褚庆华
- 作品数：1 被引量：6H指数：1
- 供职机构：上海出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目上海市教育委员会重点学科基金国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNA逆转录荧光定量PCR检测食源性沙门菌被引量：6
- 2011年
- 目的:针对活的沙门菌,建立快速检测的方法。方法:以沙门菌OmpC基因RNA为检测对象,针对其设计荧光定量PCR引物和探针,摸索合适的反应体系和反应条件,同时以沙门菌及其亲缘关系较近的对照菌株进行特异性实验,以PCR产物克隆质粒和沙门菌纯培养物梯度稀释进行灵敏度实验,最终建立食源性沙门菌快速检测逆转录实时荧光PCR方法。结果:所设计的S-F/S-R引物和S-Probe探针能有效地将沙门菌与其他亲缘关系较近的肠杆菌科细菌如金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、志贺菌等区分开来。该方法对沙门菌纯培养物梯度稀释后的检测下限为<10 CFU/25 ml。同时,将建立的RNA逆转录荧光定量PCR检测方法与DNA荧光定量检测方法进行比较,DNA荧光定量PCR灵敏度仅为103 CFU/ml,远低于逆转录荧光定量PCR,且逆转录荧光定量PCR针对RNA进行检测,与活的沙门菌相关联,准确度更高。结论:建立沙门菌逆转录荧光定量PCR检测技术,具有特异、灵敏、快捷的特点,适用于食品中沙门菌的快速检测。
- 张弛褚庆华杨捷琳孟瑾韩奕奕包建强
- 关键词：沙门菌RNA
