和RT-PCR(reverse transcription PCR)相结合的方法分离桃果实PpAO基因的cDNA全长序列,利用各种软件对序列进行生物信息学分析。实验成功获得全长1913bp的PpAO基因序列,该序列具有完整的开放阅读框(ORF,open reading frame),编码18个氨基酸的信号肽和518个氨基酸的成熟酶。对ORF进行PCR的验证结果和电子克隆的结果一致。序列分析显示该基因的氨基酸序列同大豆和葡萄具有很高的相似度,含有Cu-oxidase_3,Cuoxidase,Cu-oxidase_2三个同源结构域。
- 王可邵兴锋龚一富张兴龙
- 关键词：桃果实电子克隆
- 桃果实PpPFK基因的电子克隆及低温胁迫下的转录水平分析被引量：2
- 2013年
- 为了克隆桃果实中PpPFK(Prunus persica phosphofructokinase,磷酸果糖激酶)基因,并对其序列和不同低温胁迫下的转录水平进行分析。本研究采用了电子克隆和RT-PCR(reversetranscription PCR)相结合的方法分离桃果实PpPFK基因的cDNA全长序列,采用RT-qPCR(reversetranscription real-time quantitative PCR)技术分析桃果实在0℃、5℃冷藏过程中目的基因转录水平的变化。试验成功获得了全长1405 bp的PpPFK基因序列,该序列具有完整的开放阅读框(ORF,open reading frame),编码232个氨基酸。对ORF进行PCR的验证结果和电子克隆的结果一致。序列分析显示该基因的氨基酸序列同大豆和葡萄具有很高的相似度。RT-qPCR分析显示,5℃贮藏下的桃果实PpPFK基因转录水平在前14 d高于0℃果实,这可能导致5℃贮藏的桃果实发生更明显的冷害症状。本研究结果表明,桃果实PpPFK转录水平在不同低温贮藏过程中存在差异,这可能在桃果实低温胁迫响应过程中发挥重要作用。
- 余芳王可邵兴锋龚一富王鸿飞许凤
- 关键词：电子克隆转录水平
- 柑橘采后腐烂主要致病菌的分离鉴定及丁香精油对其抑制作用研究被引量：33
- 2013年
- 【目的】为了确定浙江宁海本地柑橘优势腐败菌及丁香精油对其的抑菌效果,【方法】从自然腐烂的柑橘上分离优势菌,采用传统真菌形态学鉴定方法结合rDNA-ITS序列分析方法进行鉴定,并采用体外试验研究丁香精油对优势菌的抑菌效果。【结果】结果表明,浙江宁海本地柑橘分离所得6株真菌分别为指状青霉(Penicillium digitatum)、柑橘链格孢(Alternaria citri)、枝孢样枝孢霉(Cladosporium cladosporioides)、聚多曲霉〔Aspergillus sydowii)、近玫色锁掷孢酵母(Sporidiobolus pararoseus)和卡利比克毕赤酵母(Pichia caribbica);其中P.digitatum和C.cladosporioides是优势腐败菌;体外抑菌试验表明,丁香精油对P.digitatum和C.cladosporioides有较好的抑菌效果,抑制中浓度(EC50)分别为2.51 mL·L-1和0.57 mL·L-1;最小抑菌浓度(MIC)分别为6 mL·L-1和3 mL·L-1。【结论】丁香精油可以抑制柑橘采后主要病原菌的生长。
- 解淑慧邵兴锋王可张兴龙王鸿飞
- 关键词：柑橘优势菌RDNA-ITS丁香精油
